副溶血性弧菌的研究进展

分子生物学的发展为副溶血弧菌的研究提供了广阔的空间,近年来,在副溶血栓性弧菌的铁摄取系统,膜离子转运系统,致病机理,快速诊断及基因分型等方面的研究取得了一些进展,本文对此作了一综述。     

军队非常时期的急性感染性腹泻

急性感染性腹泻是严重威胁人类健康的传染病之一。军队作为一个特殊的群体在非常时期(如战争、军事演习、抢险救灾和调防等)急性感染性腹泻的流行概况、流行特征和防疫措施等有其特殊性。本文就军队非常时期的急性感染性腹泻作一综述。     

副溶血性弧菌直接溶血毒素65位氨基酸突变体的构建

目的：将副溶血性弧菌直接溶血毒素65位氨基酸进行突变。方法：酶切tdh基因获得tdhm268-570bp，一对突变引物扩增出tdhm1-267bp，与载体pUC19连接并转化大肠杆菌JM109；对重组质粒进行测序鉴定。结果：DNA测序结果表明tdhm和tdh的序列有2个碱基的差别。结论：按照预期设计成功突变了副溶血性弧菌的直接溶血毒素的65位氨基酸，为构建该菌的基因工程菌苗奠定了良好的基础。     

副溶血性弧茵耐热直接相关溶血素基因的克隆与序列分析

目的探讨克隆副溶血弧菌(Vp)耐热直接相关溶血素基因的方法.方法用PCR技术扩增目的基因双酶切载体pGEX-3X和目的基因DNA,连接并转化大肠杆菌DH5α.对重组质粒进行PCR鉴定、酶切鉴定和序列分析.结果凝胶电泳显示,标准株Vp14-91基因组DNA的PCR产物长约600 bp.阳性克隆的PCR产物也为一长约600 bp的条带,经双酶切可切出一约600bp的条带.DNA测序结果表明与GenBank中的序列有99.1%的同源性.结论利用该方法成功克隆了目的基因,为制备用于现场检测的基因探针和Vp的保护性疫苗以及Vp的致病机制研究奠定了基础.     

鉴定致病菌毒力因子方法的进展

综述鉴定致病菌毒力因子的分子生物学和遗传分析方法，如签名标记法、简并引物PCR、体内表达技术、差减杂交法、随机引物PCR、差异显示 技术、酵母双杂交系统和噬菌体显示系统等。     

副溶血性弧菌直接溶血毒素基因原核表达载体的构建

副溶血性弧菌 (Ｖｉｂｒｉｏｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉ ｃｕｓ,Ｖｐ)是一种能引起食物中毒和旅游者腹泻的嗜盐性细菌。直接溶血毒素(ｔｈｅｒｍｏｓｔａｂｌｅｄｉｒｅｃｔｈｅｍｏｌｙｓｉｎ,ＴＤＨ)是其主要的致病因子。本研究通过构建ｔｄｈ基因原核表达载体 ,并实现表达 ,以获得与天然抗原结构接近的重组抗原。构建重组质粒ｔｄｈ/Ｔｒｃ99Ａ经酶切及ＰＣＲ鉴定。转化大肠杆菌ＪＭ10 9后得到重组菌ｔｄｈ/Ｔｒｃ99Ａ/ＪＭ10 9(命名为ＮＷⅡ )。取 10ｍｌＮＷⅡ过夜饱和生长菌加入 10 0 0ｍｌＬＢ Ａｍｐ ,37℃培养至菌液Ａ6 0 0 =0 .…