线粒体基因ND3、ND4L核苷酸变异与弱精子症相关分析

目的： 对弱精子症(AST) 精子线粒体DNA ND3、ND4L基因突变检测和分析,探索弱精子症致病的分子机制。方法: 收集弱精子症患者50例,年龄匹配的对照42例,用密度梯度离心将弱精子症患者和对照组的不同活力精子进行分离,扩增线粒体ND3、ND4L基因,测序和比对,比较弱精子症组和对照组线粒体ND3、ND4L基因核苷酸变异和单体型差异。结果: 在弱精子症组和对照组中共检测出22个变异位点,其中A10157G和A10313C未见报道,G10320A、A10398G、T10609C为错义突变。A10398G和C10400T核苷酸变异率在弱精子症组显著低于对照组(P<0.05),G10310A核苷酸变异率在弱精子症组显著高于对照组(P<0.05);单体型分析可见弱精子症组单体型N百分率(33/50)显著高于对照组(14/42)(P<0.05),单体型R9在弱精子症组(15/50)的比例显著高于对照组(4/42)(P<0.05);单体型F1、F2和R9的前向运动精子百分率显著低于单体型M和M rest(P<0.05)。对弱精子症同一病例不同活力精子进行检测,有2例不同活力的精子的线粒体单体型存在差异,活力好的精子为单体型M,而活力差的精子为单体型N;在50例弱精子症中有2例活力中等和活力差的精子标本中检测出G10310A异质性突变,而在活力好的精子标本中无G10310A突变。结论: 线粒体单体型与精子活力可能存在一定的相关性;线粒体DNA 10398G-10400T多态性可能是精子活力的有益因素,线粒体DNA G10310A突变可能是精子活力的有害因素。     

应用多重连接依赖式探针扩增技术快速高通量诊断胎儿染色体非整倍体异常

Objective To assess the diagnostic value of multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) for detection of common chromosome aneuploidy in amniotic fluid (AF) cells in order to obtain an accurate, rapid, cost-effective and high-throughput method in routine prenatal clinical practice.Methods The MLPA test was performed on 500 AF samples by using kit P095 and the results were obtained by using analysis software RH-MLPA-v511. The results were compared with that from fluorescence in situ hybridization (FISH) and traditional karyotyping (TK). The technical critical issues were analyzed in routine diagnostic application. Results The absolute specificity and sensitivity of the MLPA test to detect the aneuploidy were 100%. For the 500 AF samples, the success rate of the MLPA tests was 97%. Among them 92% were finished within three working days and 5% required more days for repeating. The test failure rate was 3%. The results confirmed that for the 38 detectable aneuploid samples,the probe reliability weighted mean ratio values were more than 4SD compared to normal diploids and the 2 suspected trisomy samples were more than 2SD. In this study, authors analyzed hybridization efficiencies of 8 probes for chromosome 21, and the presence of a trisomy was considered if at least 4 of the 8 probes gave probe ratio of ＞1.3. Conclusion The data suggested that MLPA is a rapid, simple and reliable method for large scale testing for aneuploidy of chromosomes 13, 18, 21, X, or Y in AF. The MLPA technology is complementary to AF culture and valuable for prenatal diagnosis.     

自制冻疮酊治疗冻疮76例

<正>笔者于2001年～2008年间,采用自拟冻疮酊治疗冻疮26例,疗效满意,现报道如下。1临床资料本组76例患者,其中男26例,女50例,年龄3岁～46岁,平均16.53岁,3岁～12岁13例(农村9例),13岁～23岁53例(农村38例),24岁～46岁10例(室外作业或者常与铁器接触者)。发病部位:耳廓28例,其中耳轮后背侧13例,耳垂15例,手背22例,面部(颧部)13例,足部13例,其中小趾外背侧7例,足跟后外侧6例。I度冻伤33例,Ⅱ度冻伤37例,Ⅲ度冻     

商品光山药的一种加工方法

商品光山药的一种加工方法吕建新(广西陆川县人民医院陆川537700)商品山药分毛山药和光山药两种,习称毛山、光山。毛山加工较简单粗放,其饮片煎汤时易烂甚至粘锅,汤较浊。而质量上乘的光山,在加工时每一步都十分讲究。下面介绍一种光山的加工方法。1刮表皮选好长得大小均匀、圆直、表皮薄的生山药,用水洗净,晾去水滴,切去较细的头部,即可刮皮。刮皮时用小刀将山药从头到尾一刮而过,免得留下刀痕。2熏磺将刮净表皮的生山药用清水....     

2型糖尿病患者mtDNA变异筛查研究

目的探讨线粒体基因突变与2型糖尿病的关系。方法随机筛查222例散发2型糖尿病患者和191名正常对照，以聚合酶链反应、限制性内切酶片段长度多态性及T-A克隆测序和变性高效液相色谱分析技术验证等方法检测线粒体基因突变。结果糖尿病组线粒体基因（3153—3551nt）突变总的发生率（24．32％）明显高于正常组（7．33％）（P〈0．05）；发现3个尚未见报道的新突变位点：A3209T、T3253G和A3467C，而C3497T则在糖尿病中是首次报道；起病年龄、体重指数、空腹血糖、糖化血红蛋白、高密度脂蛋白和糖尿病肾病等指标是线粒体基因突变的相关因素（P〈0．05）。结论温州地区糖尿病患者存在多种线粒体基因点突变，其在糖尿病的发生发展中起重要作用。     

牛膝多糖对老龄大鼠非特异性免疫功能的影响

目的: 探讨牛膝多糖(ABPS)对老龄大鼠非特异性免疫功能的影响。 方法: 牛膝多糖(ABPS) 在老龄大鼠背部皮下注射21 d，镜检计外周血白细胞数（WBC），HiCN法测定血红蛋白（Hb）含量，用全自动生化分析仪测定主要生化指标，用含10 ％小牛血清的RPMI-1640细胞培养液贴壁培养肺泡巨噬细胞（AMΦ）和腹腔巨噬细胞（PMΦ）2 h，并用全自动生化分析仪测定其乳酸脱氢酶（LDH）和酸性磷酸酶(ACP)活性，摄取中性红试验检测巨噬细胞(MΦ)的吞噬功能，比色法检测脾脏、肝脏、大脑、肾脏和血清中的脂质过氧化物(LPO)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量。结果: 牛膝多糖(ABPS)试验组老龄大鼠AMΦ和PMΦ内ACP、LDH的活性均高于对照组 （均P＜0.01），AMΦ和PMΦ摄取中性红的能力也高于对照组（均P＜0.01）； 且大脑、肝脏、脾脏中的LPO含量低于对照组（P＜0.05,P＜0.01），GSH含量高于对照组（P＜0.05）。 结论: 牛膝多糖(ABPS)具有激活老龄大鼠AMΦ和PMΦ作用，能增强机体非特异性免疫功能。     

蝉拟青霉多糖免疫调节和抗肿瘤活性的实验研究

目的：研究蝉拟青霉总多糖(PcPSt)及其组分PcPSAc的免疫调节和抗肿瘤活性。方法：将实验动物分为5组：正常对照组、肿瘤对照组、PcPSt组、环磷酰胺（Cy）组和PcPSt + Cy组，除正常对照组外其余各组均复制荷瘤小鼠模型，每日分别向5组小鼠腹腔注射生理盐水（NS）、NS、PcPSt、Cy和PcPSt+Cy，10 d后，观察各组白细胞、脾指数、瘤重和抑瘤率等指标的变化。以cell counting kit 8（CCK-8）为指标，以脂多糖（LPS）为阳性对照，观察PcPSAc对体外培养的小鼠脾细胞增殖活性影响。以LPS为阳性对照，观察不同浓度PcPSAc刺激体外培养小鼠腹腔巨噬细胞（PMΦ）产生一氧化氮（NO）的作用。结果： PcPSt能增加荷瘤小鼠白细胞数量，缓解Cy所致荷瘤小鼠白细胞数的降低，提高荷瘤小鼠的脾指数，联用小剂量Cy时明显增强其抑制肿瘤作用。PcPSAc在600 mg/L和300 mg/L浓度时能提高体外培养小鼠脾细胞的增殖活性。PcPSAc在15-300 mg/L浓度范围内均能刺激体外培养小鼠PMΦ产生NO，其中以300 mg/L PcPSAc作用最强。结论：体内试验和体外试验表明蝉拟青霉多糖具有促进免疫功能和抗肿瘤的作用。     

细脚拟青霉减轻环磷酰胺所致免疫抑制效应的实验研究

目的探讨细脚拟青霉对机体的免疫调节作用.方法用环磷酰胺复制大、小鼠免疫抑制模型,细脚拟青霉灌胃处理正常及免疫抑制大、小鼠21d后处死,并测定其胸腺和脾脏的重量以及外周血白细胞数.结果正常对照组大、小鼠白细胞数分别为(11600±3600)、(4700±1100)×106/L;细脚拟青霉组大鼠白细胞数升高,为(16500±3800)×106/L;环磷酰胺组大、小鼠白细胞数均降低,分别为(5300±1300)、(3000±1500)×106/L;细脚拟青霉加环磷酰胺组大、小鼠白细胞数又回升,分别为(12000±6900)、(4400±1200)×106/L.环磷酰胺组大、小鼠脾脏、胸腺湿重下降,分别为0.86±0.16、0.12±0.06、0.080±0.028、0.010±0.003g;细脚拟青霉加环磷酰胺组大、小鼠脾脏、胸腺湿重又回升,分别为0.99+0.13、0.19±0.05、0.126±0.085、0.015±0.006g.结论细脚拟青霉对正常大鼠有提升白细胞数作用,并能阻止环磷酰胺所致的降低白细胞数作用;对环磷酰胺所致免疫抑制大、小鼠的脾脏、胸腺等免疫器官萎缩有阻遏作用;故细脚拟青霉对机体具有免疫调节活性.     

细脚拟青霉对大鼠肺泡巨噬细胞的激活作用

用细脚拟青霉水提取物给正常及环磷酰胺所致免疫抑制大鼠灌胃２１ｄ，灌洗并培养肺泡巨噬细胞，用生化方法测定巨噬细胞内乳酸脱氢酶和精氨酸酶的活性，并进一步观察巨噬细胞摄取中性红的能力。结果表明：细脚拟青霉水提取物可显著提高正常及环磷酰胺所致免疫抑制大鼠肺泡巨噬细胞内乳酸脱氢酶和精氨酸酶的活性。并增强肺泡巨噬细胞摄取中性红的能力。提示：细脚拟青霉对肺泡巨噬细胞具有激活作用。     

消化性溃疡患者幽门螺杆菌感染与胆汁返流的关系

目的 探讨消化性溃疡(Peptic ulcer，Pu)患者幽门螺杆菌(helicobacter pylori，Hp)感染与胆汁返流的关系。方法 伴有胆汁返流PU患者25例和不伴有胆汁返流PU患者80例分别采用C-尿素呼气试验进行Hp检测。结果 伴有胆汁返流PU患者25例，Hp阳性12例，阴性13例，Hp感染率48％：不伴有胆汁返流PU患者80例，Hp阳性59例，阴性21例，Hp感染率73．7％。结论 消化性溃疡患者Hp感染与胆汁返流成负相关。