组学时代医学检验专业教学的探索与实践

人类基因组计划完成后,生命科学研究进入到＂组学＂的研究时代,这给临床医学的发展带来了无限的希望,这些新技术、新理念、新思维被引入医学检验领域,为其提供了广大的发展空间,在此契机下,我们医学检验教育也围绕组学教育方向从办学模式、课程和实验教学体系改革、师资队伍建设和搭建产学研平台等方面进行了探索与实践。     

利用正交试验优化蝉拟青霉多糖的提取工艺

目的:优化蝉拟青霉多糖的提取条件.方法:以蝉拟青霉多糖含量为指标,采用正交试验进行研究.结果:经正交试验优化后的提取工艺:向蝉拟青霉的水浸出液中加入1%木瓜蛋白酶,于50℃、pH=7条件下提取2.5 h.结论:经正交试验优化后的提取工艺可缩短提取时间,提高多糖得率.     

逆转录-聚合酶链反应-酶联夹心杂交法检测呼吸道合胞病毒及其亚型感染

目的:建立一种呼吸道合胞病毒(RSV)及其亚型核酸检测方法并初步应用于临床,检测浙南地区RSV及其亚型的流行情况.方法:根据RSV G蛋白基因核苷酸序列设计引物和探针,通过逆转录-聚合酶链反应-酶联夹心杂交法(RT-PCR-ELSH)随机检测了浙南地区连续两年冬春季期间202例急性下呼吸道感染的婴幼儿鼻咽部分泌物中RSV及其亚型的病毒核酸;与病毒分离培养、直接免疫荧光法(DFA)、OligoDetect试剂盒比较探讨其临床实用性.结果:202例标本中RSV阳性123例,阳性检出率为60.9%,2002～2003年和2003～2004年冬春季分别为68.2%和52.6%;两个冬春季都以RSV A亚型为主,占78.9%,2002～2003年冬春季A亚型占RSV阳性标本中的76.7%,2003～2004年A亚型占82.0%;RT-PCR-ELSH阳性检出率与其他三种方法的阳性检出率差异无显著性(P＞0.05).结论:RT-PCR-ELSH法用于检测RSV及其亚型,是一种灵敏度高、特异性强,方便、快速的方法,非常适用于临床标本的大批量检测和流行病学调查;RSV是引起浙南地区冬春季婴幼儿急性下呼吸道感染的最主要的病原体,并以A亚型为主.     

蝉拟青霉对大鼠营养状况的影响

目的:观察蝉拟青霉菌丝体水提取物对正常及环磷酰胺所致免疫抑制大鼠血液蛋白质、白细胞水平及肝细胞形态结构的影响,探讨其对机体营养状况的影响.方法:用HiCN法、双缩脲法、溴甲酚绿法分别测定血红蛋白、血清总蛋白、白蛋白含量;测定外周血白细胞数;并在电子显微镜下观察肝细胞的形态结构.结果:蝉拟青霉使正常大鼠血清总蛋白、球蛋白含量显著增加(P＜0.01),并能拮抗由于使用环磷酰胺所造成的血红蛋白、血清总蛋白、球蛋白含量的降低(P＜0.05);使正常大鼠血白细胞数明显升高(P＜0.05),并能阻遏由于使用环磷酰胺所致的白细胞降低(P＜0.05);使正常大鼠肝细胞粗面内质网、线粒体增多.结论:蝉拟青霉对机体的营养状况有改善作用.     

660例急性阑尾炎患者住院费用及影响因素分析

目的 通过对急性阑尾炎住院费用的分析，进一步了解影响医疗费用的因素，为合理控制医疗费用的过快增长提供参考。方法 采用多元逐步回归法对2003-2005年660例急性阑尾炎病例的有关信息对住院费用高低的影响进行了分析。结果 住院天数、手术与否、有无其他诊断、年龄等情况对住院费用的影响有统计学意义（P=0．000）。其中，住院天数是影响住院费用的主要因素。结论 影响住院费用的最主要因素是患者的住院天数，缩短病人的住院天数已成为有效地控制医疗费用增长的一个重要手段。     

头发肌酐测定在鉴别急性和慢性肾功能衰竭的临床价值

临床上鉴别病人是急性肾功能衰竭（ＡＲＦ）还是慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ），常常遇到困难。有人曾报道指甲中肌酐含量可反映指甲形成时的血清肌酐（Ｓｃｒ）水平［１３］。我们测定了头发肌酐（Ｈｃｒ）的含量及鉴别急、慢性肾功能衰竭的临床价值。一、资料和方法１对...     

逆转录—聚合酶链反应—酶联夹心杂交法定量检测IL—6mRNA

目的：建立一支高灵敏度、高特异性、精确、简便的逆转录－聚合酶链反应－微孔板酶联夹心杂交技术定量检测人IL－6mRNA的方法。方法：从人外周静脉血单个核细胞提取总RNA，进行RT－PCR扩增，PCR产物经热变性后与检测探针一起加入已包被捕获探针的微孔板内进行夹心杂交，用链亲和素－辣根过氧化物酶（SAV－HRP）及底物系统检测杂交信号。结果：该方法检测IL－6mRNA的灵敏度明显高于逆转录－聚合酶链反应－琼脂糖凝胶电泳；特异性高，RT－PCR和酶联夹心杂交均无非特异性阳性信号出现；重复性良好。结论：本方法操作简单、灵敏度高、特异性强、结果数据化，适合于细胞因子mRNA的定量检测。     

树突状细胞来源的趋化因子的免疫调节作用研究进展

树突状细胞是一类重要的免疫调控细胞，它所产生的趋化因子有重要的免疫调节作用；趋化吸引免疫细胞参与Th1或Th2类免疫反应，促进免疫细胞的成熟；介导其他细胞与树突状细胞的交互反应以及优化炎症反应，使其向有利于机体的方向发展等。树突状细胞可能还有更多的免疫学作用由趋化因子实现，有待进行深入的研究。     

EGF-IL-18在毕赤酵母中的表达

目的：在甲醇营养型毕赤酵母表达系统中分泌表达人表皮生长因子受体干扰基序和白细胞介素-18（EGF-IL-18）融合蛋白。方法：PCR扩增EGF-IL-18基因,克隆到表达载体pPIC9K,重组质粒经线性化后用电转化导入毕赤酵母GS115,筛选重组子,经摇瓶培养,用甲醇诱导表达EGF-IL-18融合蛋白。结果：序列分析表明,克隆到pPIC9K载体中的EGF-IL-18基因与设计相符,SDS-PAGE电泳分析显示表达产物EGF-IL-18以可溶性分子存在于酵母培养基中,Western印记表明表达产物EGF-IL-18具有良好的抗原性。结论：重组蛋白EGF-IL-18在毕赤酵母GS115中成功分泌表达。     

腰椎旁阻滞联合医用三氧注射治疗急性期腰椎间盘突出症

目的比较腰椎旁阻滞联合医用三氧注射与单纯腰椎旁注射治疗急性腰椎间盘突出症的效果。方法急性期腰椎间盘突出症患者50例,随机分为治疗组和对照组,各组25例。治疗组为椎旁阻滞联合三氧注射,对照组为单纯椎旁阻滞。观察比较治疗后两组VAS评分、VAS评分缓解率及不良反应。结果治疗后两组患者的VAS评分较治疗前均显著降低（P〈0．05）,两组间差异亦有统计学意义。对照组优良率低于治疗组（P〈0．05）。两组均未见严重不良反应。结论椎旁阻滞联合三氧注射较单纯椎旁阻滞对治疗急性腰椎间盘突出症效果更为显著。