电离辐射对肺腺癌细胞A549线粒体的影响

目的 研究电离辐射对肺腺癌细胞A549线粒体的影响。方法 0、0.5、3和8 Gy ⁶⁰Co γ射线照射A549细胞后,利用JC-1探针检测照射后肺腺癌细胞A549线粒体膜电位的变化;使用ATP试剂盒检测辐射对A549细胞ATP生成的影响;利用实时定量PCR方法检测线粒体拷贝数。结果 在照射后24 h,各剂量组A549细胞膜电位出现明显改变（F=243.44,P<0.05）,与0 Gy照射组相比,0.5和3 Gy照射的A549细胞线粒体膜电位显著升高（t=-10.12、-5.59,P<0.05）,而8 Gy照射的线粒体膜电位显著降低（t=15.22,P<0.05）,照后48 h各照射组线粒体膜电位基本恢复正常（F=10.36,P<0.05）;照射后24 h ATP水平与膜电位变化趋势一致（F=97.08,P<0.05）,其中0.5和3 Gy A549细胞中ATP水平升高（t=1.66、7.27,P<0.05）,8 Gy照射组降低（t=-8.24,P<0.05）;照射后48 h,ATP水平也发生变化（F=39.49,P<0.05）,0.5和3 Gy照射后A549细胞中ATP水平显著高于0 Gy组（t=4.60、8.53,P<0.05）。照射后24 h线粒体拷贝数显著增加,其中0.5 Gy mtDNA拷贝数增加至对照组的12倍（t=0.02,P<0.05）,3和8 Gy组mtDNA拷贝数分别增加至对照组的7和10倍（t=9.68、15.10,P<0.05）。结论 大剂量电离辐射会导致A549细胞线粒体膜电位降低,从而影响ATP的生成,中等剂量以下的照射会导致A549细胞线粒体膜电位代偿性增高,从而使ATP的生成增多,8 Gy以内的电离辐射可使mtDNA拷贝数代偿性升高。     

低剂量60Coγ射线诱导人淋巴细胞核质桥适应性反应的研究

目的 以核质桥(NPB)为主要指标,探索低剂量⁶⁰Co γ射线是否能诱导人外周血淋巴细胞的适应性反应及诱导剂量范围。方法 用⁶⁰Co γ射线照射健康成年男子离体外周血,照射剂量分别为0、20、50、75、100、150和200 mGy(吸收剂量率为25 mGy/min),照射后间隔6 h后再给予2 Gy照射(吸收剂量率为1 Gy/min)。采用胞质分裂阻滞法(CBMN)进行细胞培养,观察NPB及微核(MN)的发生情况。结果 0~200 mGy剂量范围内,NPB和MN数目随吸收剂量的增加而增多,并拟合出NPB的线性平方模型y=(1.5×10^-4)x²-(5.67×10^-3)x+0.598 (R²=0.893 8)。提前给予75~100 mGy照射比直接受到2 Gy照射产生的NPB及MN数目均有所减少(U=2.66、2.97、3.96、5.89,P<0.05),在100 mGy照射后NPB减少最多(43.2%)。结论 低剂量⁶⁰Co γ射线可以诱导人外周血淋巴细胞的适应性反应,诱导剂量范围为75~100 mGy。     

低剂量γ射线对小鼠产生血清特异性抗体的影响

探讨低剂量电离辐射对小鼠特异性抗体产生是否有影响。方法昆明种雄性小鼠单次照射６０Ｃｏγ射线后，用狂犬疫苗全程免疫，ＥＬＩＳＡ法测定小鼠狂犬病毒特异性ＩｇＧ抗体水平。结果①５～３０ｃＧｙγ射线照射的小鼠血清中特异性抗体水平显著高于对照，其中１０ｃＧｙ为刺激血清特异性抗体产生的最佳剂量；②１０ｃＧｙ照射，小鼠血清中特异性抗体水平的峰值显著高于对照组的峰值，而且其峰值提前出现；③１０ｃＧｙ照射引起的特异性抗体水平的增高可持续１周。结论低剂量电离辐射可对小鼠血清特异性抗体的产生有刺激作用，并可持续一定的时间。     

BACFISH与PAINT法检测辐射诱发染色体易位的比较

目的 比较自行建立的BAC FISH方法和常规染色体涂染(PAINT)方法分析辐射诱发染色体易位有效性的不同。方法 对正常人外周血照射不同剂量(0～5.0 Gy)的⁶⁰Co γ射线,用1、2和4号染色体特异性端粒和着丝粒探针BAC FISH及PAINT分析染色体易位,将观察到的染色体易位率换算为全基因组易位率,并建立两种方法分析辐射诱发的染色体易位率剂量-效应曲线。结果用两种方法分析0～5.0 Gy ⁶⁰Co γ射线诱发的全基因组易位率均随着吸收剂量的增加而增高;在相同的剂量点,BAC FISH染色体易位检出率高于PAINT方法。两种方法分析吸收剂量和全基因组易位率之间的剂量-效应曲线均为二次方程模式,分别为Y= 0.043D²+0.0008D+0.0048(BAC FISH)和Y=0.043D²+0.006D+0.0027 (PAINT)。结论 自行建立的BAC FISH方法分析辐射诱发染色体易位检出率高于常规染色体涂染方法,两种方法建立的剂量-效应曲线方程的β系数相同。     

电离辐射诱导的两种新线粒体DNA缺失的分析鉴定

目的 筛选电离辐射诱导的线粒体DNA(mtDNA)缺失类型,并进行鉴定。方法 用10 Gy ⁶⁰Co γ 射线照射正常人淋巴细胞细胞系,用2对引物的长PCR扩增照射前后样品的mtDNA基因组。发现可能缺失片段后用限制条件的普通PCR进行确认,并对PCR产物进行纯化、克隆、测序和核酸同源性(BLAST)分析。结果 照射前的淋巴细胞系mtDNA样品只扩增出预期全长片段,照射后每对引物还扩增出可能为缺失造成的短片段;进一步限制条件的普通PCR证实了mtDNA缺失的存在。PCR产物经纯化、克隆后测序进行BLAST分析表明两种mtDNA缺失分别为7455 bp (重链nt475～7929)、9225 bp (重链nt7714～369)的mtDNA缺失,均发生在8bp正向重复序列之间。进一步的生物信息学检索得出两种mtDNA缺失为新发现的mtDNA缺失类型。结论 电离辐射诱导出人淋巴细胞mtDNA 7455 bp和9225 bp缺失。     

辐射诱导的基因表达改变及其在生物剂量学中的应用前景

随着人类基因组计划的完成,功能基因组学、蛋白质组学和代谢组学的研究开始在生物医学各个领域兴起.辐射诱导的DNA、mRNA和蛋白质水平的改变也引起越来越多的关注[1],对辐射诱导的这些改变进行研究不仅有助于辐射生物效应机制的阐明,而且这些指标的定量改变与辐射剂量的关系有可能用于放射生物剂量学.     

《荧光原位杂交分析染色体易位估算辐射生物剂量技术方法》解读

国家职业卫生标准——《荧光原位杂交分析染色体易位估算辐射生物剂量技术方法》是在收集整理、全面阅读了与该标准有关的国内外文献资料和我国现行有效的放射性疾病诊断标准,将资料汇总分析后经实验室反复验证的基础上制定的.此标准主要用于早先事故受照人员的生物剂量估算,为临床放射损伤的诊断提供科学依据.为了使放射性疾病临床工作者更好地理解、贯彻执行该标准,该文对标准的相关内容进行了解读.     

γ射线诱发人外周血淋巴细胞T细胞受体基因突变剂量-效应和时间-效应关系

目的 初步建立T细胞受体(TCR)突变频率的剂量-效应和时间-效应模型,为探讨TCR作为估算辐射生物剂量计提供依据.方法 将10名健康成年人的外周血淋巴细胞分成两组.第1组4人(男性)的外周血淋巴细胞分别给予0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0和5.0 Gv γ射线照射,用于拟合剂量-效应曲线,第2组6人(男女各半)的外周血淋巴细胞给予2 Gy γ射线照射,用于拟合时间-效应曲线.用流式细胞仪进行计数检测,计算TCR基因突变频率.结果 γ射线照射诱发TCR MF的辐射剂量-效应曲线,拟合最佳的模型为二次方程模型:TCR MF=92.14+22·61D2(R2adj=0.65);γ射线照射诱发TCR MF的辐射时间-效应曲线,拟合最佳的模型为二次多项式方程模型:TCR MF=3.74+743.66T+308.64T2(R2adj=0.79).结论 0～5 Gy范围内TCR基因突变频率与辐射剂量存在剂量-效应关系.照后4 d内TCR基因突变频率随时间的延长而继续增加,存在时间-效应关系.

Abstract：

Objective To study the dose-effect relationship and time-effect relationship of T cell receptor (TCR) gene mutation induced by γ-rays in lymphocytes of human peripheral blood.Methods Samples of peripheral blood were collected from 10 healthy adults and lymphocytes were separated.Four samples from males used to fit time-effect curve were exposed to γ-rays at the doses of 0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5,4.0,and 5.0 Gy,respectively,and 6 samples from 3 males and 3 females used to fit dose-effect curves were exposed to γ-rays of the dose of 2 Gy.Flow cytometry was used to detect the mutation frequency of TCR gene (TCR MF).Radiation dose-effect curves and time-effect curves were fitted and optimal mathematical models were selected respectively.Results The optimal mathematical model for radiation dose-effect was quadratic equation model:TCR MF = 92.14 + 22.61D2 (R2adj = 0.65).The optimal mathematical model for radiation time-effect was quadratic polynomial equation model:TCR MF = 3.74 + 743.66T + 308.64T2 (R2adj = 0.79).Conclusions TCR MF is increased as the γ-rayirradiation dose increases within the range of 0-5 Gy,and TCR MF is increased with the lapse of time within the range of 4 days after γ-ray radiation.     

山西忻州事故中孕妇受照后第16年随访

目的 通过对在山西忻州⁶⁰Co 源放射事故中受到意外照射而罹患外照射中度骨髓型急性放射病孕妇"芳"(孕19周)进行照后第16年的随访观察,以期了解辐射对育龄妇女的远后影响。方法 采用询问病史、全面体检、实验室和影像学检查及临床相关专业科室会诊,并对其进行评估。结果 "芳"病愈后常感到乏力,易患感冒;照后9年(32岁)头发全部变白,但无脱发;16年来月经量明显减少;31岁(受照后8年)在怀孕6个月时胎儿宫内死亡。体检仅发现双侧甲状腺I度肿大,腋毛稀疏,余无阳性体征。实验室检查结果仅显示T3、T4增高,TSH减低,抗甲状腺过氧化物酶抗体(TMAb)增高。应用荧光原位杂交(FISH)技术检测染色体稳定性畸变,用剩余染色体畸变估算的剂量为0.76 Gy。 其他指标的检查结果均在正常范围。甲状腺超声检查见双甲状腺实质弥漫性病变,甲状腺右叶多发囊性结节。骨密度检查结果发现2～4腰椎骨质疏松。结论 受照后8年,妊娠6个月时,胎儿宫内死亡与其既往受照有关;非癌症疾病表现明显;未发现罹患癌症证据。     

山西忻州事故中宫内受照胎儿出生后第16年随访

目的 随访1992年11月山西忻州辐射事故中意外受到⁶⁰Co 源照射的妊娠妇女"芳"所产女婴"京"的生长发育情况,以观察研究宫内照射的远期效应及其现实意义。方法 除了进行一般医学检查外,应用染色体畸变分析方法和荧光原位杂交(FISH)方法检测染色体非稳定性畸变率和稳定性畸变率,中国修订韦氏儿童智力量表(C_WISC)检测智商水平。结果 无恶性肿瘤及遗传性疾病家族史;"京"易感冒,但无其他疾患;月经和体格发育正常;不能进行简单数字加减运算,但可进行简单语言交流和写作等。常规实验室检查果均正常。染色体未见非稳定性畸变;FISH检测显示,染色体易位率为2.3%,提示染色体损伤剂量为0.61 Gy,推算"京"当年受到辐射的生物剂量为1.85 Gy。超声检查示结节性甲状腺肿。中国修订韦氏儿童智力量表(C_WISC)测验结果显示言语、操作和全量表智商分别为51、50和46,总智力优于0.01%的人群,低于99.90%的人群。结论宫内受照未影响"京"出生后的体格发育,对其智力发育有严重影响;目前尚无恶性肿瘤的证据。