腹腔镜下输尿管膀胱再植术动物模型的建立方法

目的 建立训练腹腔镜下输尿管膀胱再植术的动物模型. 方法 10只体质量30kg左右小型雌性猪作为实验动物,氯氨酮(10 mg/kg)诱导麻醉,3.5%戊巴比妥钠(0.25 g/kg)术中维持.取仰卧位经脐点穿刺导人CO2制备气腹,放置3个工作套管.游离子宫角以替代扩张的输尿管.按膀胱外黏膜下隧道法(Lich-Gregoir)标准步骤进行手术.4名具有腹腔镜体外模拟训练经验的学员参加培训,根据手术时间评估学员的学习曲线. 结果 能够在该动物模型上成功完成腹腔镜下输尿管膀胱再植术的各项操作技术,每侧可进行2次手术.学员接受10次输尿管再植术训练后,平均手术时间从最初的(170±10)min降至(90±4)min(P<0.01),学员均能熟练完成腹腔镜下输尿管膀胱再植术. 结论 该模型利用子宫角替代扩张输尿管提供多次训练机会,能使学员掌握膀胱外黏膜下输尿管膀胱再植术的腔内操作技巧和手术方法.     

膀胱移行细胞癌中PTEN基因启动子甲基化及其表达的研究

目的 检测膀胱移行细胞癌中PTEN基因启动子甲基化状态及其蛋白表达水平,并探讨它们与该肿瘤临床及病理特征的关系.方法 应用免疫组织化学(S-P)法检测PTEN蛋白的表达,甲基化特异性PCK(MSP)法检测PTEN基因启动子的甲基化状态.结果 PTEN蛋白在膀胱癌组织和正常膀胱组织中的阳性表达率分别是54.0%(27/50)和100.0%(10/10),两组间差异有显著性(P＜0.01),且其表达水平在不同病理分级、临床分期间差异也存在显著性(P＜0.01);在膀胱癌组织中PTEN基因启动子甲基化率为14.0%(7/50),而在正常膀胱组织中未检测到其启动子的甲基化(0/10),两组间差异有显著性(P＜0.05),且PTEN基因启动子甲基化与其蛋白表达水平呈负相关(P＜0.05).结论 PTEN基因启动子的甲基化可导致基因的沉默,是PTEN蛋白表达缺失的重要原因.PTEN基因启动子甲基化及其蛋白的表达缺失可能在膀胱移行细胞癌的发生及进展过程中起着重要作用,并对该肿瘤的生物学行为产生较大影响.     

靶向沉默Notch1基因对膀胱癌细胞系T24增殖的影响

目的探讨Notch1基因沉默对人膀胱癌细胞增殖的影响。方法用pGenesil质粒构建靶向Notch1的siRNA真核表达载体psiRNA1,并将其转染到膀胱癌细胞系T24中,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)、流式细胞术(FCM)检测Notch1沉默后膀胱癌细胞生长变化、细胞周期和凋亡情况。逆转录聚合酶链反应（RT PCR）和蛋白印记法（Western Blot）检测Notch1基因的mRNA和蛋白在转染前后表达变化。结果转染psiRNA1质粒后T24细胞的生长受到显著抑制,呈一定的时间依赖性（60?h内）,凋亡率增加,G0/G1期细胞明显增多（未转染组、空载体组、阴性对照组）,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）,且Notch1基因在mRNA和蛋白水平表达相对于对照组明显下调（P＜0.05）。结论沉默Notch1基因能够抑制膀胱癌细胞的增殖,Notch1在膀胱癌中可能具有癌基因的作用。     

Expression of KAI1/CD82 and MRP-1/CD9 in Transitional Cell Carcinoma of Bladder

The expression of KAI1/CD82 and MRP-1/CD9 in transitional cell carcinoma of bladder (TCCB) and its clinical significance were investigated. Immunohistochemistry was used to detect KAI1/CD82 and MRP-1/CD9 protein expression in 52 TCCB specimens. Correlation between the expression of KAI1/CD82 and MRP-1/CD9 to clinicopathologic factors was statistically analyzed. The results showed that the positive rate of KAI1/CD82 and MRP-1/CD9 in TCCB was 50% and 61.5%, respectively. The MRP-1/CD9 and KAI1/CD82 expression was significantly associated with grade of TCCB (P<0.05), but no correlation was found between MRP-1/CD9 or KAI1/CD82 expres-sion and clinical stage of TCCB (P>0.05). The expression level of MRP-1/CD9 and KAI1/CD82 in recurrent TCCB samples was lower than that in non-recurrent samples (P<0.05). Meanwhile, the correlation between the KAI1/CD82 expression and MRP-1/CD9 expression was statistically signifi-cant (r=0.316, P<0.05). It was concluded that KAI1/CD82 and MRP-1/CD9 expression may be im-portant prognostic indicators and potentially useful for assessing the biological behavior of TCCB.     

MGMT基因启动子甲基化与膀胱尿路上皮癌生物学行为关系的研究

目的 检测膀胱尿路上皮癌组织中O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子甲基化状态,探讨MGMT甲基化与其蛋白表达水平以及肿瘤生物学行为之间的关系.方法 应用免疫组织化学SP法和甲基化特异性PCR(MSP)分别检测60例膀胱尿路上皮癌及15例正常膀胱黏膜组织中MGMT蛋白表达情况和MGMT基因启动子甲基化状态.结果 膀胱癌组织中MGMT蛋白阳性表达率为35.0 %(21/60),低于正常膀胱组织(86.7 %,13/15,P<0.01).膀胱癌组织中MGMT甲基化阳性率为45.0 %(27/60),明显高于正常膀胱组织(0.0 %,0/15,P<0.01);MGMT启动子甲基化与其蛋白表达呈负相关(r = -0.453,P<0.01);并且高级别膀胱癌中MGMT甲基化阳性率(70.6 %,12/17)要比低级别膀胱癌高(34.9 %,15/43),(P<0.05),而MGMT甲基化与膀胱癌临床分期无明显关系.结论 MGMT启动子甲基化可能参与了膀胱尿路上皮癌的发生和肿瘤分化,MGMT启动子甲基化有望成为预判膀胱癌预后的重要标记.     

原发性醛固酮增多症手术患者预后影响因素分析

目的分析原发性醛固酮增多症（pfimary aldosteronism,PA）患者术后血压恢复的影响因素。方法对2009年1月至2012年3月厦门大学附属第一医院泌尿中心收治的PA手术治疗患者进行回顾性研究及临床随访6个月～3年,将可能影响预后的因素进行单因素方差分析,初步筛选其中有统计学意义的指标,进一步采用logistic回归分析影响血压恢复的独立因素。结果93例PA术后患者中,根据影像及病理结果示：醛固酮腺瘤59例（63．44％）,单侧肾上腺增生27例（29．03％）,特发性醛固酮增多症7例（7．52％）;术后血压恢复正常43例（46．24％）,血压部分缓解47例（50．54％）,血压无缓解3例（3．22％）;采用logistic回归分析得出3个显著影响因素：高血压病史、术前降压药物控制血压情况、术前血浆醛固酮／肾素活性比值（aldosterone-to-renin ratio,ARR）。结论对于需手术的PA患者可根据其高血压病史、药物疗效及血浆ARR预判术后血压恢复情况,并加强术后随访及生活干预,提高综合治疗。     

Aortic Cell Apoptosis in Rat Primary Aldosteronism Model

This study aimed to determine whether aldosterone could induce vascular cell apoptosis in vivo.Thirty-two male rats were randomly divided into 4 groups:vehicle(control),aldosterone,aldosterone plus eplerenone or hydralazine.They were then implanted with an osmotic mini-pump that infused either aldosterone or the vehicle.Systolic blood pressure(SBP) was measured weekly by the tail-cuff method.After 8 weeks,plasma aldosterone concentration(PAC) and renin activity(PRA) were determined by radioimmunoassay.Aorti...