针刺对大鼠淋巴细胞及肾上腺髓质细胞ppENK和c－fos基因表达的影响

将４０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为４组：①针刺“足三里”穴２０ｍｉｎ；②不施针刺，上架２０ｍｉｎ；③针刺２０ｍｉｎ后８ｈ；④不针，上架２０ｍｉｎ后８ｈ。以钾离子透入法于针刺、上架前后测大鼠痛阈。制备分离的周血淋巴细胞滴片，膜片以及肾上腺石蜡切片标本。以生物素标记的ｃ－ｆｏｓｃＤＮＡ探针及ｐｐＥＮＫ寡核苷酸探针分别显示ｃ－ｆｏｓ基因及ｐｐＥＮＫ基因的表达。除去对两种标本进行原位杂交以外，对淋巴细胞尚进行斑点印迹检测。结果表明：①针后痛阈提高（Ｐ＜０．００１）；②淋巴细胞及肾上腺髓质细胞的ｐｐＥＮＫ及ｃ－ｆｏｓ的基因表达在４组比较中，第１组的信号均强于其它３组（Ｐ＜０．００１）；③淋巴细胞及肾上腺髓质细胞的ｐｐＥＮＫ基因表达与镇痛效应呈显著正相关（Ｐ＜０．００１）。结果表明针刺可立即且同时诱导ｃ－ｆｏｓ和ｐｐＥＮＫ的表达，这两种基因的表达均参于针刺效应。     

不同质量浓度胰蛋白酶和EDTA细胞消化分离液对人表皮细胞生长的影响

目的:探讨人表皮生物工程的适宜条件.方法:以NIH-3T3细胞作为滋养层,以热溶素分离表皮与真皮,将表皮应用4组不同质量浓度的胰蛋白酶(T)和EDTA(E)的消化液(A组:0.5 g/L T加0.2 g/L E,B组:2.5 g/L T加0.2 g/L E,C组:0.5 g/L T加1 g/L E,D组:2.5 g/L T加1 g/L E)消化为单个细胞.表皮细胞接种于含8种成分的DMEM-F12的完全培养液中.记录接种表皮细胞的克隆形成率、扩增倍数以及融合时间.结果:接种表皮细胞的克隆形成率和扩增倍数分别是:A组为(10.00±0.09)%和(500.00±9.63)倍,B组为(7.00±0.12)%和(350.00±6.16)倍,C组为(17.00±0.18)%和(850.00±8.83)倍,D组为(14.00±0.19)%和(700.00±9.55)倍,4组间差异均有统计学意义(P＜0.05).接种表皮细胞的融合时间:A组为第(10.00±0.82)天,B组为第(10.00±0.82)天,C组为第(11.50±1.29)天,D组为第(12.00±2.45)天.4组的接种表皮细胞克隆形成率与融合时间无关.结论:同一质量浓度的EDTA作用下,0.5 g/L胰蛋白酶组比2.5 g/L胰蛋白酶组更有利于表皮细胞克隆的形成和融合.     

8-Br-cAMP诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡的实验研究

目的探讨以8-Br-cAMP体外诱导Hela细胞凋亡中,相关基因及蛋白质表达与凋亡之间的关系,为使用无毒性8-Br-cAMP治疗宫颈癌提供依据.方法采用TUNEL法检测凋亡细胞,采用原位杂交和完整细胞原位斑点印迹技术检测凋亡相关基因及蛋白质的表达.结果8-Br-cAMP试验组细胞凋亡率为(40.0±1.32)%,对照组(5.2±0.74)%;8-Br-cAMP可上调wp53,iNOS基因表达,下调mp53,bc1-2,c-myc基因表达,可增强iNOS和FasL的酶活性,降低Fas免疫反应性.以上各结果,试验组与对照组相比P＜0.01.结论8-Br-cAMP能诱导Hela细胞凋亡,可作为一种治疗宫颈癌的新途径.     

羊心室肌细胞的聚类分析

光学显微镜下观测了常规制作的羊心室组织标本中,33个心室肌细胞的各种形态学参量。应用模糊聚类分析对所观察的心肌细胞进行了软分类。作者认为,目前将心室肌分为:束细胞、兼性心肌,准工作心肌和终末工作心肌细胞四类更为适宜。对形态学观察及数学分析结果的生理学意义作了简要的讨论。     

大鼠垂体β-内啡肽样免疫反应性的昼夜变动节律及其与痛阈的关系

生物节律是自然界的一种普遍现象,它广泛地存在于机体内的各个水平。本文应用免疫组化方法(HRP-SpA法)和放射免疫分析法(RIA),对90例大鼠垂体中β—内啡肽样免疫反应性(β-EP-IR)的含量在昼夜中的变化进行了半定量观察和定量测定,同时将这种昼夜变动节律与其基础痛阈相比     

金银花抗氧化作用的分子学机理研究

目的探讨金银花抗氧化作用分子学机理。方法采用过氧化氢（H2O2）作用于人正常RBL肝细胞，制作氧化应激损伤的细胞模型。将培养的细胞分为四个实验组：正常对照组（C），H2O2损伤组（H2），金银花前保护组（Jb），金银花后保护组（Ja）。采用TUNEL和DNA Ladder法，检测各组细胞凋亡情况。应用免疫组化和Western blot观察各组细胞的HSP-70、NF-kB、Bcl-2、Bax及Caspase-3的表达及免疫反应活性。应用MTT实验检测RBL细胞的生存率。结果Jb组的细胞凋亡率明显低于H2和Ja组，Bcl-2表达增高，HSP-70、NF-kB、Bax和Caspase-3的表达降低。结论金银花对RBL细胞氧化应激损伤具有一定保护作用．且前保护作用效果好于后保护作用，其保护作用机理可能是通过抑制HSP-70和NF-kB的表达，阻抑NF-kB信号传导途径并提高细胞内抗氧化防御酶系水平。     

免疫组织化学与完整细胞原位蛋白质斑点印迹联合应用的探讨

免疫组织化学与完整细胞原位蛋白质斑点印迹联合应用的探讨郑乃刚１）吴景兰２）陈奎生２）丁一２）王一菱２）１）河南省临床检验中心郑州４５００５２２）河南医科大学分子细胞生物学研究中心郑州４５００５２关键词斑点印迹；免疫组织化学；技术与方法玻片上细胞标本的...     

全反式维甲酸诱导的食管癌细胞DNA聚合酶β的表达

目的：了解食管癌细胞分化过程中DNA聚合酶β(polβ)基因的表达。方法：采用全反式维甲酸(ATRA)诱导人食管癌Eca109细胞分化,应用甲基绿-派洛宁染色、原位杂交、免疫组化和Western blot方法分别检测细胞分化和polβ基因的表达。结果：ATRA作用5d后可以诱导Eca109细胞分化。Wt—polβ和mt—polβ(截短的)基因的表达随着Eca109细胞的分化而降低。结论：ATRA可下调Eca109细胞wt-polβ和mt—polβ的表达,促使其分化。     

ANAE标记人周血淋巴细胞的方法改进及细胞分型观察

通过对酸性非特异性酯酶(ANAE)标记人周血淋巴细胞方法的10项步骤对比,见到对分离的淋巴细胞以戊二醛弱固定,15％福尔马林钙(1.3％)复固定时,酶活性保存和胞核复染好。此福尔马林钙固定全血膜片,尚具有溶解红细胞的优点,尤其是固定以磷酸缓冲盐水稀释的血膜片,比血涂片更易使片上的红细胞溶去,而使淋巴细胞数目集中,易于计数。以国产重氮化副品红及0.5mg/ml的α-醋酸萘酯浓度的培育液,于37℃培育约2h,ANAE细胞分型辨别较好。共观察28例成人,血片淋巴细胞及分离的淋巴细胞的ANAE分型中,点型约占56％,弥散型约占25％,阴性型约占19％,两者计数结果近似。对同一个体分离的淋巴细胞与血片淋巴细胞做对比观察,见到点型减少不显著,弥散型明显增多,阴性型明显减少。     

电刺激对机体痛阈和细胞中介免疫的影响

对28例针炙科患者合谷穴进行穿皮电刺激,在刺激前后各测痛阈,并取血分离淋巴细胞,进行酸性非特异性酯酶组织化学染色和抗人OK_(T4)单克隆抗体的免疫组织化学染色。结果表明患者经电刺激后痛阈提高明显(P<0.01),淋巴细胞的ANAE-F~+型,OK_(T4)型提高明显(P<0.01),而ANAE—D~+淋巴细胞降低(P相似文献