两种方法纯化胎鼠脑室管膜下区神经干细胞的结果比较

目的 利用有限稀释法和连续传代法纯化体外培养的神经干细胞(neural stemcells,NSCs),并对2种方法纯化后的细胞纯度及增生能力进行比较.方法 机械分离孕龄14.5 d的胎鼠脑室管膜下区细胞,利用有限稀释法和连续传代法纯化NSCs,通过免疫细胞化学法鉴定纯度(Nestin阳性卒)及分化细胞的类型.将2种方法纯化后的第3代NSCs以相同的密度接种后连续培养6周,每周进行细胞计数,绘制生长曲线.结果 有限稀释法和连续传代法纯化NSCs的Nestin阳性率均高于原代NSCs(31.00%±0.02%),有限稀释法的Nestin阳性率(91.00%±0.03%)高于连续传代法(58.80%±0.02%,P<0.05).有限稀释法纯化NSCs的生长曲线一直处于增生趋势,而连续传代法的细胞前3周是上升趋势,以后趋于平缓(P<0.05).结论 有限稀释法能有效纯化体外培养的NSCs,并保持细胞良好增生能力及多向分化潜能,为基因治疗视神经损伤疾病提供大量种子细胞.     

老年人跌倒损伤发生现状及危险因素分析

目的 利用我国广西壮族自治区南宁市的跌倒老年人调查数据,描述社区年龄在60岁及以上的老年人跌倒损伤的流行特征,分析社区老年人跌倒损伤的风险因素,为预防老年人跌倒损伤提供理论依据。方法 选取广西南宁市作为调查单位。采用整群抽样的方法,调查对象是在广西南宁的社区中抽取年龄在60岁及以上的老年人,于2014年7月到2015年6月间通过问卷采集调查对象的个人信息、日常生活活动能力、老年人跌倒风险评分。最终得到有完整跌倒损伤信息的样本1188例。通过秩和检验及χ²检验初步分析各因素与跌倒损伤之间的关系,并通过Logistic回归方法进一步分析被调查人群跌倒损伤可能的风险因素。结果 跌倒损伤的发生率为33.9%,发生损伤人群与未发生损伤人群相比,有统计学意义的危险因素包括衰老、文化程度低、长期居住于城市、失能、使用助行器、饮酒、缺乏户外运动、运动持续时间低于1小时、运动频率减少。同时不同跌倒风险评估等级的人群之间跌倒损伤率的差异也具有统计学意义。将上述危险因素进行logistic回归分析,长期居住地为城市(OR=1.399,95%CI 1.127～1.736)、饮酒(OR=1...     

吡格列酮改善胰岛素抵抗状态下氧化应激水平及分子机制探讨

目的：探讨吡格列酮（Pio）对胰岛素抵抗状态下的氧化应激水平的影响,并初步探讨Pio改善胰岛素抵抗作用的分子机制。方法：用TNF-α（4ng／mL）刺激人肝癌细胞HepG2,建立胰岛素抵抗细胞模型。MTT法观察细胞毒性作用;氧化酶法检测细胞培养液中的葡萄糖浓度;用DCFH-DA荧光探针标记,流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）的水平;Western blotting检测氨基末端激酶（JNK）、磷酸化氨基末端激酶（p-JNK）和胰岛素受体底物1（IRS1）的表达。结果：TNF-α刺激HepG2后,导致葡萄糖摄取障碍,细胞培养液上清中葡萄糖浓度显著升高,细胞内ROS的水平显著升高,JNK被激活,IRS1的表达降低。Pio可显著降低ROS的水平,抑制JNK的磷酸化,促进IRS1的表达,改善胰岛素抵抗。结论：Pio通过降低氧化应激水平,抑制JNK信号通路,改善胰岛素抵抗状态。     

泪点栓子对干眼病患者泪膜功能的影响

目的 评价一种新型泪点栓子对干眼病患者泪膜功能的影响.方法 采用美国产新型泪点栓子治疗62例(123只眼)确诊为干眼病的患者,询问治疗前后患者的主观症状、检查治疗前后的泪膜破裂时间、荧光素染色情况和泪液分泌量的变化.结果 泪点栓子治疗后干眼病患者主观症状明显减轻;治疗后泪膜破裂时间延长,与治疗前比较差异具有显著意义;治疗前和治疗后角膜上皮点状荧光素染色差异具有显著意义(P<0.05);泪液分泌量有所增加.结论 该新型泪点栓子用于治疗干眼病能限制泪液流出,重建泪液平衡,改善泪膜的稳定性,是一种有效的、可逆的治疗干眼病的方法.     

内蒙古开鲁县蒙古族原发性青光眼的患病率调查

目的：调查内蒙古东部地区40岁及以上人群蒙古族原发性青光眼的患病率。方法：2009年4~8月,采取随机整群抽样的方法对内蒙古通辽市开鲁县义和塔拉镇40岁及以上人群共5 158人进行青光眼流行病学调查,其中蒙古族579人,所有受检人员均进行标准问卷调查（包括青光眼确诊史、家族史、发作史及手术史等）,现场检查项目包括常规视力、裂隙灯显微镜、周边前房深度、眼压和角膜厚度测量及眼底检查;对可疑青光眼患者进一步详细检查眼压、前房角镜、眼底及视野。结果：本次调查人群中蒙古族原发性青光眼的患病率为3.97%,女性的患病率为5.56%,男性的患病率为2.41%,其中原发性闭角型青光眼的患病率为2.24%,原发性开角型青光眼的患病率为1.73%。结论：内蒙古开鲁县地区蒙古族原发性青光眼的患病率较高,女性患病率明显高于男性,患病率随年龄的增加呈上升趋势。     

原发性开角型青光眼血液流变学指标及脂质过氧化的测定

测定了２１例原发性开角型青光眼患者的血液流变学指标,并选用２１例健康人作为对照。测定结果：青光眼组的血液流变学各项指标均正常对照组有显著性升高;脂质过化、超氧化物歧化酶指标及红细胞膜流动均较正常了青光眼的发病机理,是青光眼发病的潜在性因素。     

白细胞介素-1β参与curdlan诱导的慢性肉芽肿性疾病高炎症反应的初步研究

目的 探讨curdlan诱导慢性肉芽肿性疾病(CGD)高炎症性反应的分子机制,初步探讨NOX2(NADPH oxidase2)缺失与高炎症反应之间的关系及可能机制.方法 β-葡聚糖(β-glucan)是CGD感染并发症的主要刺激物,以NOX2基因缺失的小鼠耳背注射curdlan(1,3-β-glucan,200μg/50 μL)/PBS 50 μL建立CGD高炎症反应动物模型,观察其炎症反应并分析炎症因子的表达变化.在注射后的第2、7天提取鼠耳蛋白检测其中炎症因子白细胞介素(IL)-1β(interleukin-1β)的表达变化.Western blot检测对照组及NOX2缺失组caspase-1的表达情况.体外实验中,用10、50、100、200 μg/mL curdlan处理从上述小鼠中分离培养的巨噬细胞,建立CGD细胞模型.在处理后第1、2天和第5天收取细胞上清用酶联免疫吸附试验(EHSA)检测相关的炎症因子IL-1β表达变化.结果 NOX2缺失的小鼠注射curclan后表现出高炎症性反应,与对照组相比,炎症因子IL-1β显著高表达(第2天:P=0.0189,第7天:P =0.0450);NOX2缺失小鼠caspase-1的活性形式caspase-1p10表达显著增加(第2天:P=0.3980,第7天:P =0.0001).在CGD细胞模型中,我们发现在注射后第5天与正常对照组相比,炎症因子IL-1β水平显著升高(P=0.0011),且局限于NOX2缺失的骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)中,其水平与curdlan浓度呈剂量依赖性.结论 Curdlan通过激活巨噬细胞中的caspase-1导致炎症因子IL-1β显著高表达,炎症因子IL-1β参与了NOX2缺失导致的慢性肉芽肿病高炎症性反应.     

pLXSN-BDNF体外转染神经干细胞及其外源基因的表达

Objective To develop neural stem cells(NSCs) which can stably express exogenous brain-derived neurotrophic factor(BDNF) in vitro. Methods NSCs from the subependymal zone of embry-onic day 14.5(E14.5) rat brain were purified by limiting dilution assay and then infected with supernatant of recombinant retrovirus pLXSN-BDNF and retrovirus pLXSN. The original copy numbers of exogenous gene templates from three groups NSCs(pLXSN-BDNF viral infection group, pLXSN viral infection group, control group) were detected by fluorescent quantitative PCR(FQ-PCR). ELISA assay was used for determining the protein contents of BDNF of supernatant from three groups NSCs for six days continually after seeded in 24-well plates in the same cell density. Results NSCs were purified successfully by limiting dilution assay.The original copy numbers of exogenous BDNF gene templates from pLXSN-BDNF viral infection group by FQ-PCR were (19.57±0.65) × 103 copies/μl, higher than those of another two groups(P < 0.05). The protein contents of BDNF of supernatant from NSCs of pLXSN-BDNF viral infection group was highest among three groups and compared with another two groups had statistical significance (P <0.05) . Conclusion The purified NSCs can be transduced exogenous BDNF successfully with supematant of recombinant retrovir-us pLXSN-BDNF which provide experimental evidences and laying foundations for further research of retinal transplantation and quantization investigation of gene therapy for optic nerve injury.     

CRT在调控Ca2+稳态中的作用及其在心脏发育和病理学中的意义

在心脏中细胞内游离Ca2 是一种关键的第二信使,Ca2 稳态的改变会显著影响许多心脏功能包括收缩、舒张和心脏发育。钙离子在内质网中主要与钙网织蛋白(calreticulin,CRT)结合,钙网织蛋白水平的改变显著影响细胞内Ca2 稳态,其在胚胎发育过程中丰度的变化以及crt基因敲除可损伤心脏发育而导致胚胎死亡揭示了CRT在心脏发育中所起的重要作用。crt缺陷揭示了Ca2 依赖的控制点是心肌纤维形成过程中早期事件的关键。