46,XY女性性反转患者SRY基因的一个新突变类型

目的 研究46，XY女性性反转患者发病的分子机理。方法 应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)扩增1例性反转患者和其父亲的．SRY基因片段；PCR产物连接到pUCm-T载体上，在ABI 377-3自动测序仪上完成测序以查明突变；应用PCR-限制性酶切对DNA测序的结果进行检测。结果 发现该患者的SRY基因存在点突变(T387A)，导致SRY蛋白发生氨基酸翻译终止(酪氨酸129终止密码)，患者父亲的序列正常。由于患者SRY序列中增加一个Mae Ⅱ酶切位点，PCR-限制性内切酶酶切电泳检测，结果显示患者出现3条带(131bp、231bp和247bp)，而正常人出现2条带(131bp和478bp)，进一步验证了序列分析的结果。经查证数据库，该突变是一个未见报道的新型．SRY基因突变。结论 这一新型突变的发现，有助于进一步阐明46，XY女性性反转发病的分子机理。     

携带淀粉样前体蛋白瑞典型突变基因转基因小鼠的制备及体内表达研究

目的 建立携带人类淀粉样前体蛋白瑞典型突变（Swedish mutation of amyloid precursor protein,APPSWE)基因的转基因小鼠模型。方法 采用受精卵原核显微注射法，将人类APPSWE转基因导入C57及昆明种小鼠受精卵内，然后将注射后保持完整的受精卵移植到假孕母鼠的输卵管内，然后应用聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR)、荧光原位杂交及逆转录PCR分析子代小鼠中外源基因的整合及表达情况。结果 注射后卵的存活率和幼子出现率分别为76.62%和10.38%；外源基因整合率为35.29%；共获得6只首建小鼠，已稳定传3代，PCR检测共55只阳性；提取阳性小鼠心、脑、肝、肾组织及骨骼肌以人类APPSWE基因外显子特异的引物进行逆转录PCR分析，结果发现其心、脑组织及骨骼肌中具有人类APPSWE基因的表达。结论 说明携带淀粉样前体蛋白瑞典型突变基因的转基因小鼠模型已制备成功。     

联合运用St14(DXS52)位点VNTR和 FⅧ基因内的(CA)n重复多态性诊断甲型血友病

目的　提高甲型血友病 (hemophilia A,HA)家系成员基因诊断及产前基因诊断的准确性和可诊断率。方法　采用 St14 (DXS5 2 )位点的可变串联重复序列和 F 基因第 13内含子的 (CA) n重复多态性连锁分析对 HA家系进行间接基因诊断。结果　单用上述 2个多态位点中的 1个对 9个 HA家系进行连锁分析 ,可诊断率均为 6 6 .7% ,联合 2个多态位点 ,可诊断率则提高到 88.9% ,完成了 4个家系的产前基因诊断 ,并监测到 1例单用 St14位点的可变串联重复序列多态连锁分析可能发生的产前诊断的误诊。结论联合采用上述 2个多态位点可以对近 90 %的 HA家系作出快速、准确的基因诊断和产前基因诊断。     

甲基化特异性PCR检测Prader-Willi综合征

目的 探讨一种高效、快速检测Ｐｒａｄｅｒ－Ｗｉｌｌｉ综合征（Ｐｒａｄｅｒ－Ｗｉｌｌ ｓｙｎｄｒｏｍｅ,ＰＷＳ）的方法。方法 采用甲基化特异性聚合酶链反应（ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＲＣＲ,ＭＳＰＣＲ）,其作用原理基于ＤＮＡ经亚硫酸氢钠处理后,来片交方非甲基化序列的胞嘧转变为尿嘧啶,而来自母方甲基化序列则保持不变,随后用具有高度特异性的引物进行扩增。结果 ＰＷＳ患者的ＤＮＡ经亚硫酸氢     

供精人工授精患者的心理特征分析及其护理干预

在现阶段的供精人工授精护理过程中,对接受此项技术的女性的心理照顾日益彰显重要,而心理护理干预措施对许多生殖中心来说是薄弱环节,本文就接受供精人工授精患者的心理特征和护理干预措施稍作分析.     

授精时机、活动精子总数对宫腔内人工授精临床妊娠率影响的研究

目的　探讨在宫腔内人工授精 (IUI)过程中 ,授精时间、处理后A、B级精子总数与IUI妊娠率的关系。方法　回顾了我室 2 0 0 1年 4月 30日～ 2 0 0 1年 11月 1日 2 0 8例IUI的资料 ,比较了不同授精时间、处理后A、B级精子总数对IUI临床妊娠率的影响。结果　IUI的授精时间与预期排卵时间在 6小时以内组的妊娠率显著高于 8小时组 (P <0 .0 5 ) ;而处理后A、B级精子总数分为 3组① 1× 10 6<精子总数 <2× 10 6;② 2× 10 6<精子总数 <10×10 6;和③精子总数 >10× 10 6。 3组间比较表明 ,其临床妊娠率无显著性差异 (P >0 .1)。结论　IUI治疗过程中 ,A B级精子总数 >1× 10 6时 ,其数量增加对临床妊娠率的增加并不显著 ,但授精时间愈接近排卵期 ,则妊娠率愈高     

卵巢刺激慢反应患者补充重组黄体生成素的疗效评价

目的评价在使用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)进行垂体降调节后,出现慢反应的患者补充重组黄体生成素(rLH)的有效性。方法本研究以应用GnRH-a长方案进行垂体降调节后,对卵泡刺激素(FSH)刺激呈慢反应的患者为研究对象,在卵巢刺激第7～8天补充rLH 75～150 U/d,至注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)日。观察卵泡发育情况、雌二醇(E_2)水平、获卵数、以及HCG阳性率和临床妊娠率等。结果自2009年12月至2011年8月,共计60例符合慢反应诊断标准的患者在促排卵过程中补充了rLH,所有研究对象均接受了HCG注射和取卵。每个刺激周期的获卵数为(12.4±7.2)个,成熟卵母细胞数为(9.6±6.5)个,获得的胚胎数为(6.4±4.6)个。54例(90%)患者进行了新鲜胚胎的移植。每个刺激周期的HCG阳性率为56.7%,临床妊娠率为55.0%,卵巢过度刺激综合征(OHSS)的发生率为3.3%(2例,均为轻度)。结论对FSH刺激呈慢反应的患者补充rLH可以改善卵巢的反应性,增加获卵数,改善妊娠结局。     

微量细胞的cDNA文库构建

不同组织、不同发育阶段的 c DNA文库可看作是表达基因的文库。从微量甚至单个细胞中构建 c DNA文库 ,为解决分化系统的异质性和基因表达模式分析需要大量充分纯化的细胞之间这一矛盾提供了一条途径。本文就近年来国内外用少量细胞构建 c DNA文库的各种方法、特点及其如何改进等作一简要介绍。     

精子发生相关基因的分子遗传学研究进展

特发性无精、严重少精症的分子遗传学研究越来越广泛深入。近年来,控制精子发生的相关基因,主要包括位于Y染色体AZFa区的USP9Y和DBY、AZFb区的RBM基因、AZFc区的DAZ基因,和位于常染色体的DAZLA基因等在分子遗传学研究方面均取得了可喜的进展。对这方面的研究进展及其展望进行了综述。     

少精症患者Y染色体微缺失基因诊断的研究

目的 建立稳定的少、弱精症患者Y染色体微缺失的基因诊断方法，研究 男性不育与Y染色体位点缺失的相关性。方法选取位于AZE区15个STR微卫星标记分成4组进行多重PCR的检测。结果 90例少弱精患者中，检出7例缺失，占患者的7.8％。其中有3例为单个位点的缺失，有4例为大片断缺失。结论 多重PCR是检测Y染色体微缺失的合适方法，AZEb和AZEc区与少弱精症密切相关。