中国蓝氏贾第虫虫株分离培养、基因型及其细胞核(结构功能和进化)研究

蓝氏贾第虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)在医学上是导致腹泻的常见病原体,并可因机会性感染危及艾滋病患者的生命,在生物学方面因其属源真核生物(archezoa),在生物进化上处于特殊地位,是研究细胞核结构、功能和进化的良好模型。 1.本研究应用细胞培养、电子显微镜、基因扩增、基因分型、DNA序列分析以及Western blot等先进分子生物学技术。从国外引进最新计算机软件(DNAstar)对实验数据进行分析。首次成功地在国内建立了我国自己的3株贾第虫纯(无菌)培养虫株,按WHO推荐的命名法予以命名:北京株为     

蓝氏贾第虫分离株tim基因序列分析比较研究

为了探讨来源于不同地理位置贾第虫分离株之间的遗传学关系，采用ｔｉｍ基因扩增、限制性酶切和ＤＮＡ序列分析方法来自我国（Ｃ１、Ｃ２、ＣＨ２、ＣＨ３）、柬埔寨（ＣＡＭ）、澳大利亚（Ａ１、Ａ２）和美国（ＢＰ、ＣＡＤ）共９株蓝氏贾第虫的基因型进行了分析比较。结果表明，Ａ１、Ａ２和ＣＡＭ属第１型（ＷＢ）；ＣＨ３属第２型（ＪＨ）；Ｃ１、Ｃ２、ＢＰ和ＣＤＣ属第３型（ＧＳ）。本实验结果提示，虫株间遗传学关系并非由地     

从大鼠肺灌洗液中分离纯化培养卡氏肺孢子虫

目的 建立卡氏肺孢子虫（Pneumocystis carinii, P.c）纯培养株。 方法　 从肺孢子虫肺炎（PCP）大鼠模型离体肺脏的灌洗液中分离P.c，用改良IMDM培养基进行体外培养；以四胺银染色计数法观察虫体增殖情况；用PCR扩增培养物中P.c线粒体大亚基rRNA基因，进行基因鉴定；用透射电镜观察培养虫体的超微结构。 结果 用添加ｓ-腺苷甲硫氨酸（SAM）等辅助剂的IMDM培养基从8只PCP大鼠的肺灌洗液中分离出5个P.c纯培养株（P.c Rat1~5）。分离培养的P.c可进行冷冻保存和复苏培养。培养72 h的P.c包囊可增殖19~22倍。形态、超微结构及基因序列分析证实从大鼠肺灌洗液中分离出的培养物是大鼠源性肺孢子虫。 结论 从大鼠肺灌洗液中分离培养出5株大鼠源卡氏肺孢子虫。     

大蒜素治疗大鼠肺孢子虫肺炎的实验研究

目的观察大蒜素对大鼠肺孢子虫肺炎(PCP)的治疗效果。方法采用皮下注射醋酸泼泥松龙的方法建立PCP大鼠模型。将受试大鼠随机分为正常对照组(A)、未治疗对照组(B)、TMP-SMZ治疗对照组(C)、大蒜素治疗组(D)和青蒿素治疗组(E)。各组从第7周开始灌服相应药物5d,停药后观察1周,用肺重/体重比和肺虫荷量考核疗效。结果PCP大鼠6周内的病死率为16.7%,满6周时抽样进行病原、病理检查,证实均已成功诱导PCP。5组受试大鼠的平均肺重/体重比分别为0.75±0.090、1.05±0.174、0.77±0.091、0.79±0.114和0.85±0.188。B~E组受试大鼠肺虫荷量分别为1490、74、296和219个包囊/mg肺。统计学分析显示,经大蒜素治疗的大鼠平均肺重/体重比、肺虫荷量均显著低于未治疗对照组(P<0.05),与TMP-SMZ治疗对照组和青蒿素治疗组比较差异无显著性(P>0.05)。结论大蒜素对大鼠PCP有显著疗效,效果与TMP-SMZ和青蒿素接近。     

甲硝唑对体外蓝氏贾第鞭毛虫形态结构的损伤

用含甲硝唑500 μg/ml（12h LC₅₀）的改良TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体。分别用光镜和电镜观察药物作用后2、4、8及12 h虫体的形态变化。光镜观察显示：虫体变圆，从培养管壁脱落，鞭毛摆动迟缓或停止，细胞质出现空泡。电镜观察显示：虫体胀大、变圆、细胞质内核糖体溶解，出现大量空泡；核呈锯齿状异形。证实甲硝唑对体外培养的贾第虫滋养体的形态结构有明显的损伤作用。     

我国北方部分地区农村居民肠道寄生虫感染调查

为了解我国北方农村居民的肠道寄生虫感染情况,作者等对北京、甘肃、辽宁三省市部分人群进行了粪检调查,结果简要报告如下。 材料和方法 采用整群抽样方法,在上述地区农村中收集受检者的新鲜粪便标本,立即用直接涂片法和改良硫酸锌漂浮法或将标本用汞醛碘液固定后进行检     

国内蓝氏贾第鞭毛虫研究

蓝氏贾第虫鞭毛虫(GiardialambliaStile,1915,亦称G.intestinalis或G.duodenalis,简称贾第虫)是一种机会性致病肠道原虫,一种全球性的引起人和动物腹泻的常见病原体。以往国内对本虫的危害性及其在生物进化上的地位缺乏足够的重视,实验研究起步较晚,在七十年代以前几处于?..     

肠阿米巴病的长爪沙鼠动物模型

剖腹后,将多栖培养的溶组织内阿米巴滋养体接种到长爪沙鼠盲肠内。接种后7～20 d 检查受试动物的肠内容物及肠、肝、脾、肠系膜淋巴结的病理组织学变化。16只受试动物有12只受染,其中7只出现盲肠病变,主要表现为粘膜表面縻烂,肠壁各层均有巨噬细胞和淋巴细胞浸润。其中1鼠的肠系膜淋巴结出现小灶状坏死,肝脏出现多发性小阿米巴脓肿。     

DNA拓扑异构酶抑制剂及其抗卡氏肺孢子虫的研究进展

目前 ,生物医学的研究已集中在寻找新的干预措施来控制寄生虫性公共卫生问题。分子生物学和细胞生物学惊人的成就 ,提供了发现和评价药物分子靶的机会。DNA拓扑异构酶———“细胞内的魔术师” ,几乎涉及到所有控制DNA的生物过程 ,已呈现出作为设计新型药物的重要靶点(ChowdhuryandMayumder,2 0 0 4 )。过去的 2 0多年 ,拓扑异构酶的研究已从基础扩展到临床 ,美国国立癌症研究所 (NCI)已将TopoⅠ抑制剂列为重点研究的六大类抗肿瘤药物之一 (Liu ,1 989)。本文主要就拓扑异构酶抑制剂及其抗卡氏肺孢子虫的研究综述如下。1　拓扑异构酶…     

蓝氏贾第鞭毛虫河北株的分离及其基因型研究

目的 探讨河北承德地区蓝氏贾第鞭毛虫包裹大小与基因型的关系。方法 对河北承德地区进行贾第虫流行病学调查,分离出3株贾第虫（CH2,CH3、CH4）。用PCR技术对此3虫株DNA进行tim基因扩增和序列测定,并与GenBank登记虫株比较和用DNAstar软件处理。结果 此3株贾第虫株的基因型属2型（JH型）。结论 该地区贾第虫包囊形态之大小,与基因型并无直接关系。