酶联免疫吸附试验测定血清内源性哇巴因

目的建立血清内源性哇巴因（ＥＯ）浓度测定的酶联免疫吸附试验，促进对这一新的皮质类固醇激素的研究。方法利用外源性哇巴因免疫家兔制备哇巴因抗血清，用棋盘试验确定抗血清的稀释度及包被抗原的浓度；进行灵敏度、精密度、回收率、特异性试验。结果以抗血清稀释度为１：１００００、包被抗原浓度为１μｇ／ｍｌ时标准曲线最理想，灵敏度为０．２３μｇ／Ｌ，血清ＥＯ高（２．４μｇ／Ｌ）、中（１．２μｇ／Ｌ）、低（０．６μｇ／Ｌ）浓度的平均批内变异系数为４．７％，批间变异系数为１２．３％；高、低浓度的回收率分别为９６．３％和９１．４％；与肾上腺素、去甲肾上腺素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、氢化可的松及地塞米松无交叉结合反应，与地高辛存在１．８％的交叉反应。用该法测定正常人（１０例）、孕妇（２３例）及原发性高血压患者（１０例）血清ＥＯ含量分别为０．５１±０．１７、０．８１±０．２６、０．７４±０．２０μｇ／Ｌ。结论该方法具有方便、快速、准确、特异和成本低的优点，可用于对内源性哇巴因的临床与实验研究。     

哇巴因与地高辛对大鼠心肌钠泵α亚单位基因表达影响的研究

目的　对比研究哇巴因与地高辛对大鼠心肌钠泵 (Na K ATP酶 )α亚单位基因表达的影响。方法　长期给予大鼠注射小剂量哇巴因 (2 0 μg·kg-1·d-1)与地高辛 (32 μg·kg-1·d-1) ,分别应用分子生物学RT PCR及免疫组织化学技术分析大鼠心肌钠泵α1、α2及α3亚单位mRNA及蛋白水平基因表达的改变。结果　长期给予大鼠注射小剂量哇巴因可使大鼠血压升高 ,而地高辛对大鼠血压无影响。无论是在mRNA水平还是在蛋白水平 ,哇巴因组大鼠心肌钠泵α1亚单位表达减弱 ,α3亚单位表达增强 ,而α2亚单位表达无改变 ;地高辛组大鼠心肌钠泵α3亚单位表达增强 ,而α1与α2亚单位表达无改变。结论　哇巴因在高血压发病中可能起着重要作用 ;哇巴因与地高辛可导致不同的钠泵基因表达改变     

乙吗噻嗪致无休止的多形性室性心动过速

乙吗噻嗪致无休止的多形性室性心动过速＊西安医科大学研究生原卫清＊王颢＊吕卓人（西安医科大学附属第一医院西安７１００６１）患者，男，５８岁。因持续性心前区疼痛初步诊断为急性心肌梗塞，转入我院。查体：血压１４／１０ｋＰａ（１０５／７５ｍｍＨｇ），心室率７...     

钠泵抑制物噬菌体单链抗体库的构建

目的　应用噬菌体展示技术构建钠泵抑制物单链抗体库 .方法　用 OUA- OVA(ouabain- ovalbumin)免疫小鼠 ,取脾脏 ,分离淋巴细胞 ,提取 m RNA,逆转录成 c DNA第一链 ,用简并引物经 PCR分别扩增轻、重链抗体库 ,经重叠延伸PCR由 L inker将轻、重链拼接成 Sc Fv(单链抗体 ) ,用 RS引物以 Sc Fv为模板进行第 2次 PCR,同时在 5 及 3 端分别加上 Sfi I,N ot I酶切位点 .经 Sfi I,N ot I酶切后 ,在 T4连接酶的作用下将 Sc Fv与 p CANTAB 5 E噬菌粒连接 ,电转化进入TG1大肠杆菌 ,挑取 12个单菌落提取质粒用 Eco R 和 H ind 进行酶切鉴定 ,后经 M13KO7辅助噬菌体拯救 ,离心收集上清即为全套 Sc Fv基因的噬菌体表面展示文库 .结果　以OU A- OVA免疫小鼠 ,检测血清中抗体效价可达 (1∶ 2×10 6 ) ,用通用引物分别扩增出轻、重链片段的大小为 32 5 bp和 34 0 bp,将两者拼接得到约 72 0 bp大小的单链抗体库 ,以8× 10 1 1 的转化效率转染 TG1细胞 ,Eco R 和 H ind 酶切后 ,12个单菌落所提噬菌粒 DNA中有 10个切出了约为 2 .1kb的目的条带 ,所构建的噬菌体抗体库库容量约为 1.2× 10 8.经 M13KO7超感染后 ,测噬斑滴度为 9× 10 1 4 pfu· L- 1 .结论　成功地构建了钠泵抑制物噬菌体单链抗体库 .     

“一肾一夹”高血压鼠血清及组织内哇巴因含量及其与血压相关性的研究

目的:探讨内源性哇巴因(EO)在“一肾一夹(1k1c)”高血压模型血压升高中的作用及其分泌特点。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定“1k1c”高血压大鼠血清及多种组织内EO含量的改变,并对体内EO含量与大鼠血压进行相关性分析。结果:“1k1c”高血压鼠血清及心脏、肾脏、肾上腺、垂体及下丘脑内EO含量均高于正常大鼠;尤以肾上腺及下丘脑内EO含量最高;其中血清、肾脏及下丘脑内EO含量与大鼠血压呈显著正相关。结论:EO含量增加可能在“1k1c”模型高血压的发生机制中发挥着较为重要的作用;肾上腺可能是EO的来源之一。     

哇巴因多克隆抗体对两肾夹肾血管性高血压大鼠血流动 …

为探讨哇巴因多克隆抗体的降压作用及哇巴因与高血压发病的关系，给“两肾一夹＋盐（２ｋ１ｃ＋盐）”、“两肾一夹（２ｋ１ｃ）”肾血管性高血压大鼠随机静注哇巴因多克隆抗体、硝普钠、正常兔免疫球蛋白（ＩｇＧ）及生理盐水，颈动脉插管观察注射后３ｈ内血压动态变化。结果表明：哇巴因多克隆抗体对“两肾一夹＋盐”肾血管型高血压大鼠具有明显的降压作用，而对“两肾一夹”高血压模型降压作用不明显。正常兔免疫球蛋白对高血压模     

哇巴因的升压作用及哇巴因抗体对高血压大鼠血压的影响

目的 :探讨内源性哇巴因在高血压发病中的作用。　　方法 :分别给予正常 SD大鼠每天腹腔注射外源性哇巴因 (2 5μg/kg,哇巴因组 )及等量生理盐水 (对照组 ) ,观察用药10周血压的动态变化 ;“一肾一夹”高血压大鼠分别给予舌下静脉注射哇巴因抗体 (哇巴因抗体组 )、生理盐水 (生理盐水组 )及正常兔免疫球蛋白 G(正常兔 Ig G组 ) ,颈动脉插管监测血压 ,观察用药后 3小时内血压的动态改变。　　结果 :与对照组比较哇巴因组大鼠注射哇巴因后 3周血压即开始升高 [12 0 .5± 15 .4mm Hg比 10 9.4± 11.8mm Hg(1mm Hg=0 .133 k Pa) ,P<0 .0 5 ],第 10周时血压明显高于对照组 (143.6± 17.3 mm Hg比 12 1.3± 15 .3 mm Hg,P<0 .0 1) ;哇巴因抗体对“一肾一夹”高血压大鼠具有明显的降压作用 ,而正常兔 Ig G组与生理盐水组比较降压作用不明显。　　结论 :体内哇巴因含量升高可能是高血压发病因素之一 ,在血压升高中发挥着较为重要的作用。     

老年退行性主动脉瓣狭窄合并急性心内膜下心肌梗死──关于“反复头晕、晕厥2年余,加重伴心前区不适半天”的讨论

1主动脉瓣狭窄的原因1．l风湿性。G脏病单纯主动脉瓣狭窄者极为少见，小于3％。凤湿性心脏病发病年龄轻，病变多从瓣尖开始发展，瓣叶增厚，交界处多融合、粘连，常伴关闭不全和其他瓣膜病变。本例患者年龄较大，查体及心脏超声检查提示单纯主动脉瓣病变，不支持风湿性心脏瓣膜病的诊断。1．2先天性畸形大多为二叶瓣畸形，少数为四叶或单叶主动脉瓣畸形，有时虽为三叶，但三叶之间大小不等，并有一定程度的融合。人群中约1％的人为主动脉瓣二叶畸形，该病发展缓慢，儿童时期主动脉瓣口的狭窄常不严重，但是由于二叶瓣致血流运动性质改变以…