清热活血方抑制Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠滑膜组织血管新生的研究

目的 研究清热活血方的活血化瘀作用,探讨该方药抑制滑膜组织内血管新生的机制.方法 采用Ⅱ型胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠模型,治疗组用清热活血方大、小剂量干预,同正常组、模型组、阳性药物组比较,观察清热活血方对CIA大鼠关节肿胀度、关节病理切片、滑膜病理切片、微血管密度(MVD)、血清中致炎因子干扰素(INF)-γ及血管疾病相关指标组织型纤溶酶原激活因子(tPA)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的影响.结果 清热活血方能明显缓解CIA大鼠关节肿胀;关节病理切片显示清热活血方可以抑制关节内滑膜的增生,延缓关节软骨与骨的破坏.滑膜病理切片显示,清热活血方大、小剂量组滑膜组织内炎症细胞的浸润较模型组减少,且微血管密度较模型组降低;清热活血方大、小剂量组大鼠血清中INF-γ含量较模型组明显减少(P＜0.05).与模型组比较,清热活血方大剂量组可以减少tPA的生成(P＜0.05);与模型组比较,清热活血方小剂量组可以下调eNOS的表达(P＜0.05),大剂量组能显著下调eNOS的表达(P＜0.01),说明该方对于eNOS表达具有抑制作用,并且呈剂量相关性.结论 清热活血除了可以有效地控制关节的炎症,延缓关节内软骨与骨的破坏,减少关节内滑膜的增生外,还可以改善关节周围血瘀的情况,抑制促血管生成因子的表达,从而减少新生血管的数量,较好地控制活动期类风湿关节炎的病情.     

麻杏石甘汤治疗新冠肺炎细胞因子风暴的网络药理学分析

目的:用网络药理学方法探讨麻杏石甘汤成分、靶点、通路和生物学功能,阐明其治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)细胞因子风暴的作用机制。方法:通过TCMSP、TCMID数据库以及文献报道,搜索麻杏石甘汤每味中药的成分和靶点,用Cytoscape软件构建和成分-靶点网络。用STRING搜素靶点的相关蛋白,并构建PPI网络。利用MECODE和ClusterOne聚类找出二者共同的关键靶点。利用Metascape和ClueGO对关键靶点进行通路和生物学功能富集分析。结果:麻杏石甘汤中麻黄有效成分6个、苦杏仁8个、石膏3个、生甘草92个。聚类分析得到67个关键靶点,其中IL-6和TNF是重要的核心靶点。麻杏石甘汤主要参与的分子通路和生物学功能与病毒感染和细胞因子免疫调节相关的是:人T细胞白血病病毒1型（TLV-1）感染;单纯疱疹病毒感染;TNF-R1信号通路和相关信号复合物;整合素1途径;白细胞介素信号;TH17细胞分化;炎性反应的调节;PI3K-Akt信号通路;白细胞介素-2介导的信号通路;免疫应答中细胞因子分泌的负调控;内皮屏障建立的调控;T细胞稳态增殖的调控。结论:麻杏石甘汤通过多成分、多靶点对机体的病毒感染和免疫炎性反应起到多方面的调控,包括促进TH细胞分化和T细胞稳态抑制病毒复制,负调控白细胞介素、TNF、整合素等免疫炎性反应递质消除细胞因子风暴。麻杏石甘汤针对COVID-19的病毒复制和细胞因子风暴具有显著的调节作用。     

慢性复合式应激对雄性小鼠生育能力的影响

目的:了解不同应激时间的慢性复合式应激对雄性小鼠生育能力的影响.方法:72只昆明种雄性小鼠随机分为正常3周组、应激3周组、正常5周组、应激5周组、正常7周组、应激7周组.将心理应激、束缚、尾悬挂、站台、夹尾搏斗5种应激方法(纯心理应激、心理和生理复合应激)随机安排到各应激时间内,制作慢性复合式应激动物模型,于末次应激后第2天,摘眼球取血,离心取血清进行促卵泡激素(FSH)、促黄体激素(LH)、睾酮(T)检测;取睾丸、附睾称重,进行精子计数、摄像(精子质量分析)和精子内pH值检测;并进行睾丸切片,HE染色后观察其病理变化.结果:5种应激方法组成的复合式应激方式能显著降低动物的体重增长率、精子密度和精子活率,精子内pH值及血清FSH、T水平有不同程度地降低.病理分析睾丸生精上皮的排列、层数、管腔精子数等也不同程度地改变.随着应激时间的延长,小鼠的体重增长率、精子内pH值等都呈上升的趋势.结论:5种应激方法组成的慢性复合式应激方式能显著改变雄性小鼠与生育有关的生理特性,降低其生育能力;随着应激时间的延长,部分指标可以出现可逆性变化.     

小站台水环境不同应激时间对组织中5-羟色胺的影响

目的探讨小站台水环境不同应激时间对小鼠胸腺、脾、脑组织中 5 羟色胺含量的变化 ,了解应激如何调节神经、内分泌而影响免疫功能。方法利用小站台水环境诱发应激模型 ,观察小鼠应激 48小时、2 4小时、12小时与对照组比较站台前后体重、组织指数 ,以及组织中 5 羟色胺含量的变化情况 ;结果站台前后小鼠体重与对照组相比无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,站台 48小时胸腺指数、脾指数与对照组相比有极显著性差异 (P <0 .0 0 1) ,而脑指数无显著性差异 (P >0 .0 5 )。应激 2 4小时组、应激 12小时组胸腺指数、脾指数、脑指数的改变均不明显 ,与对照组相比未达显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,但均有降低的趋势。应激 48小时组、应激 2 4小时组、应激 12小时组胸腺组织 5 羟色胺含量均有明显变化 ,与对照组相比有极显著性差异 (P <0 .0 0 1) ,应激 48小时组、应激 2 4小时组、应激 12小时组脾组织和脑组织 5 羟色胺含量均无明显变化 ,与对照组相比无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论应激可以通过神经内分泌网络影响胸腺组织 ,从而对免疫系统起作用。     

电针“次髎”穴对逼尿肌反射亢进大鼠骶髓排尿中枢c-fos表达的影响

目的:探讨电针次髎对逼尿肌反射亢进的效应及作用机制。方法:成年雌性SD大鼠44只,脊髓横断术后纳入37只,分为假手术组5只、模型组16只、电针组16只。电针组于大鼠出现尿失禁后给予电针双侧"次髎",每日1次,每次2h,共治疗14次。于治疗前后进行尿流动力学检测,于末次治疗后用免疫组化染色法观察骶髓排尿中枢原癌基因c-fos表达的情况。结果:逼尿肌反射亢进大鼠的最大膀胱内压较假手术组升高(P0.05),最大膀胱顺应性降低(P0.05),骶髓排尿中枢c-fos表达增多(P0.05)。治疗后,电针组的最大膀胱内压明显降低(P0.05),最大膀胱顺应性明显升高(P0.05),骶髓排尿中枢c-fos表达较模型组减弱(P0.05)。结论:电针"次髎"穴能抑制脊髓横断大鼠的膀胱活动过度状态,可以降低骶髓排尿中枢c-fos的表达,表明C纤维活动减弱,这可能是电针"次髎"治疗逼尿肌反射亢进的机制之一。     

风湿清对Ⅱ型胶原诱发类风湿关节炎大鼠白细胞介素-4、γ-干扰素及趋化因子的影响

目的 了解风湿清对类风湿关节炎大鼠血清及滑膜细胞培养上清液中白细胞介素4（IL- 4） 、γ干扰素（γ-IFN）、巨噬细胞趋化因子1α（MIP-1α）、Ⅱ型胶原抗体（CⅡ抗体）的调节作用,探讨清热活血法治疗类风湿关节炎的作用机理。方法 CⅡ抗体加弗氏完全佐剂诱发类风湿关节炎大鼠动物模型,ELISA方法检测大鼠血清及滑膜细胞培养上清液中CⅡ抗体、IL- 4 、γ-IFN及MIP-1α的含量。结果 与正常组比较,模型组血清CⅡ抗体含量均明显升高（P<0.01）,模型14天、28天组血清和滑膜细胞培养上清液中IL-4 含量下降,γ-\IFN、MIP-1α含量升高,差异有统计学意义（P<0.05 或P<0.01）;与模型组同期比较,风湿清14天组血清和滑膜细胞培养上清液IL- 4 含量升高、滑膜细胞培养上清液MIP-1α含量下降（P<0.05 或P<0.01）;风湿清28天组血清和滑膜细胞培养上清液MIP-1α含量均下降（P<0.05）。结论 风湿清能明显上调类风湿关节炎大鼠血清及滑膜局部IL- 4含量,对血清及滑膜局部γ-IFN有下调趋势,能明显下调全身和局部滑膜细胞MIP-1α的高表达,从而维持Th1/Th2细胞平衡,抑制滑膜局部的细胞及体液免疫反应,减轻慢性关节滑膜炎及血管炎病变。     

羧基化氨基多糖抗胃溃疡实验研究

羧基化氨基多糖能使大鼠胃液游离酸、总酸度和总酸排出量减少,胃蛋白酶活性降低,对大鼠幽门结扎所致胃溃疡有明显的防治作用。     

活血安心方减轻急性心肌梗死大鼠心肌过氧化损伤的实验研究

目的 探讨活血安心方防治急性心肌梗死大鼠心肌过氧化损伤的作用机制。方法 采用冠状动脉左前降支结扎复制急性心肌梗死大鼠模型,以复方丹参滴丸为阳性对照药。复方丹参滴丸组和活血安心方组自造模之日起,分别连续给药7天。采用彩色多普勒超声心动图法检测心功能。紫外分光光度计法检测血清和心肌组织诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、内皮型一氧化氮（eNOS）、超氧化物歧化酶（tSOD）活力和丙二醛（MDA）的含量。结果 与假手术组比较,模型组射血分数（EF）、左室缩短率（FS）显著下降（P<0.01）;与模型组比较,活血安心方EF、FS显著升高,差异有统计学意义（P<0.05）;各组血清iNOS、eNOS及tSOD活力的比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。与假手术组比较,模型组心肌组织中iNOS活力、MDA含量显著升高（P<0.01）,eNOS、tSOD活力均显著下降（P<0.01）;与模型组比较,活血安心方组心肌组织iNOS活力、血清和心肌组织MDA含量均显著下降（P<0.05）,eNOS、tSOD活力均显著升高（P<0.05）;与复方丹参滴丸组比较,活血安心方组各项指标差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 活血安心方对急性心肌梗死大鼠的心功能有显著提高和改善作用;该作用与活血安心方调节iNOS/eNOS表达失衡,减轻心肌组织过氧化损伤有关。     

不同应激方式中小鼠下丘脑与垂体中促肾上腺皮质激素释放激素、促肾上腺皮质激素表达与血清糖皮质激素水平的变化规律及加味逍遥丸的调节作用

目的了解心理和生理（小站台水环境复合）应激及纯心理（情绪）应激后不同时间小鼠下丘脑与垂体促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、促。肾上腺皮质激素（ACTH）的表达和血清糖皮质激素（GC）变化规律及加味逍遥丸的调节作用。方法利用小站台水环境装置应激动物和多功能条件反应箱电刺激小鼠激怒,而致试验鼠情绪紧张的纯心理应激方法制造动物模型;中药加味逍遥丸按2mg／g体重灌胃给药;免疫组化法检测CRH、ACTH蛋白;放射免疫法检测血清糖皮质激素含量。结果小站台水环境应激状态下,下丘脑CRH和垂体ACTH的表达面积都于3h明显增多;血清糖皮质激素于12h升高,并随应激时间延长继续升高。加味逍遥丸在小站台水环境应激72h时能减少下丘脑CRH、垂体ACTH的表达面积和降低反应强度,并下调血清糖皮质激素水平。在情绪应激状态下,下丘脑CRH和垂体ACTH表达面积和强度都于1d增多和增强,延长应激时间,下丘脑CRH、垂体ACTH表达和GC含量均维持在1d水平;加味逍遥丸在情绪应激5d时能降低下丘脑CRH表达强度,减少垂体ACTH的表达面积和降低强度,并下调血清糖皮质激素水平。结论小站台水环境应激状态下下丘脑CRH和垂体ACTH表达面积增多和反应强度明显增强;加味逍遥丸对应激造成的下丘脑CRH和垂体ACTH高表达有调节作用。情绪应激状态下下丘脑CRH和垂体ACTH表达面积增多和反应强度明显增强,加味逍遥丸对应激造成的下丘脑CRH和垂体ACTH高表达有调节作用。     

沙棘与疏肝理气及清热利湿方配伍对脂肪肝大鼠的防治作用

目的:探讨沙棘分别与逍遥散及二妙散配伍对实验性脂肪肝大鼠的防治作用.方法:大鼠随机分为5组:正常组(N)、模型组(M)、西药(东宝肝泰)组(D)、沙棘配逍遥丸组(SA)、沙棘配二妙散组(SB),每组10只.正常组基础饲料喂养,其余各组高脂饲料喂养8wk后行药物干预,并继续高脂每日加250mL/L乙醇12mL/kg,ig,1mo后观察进食量、体质量、肝脾指数、用药前后血清总胆固醇(CHO,mmol/L)、三酰甘油(TG,mmol/L)、低密度脂蛋白(LDL, mmol/L)、极低密度脂蛋白(VLDL,mmol/L),高密度脂蛋白(HDL,mmol/L)及肝脏病理改变.结果:高脂喂养2mo和药物干预后.与N组相比,M组大鼠体质量增长加快,CHO,TG,LDL和VLD明显升高,HDL明显下降;与M组相比,SA和SB组大鼠进食量减少、TG和VLDL下降(TG:3.9±0.2,4.0±O.1vs5.4±0.3;VLDL:2.4±0.1,2.7±0.1vs 3.1±0.2,P＜0.05),D组TG下降(3.3±0.5vs5.4±0.3,P＜0.05).肝脏病理方面,M细肝细胞呈广泛的气球样变,SA和SB组均能明显减少病变的肝细胞数和减轻病变程度.结论:沙棘与逍遥散及二妙散配伍对肝脏损伤有保护作用,以沙棘与逍遥散配伍防治作用更好.