光固化复合树脂修复楔状缺损的疗效观察

我科采用光固化复合树脂修复350颗牙楔状缺损，观察4—5年获得了满意效果，报告如下：     

兔前眼部碱烧伤机理的实验研究

兔前眼部碱烧伤后４小时、２４小时和７２小时，房水中丙二醛含量与正常相比明显升高（４小时Ｐ＜０．００１，２４小时和７２小时Ｐ＜０．０５）；ＳＯＤ活力与正常相比明显下降（各时间组Ｐ均＜０．０１）。提示超氧自由基及其代谢产物是导致碱烽伤后组织病理损伤的关键因素。这一次发现有助于指导碱烧伤的治疗。     

一个CRYAA基因突变先天性白内障家系

目的研究一个四代常染色体隐性遗传性先天性白内障家系的致病基因。方法调查研究。采集一个先天性白内障家系中3例患者和1例表型正常者的外周静脉血各5 ml,收集100例正常人外周静脉血各5 ml作为对照,提取所有参与者基因组DNA。选择与先天性白内障发生相关的八个致病基因（CRYAA、CRYAB、CRYBA1、CRYGC、CRYGD、CRYGS、GJA3、GJA8）作为候选基因,进行聚合酶链反应扩增候选基因的外显子及毗邻内含子。扩增产物进行直接测序,测序结果与GeneBank中序列进行BLAST比对分析,寻找突变位点。结果该家系中先证者及患者均在CRYAA基因第1外显子发生c.160 C>T杂合突变,导致其编码的晶状体蛋白第54位精氨酸变为半胱氨酸（p.R54C）。该家系中参与研究的1名表型正常者和100名正常对照者无此基因突变。结论CRYAA基因 c.160 C>T（p.R54C）突变是导致该先天性白内障家系致病的主要原因。     

原发性闭角型青光眼合并葡萄膜渗漏的研究进展

原发性闭角型青光眼小梁切除术后葡萄膜渗漏是临床常见并发症,对患者的预后产生一定影响,然而,闭角型青光眼在小梁切除术前也可以合并葡萄膜渗漏,其发生机制尚存在争议,目前依靠超声检查方法可以明确诊断。葡萄膜渗漏是否增加手术风险？怎样避免葡萄膜渗漏的发生？以及如何进行治疗？本文将围绕原发性闭角型青光眼合并葡萄膜渗漏的发生机制、诊断、治疗及预后进行一一阐述,为临床研究提供思路。     

OPTN基因与POAG的分子生物学研究进展

原发性开角型青光眼（POAG）是以视野渐进性缺损为特点的遗传异质性的综合性神经退行性疾病。OPTN基因是近年来已被确认的POAG的致病基因,该基因的突变可导致其所表达蛋白Optineurin结构及功能的异常。Optineurin与一些特定蛋白配体偶联后发挥相应的分子生物学功能,当其结构异常时,将导致Optineurin不能与其配体偶联或者偶联后功能异常。本综述主要介绍OPTN基因的结构、定位,其表达蛋白Optineurin的结构,Optineurin与配体偶联后的分子生物学功能,以及OPTN基因突变后与POAG发病的关系等方面的研究进展。     

免疫磁珠法分离纯化SD大鼠神经干细胞

目的应用微小免疫磁珠分离提纯SD胎鼠大脑皮层组织中的神经干细胞并进行培养,为研究神经干细胞的特性与神经干细胞的培养和移植研究创造有利条件。方法取SD胎鼠的大脑皮层组织制成单细胞悬液,用微小磁珠（平均直径≤50nm）分选出神经巢蛋白（nestin）阳性的细胞群,以流式细胞术检测阳性细胞纯度,以台盼蓝染色法检测细胞活性。结果分离的神经干细胞流式细胞仪检测细胞nestin阳性表达率为（88．5±3．6）％,细胞存活率为（96．3±1．8）％。结论微小免疫磁珠法分离胎鼠脑神经干细胞群落简便、有效,可以为神经干细胞的细胞培养和移槽提供细胞来源。     

两种方法建立大鼠慢性青光眼模型的对比研究

目的评价2种大鼠慢性青光眼模型的效果。方法通过单纯烙闭3条大鼠巩膜上静脉（单纯手术组,n=19）和烙闭巩膜上静脉同时给予5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-Fu）（手术给药组,n=23）2种方法制作大鼠慢性高眼压模型,观察术前和术后1d、3d、5d、1周、2周、1个月和2个月早晚眼压变化,并于术后1周、2周、1个月和2个月摘除眼球,光镜观察大鼠视网膜各层组织厚度变化,荧光金逆行标记视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGCs）并计数,TUNEL染色,比较2组模型检测指标。结果2组模型大鼠术后眼压均明显升高,随着高眼压时间持续延长,RGCs逐渐减少及视网膜神经纤维层逐渐变薄,剩余RGCs数量逐渐减少,但2组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论持续高眼压导致大鼠RGCs的病理改变过程及其结果符合青光眼视神经损伤的病理特点。单纯烙闭大鼠巩膜上静脉即可获得稳定有效的慢性青光眼模型。     

重组逆转录病毒脑源性神经营养因子在小鼠胚胎细胞中的表达

神经干细胞移植是近年来治疗视神经损伤疾病新的研究方向之一，然而如何能够让干细胞在眼内移植后定向分化为视网膜神经节细胞，一直是个难题。脑源性神经营养因子（BDNF）作为神经营养因子家族的重要成员之一，因其能够促进神经细胞生长分化、维持神经细胞正常功能、减缓神经元的损伤、并能够防止损伤后的细胞凋亡而日益受到重视。我们将重组的真核表达载体pLXSN—BDNF进行体外包装并检测了BDNF基因在细胞中的表达，对BDNF基因转染的神经干细胞眼内移植，探讨该基因在视神经保护中的作用奠定了基础。     

大鼠BDNF基因克隆和重组逆转录病毒pLXSN-BDNF的构建

目的克隆大鼠脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factors,BDNF)基因并构建含BDNF基因片段的真核表达载体pLXSN-BDNF,用于视神经损伤修复的基因治疗。方法利用RT-PCR的方法从大鼠海马组织的总RNA中扩增BDNF基因片段,序列两端分别引入限制性内切酶识别位点EcoR I和Xho I,并将其定向克隆入pMD18-T Si mple载体,测序正确后亚克隆入逆转录病毒载体pLXSN。结果经过PCR、酶切和测序鉴定,所克隆的BDNF基因序列正确,克隆的BDNF基因已经正确插入到逆转录病毒载体pLXSN中。结论成功克隆了BDNF基因并且构建了真核表达载体pLXSN-BDNF,为进一步研究基因治疗视神经损伤疾病奠定基础。     

角膜波前像差引导的个性化LASIK和常规LASIK治疗近视的临床研究

目的比较常规准分子激光原位角膜磨镶术（Laser in situ Keratomileusis，LASIK）和角膜波前像差引导的个性化准分子激光原位角膜磨镶术（corneal wavefront aberrations guidedL ASIK，CW-GLASIK）治疗近视眼术后患者视觉质量的变化，探讨角膜波前像差引导的个性化准分子激光原位角膜磨镶术对对比敏感度和眩光以及角膜波前像差的影响，评价其手术的有效性。方法选取拟做LASIK手术的近视眼患者（近视球镜≤-10．00D，散光≤-2．5D）随机分成两组，一组行常规LASIK手术，另一组行角膜波前像差引导的个性化LASIK手术，手术均采用德国Schwind公司Esiris’准分子激光治疗系统，微角膜刀采用Moria LSK-ONE气动平推刀，对比敏感度检查采用Vector Vision CSV-1000HGT，角膜波前像差分析采用德国OPTIKON 2000 Keratron Scout分析仪。手术光学区直径为（6．0-7．0）mm，波前像差分析为6mm瞳孔直径。术前、术后检查裸眼视力、屈光度、对比敏感度及角膜地形图并进行波前像差分析。结果术后两组的裸眼视力均达到术前矫正视力，无显著性差异（P〉0．05）。两组术后1m时对比敏感度及眩光和术前比较均明显下降，差异有显著性（P〈0．05），术后3m时各空间频率对比敏感度和眩光均有所恢复，但均未达到术前水平，角膜波前像差引导的个性化LASIK组在各空间频率的对比敏感度和眩光同术前比较，无显著性差异，LASIK组在各空间频率的对比敏感度和眩光和术前比较差异有显著性（P〈0．05），角膜波前像差引导的个性化LASIK组在中（6c／d）、高（12c／d、18c／d）空间频率的对比敏感度和眩光明显好于常规LASIK组，有显著性差异（p〈0．05）。两组术后1m、3m角膜彗差、球差均比术前增大，但角膜波前像差引导的个性化LASIK组较常规LASIK组增大幅度小，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论角膜波前像差引导的LASIK手术能有效地矫正近视，改善近视眼患者术后对比敏感度，降低术后彗差和球差，手术效果稳定、安全。