应用TaqMan探针定量检测孕妇血清胎儿游离DNA

目的:探讨应用TaqMan探针实时定量聚合酶链反应(Real timequantitativePCR)技术检测孕妇血清中胎儿游离DNA含量变化的可行性。方法:选择孕21三体男胎的妇女5例为实验组,对照组为孕正常男胎的妇女18例,孕正常女胎的妇女17例,提取其外周血血清中游离DNA,应用TaqMan探针实时定量聚合酶链反应技术检测Y染色体上的DYS14基因,以此确定母体血清中的胎儿游离DNA含量,并同时检测代表母体与胎儿总游离DNA的βactin基因作为对照。结果:孕21三体男胎组血清胎儿游离DNA含量明显高于孕正常男胎组,它们分别为90.7基因当量(genomeequivalents,GE)/ml及42.8GE/ml(P<0.01),孕21三体男胎组血清中的胎儿游离DNA含量为孕正常男胎组的2.1倍,孕正常女胎组血清中未检测到Y染色体上的DYS14基因。结论:TaqMan探针实时定量聚合酶链反应技术是一种敏感、特异、高效的检测方法,胎儿游离DNA含量变化有可能成为产前筛查唐氏综合征的候选指标。     

α干扰素抑制肝癌转移复发及其机制

肝癌占全世界癌症死亡的第三位，是我国癌症死因的第二位。经过几十年的努力，肝癌研究取得了许多进展，在某些临床中心，肝癌根治性切除后5年生存率可达40％以上（本所治疗的肝癌患者的5年生存率在小肝癌切除术者中约为60％，大肝癌切除术者约为30％）。但术后5年复发率高达60％以上（小肝癌也达40％～50％）。转移复发已成为进一步提高远期疗效的瓶颈问题，     

肝细胞癌门静脉癌栓相关血清小分子量蛋白质标志物的筛选

目的筛选肝细胞癌门静脉癌栓相关的血清小分子量蛋白质标志物。方法收集健康志愿者、肝细胞癌无癌栓患者和肝细胞癌门静脉癌栓患者3组血清各l2份，用16％SDS-PAGE进行双向电泳，得到3组血清小分子量蛋白质表达图谱；经Image Master软件比对分析后，用基质辅助激光解析飞行时间质谱对差异点进行鉴定。结果在16％SDS-PAGE凝胶中，3×10^3～20×10^3区域内蛋白质条带间距较12．5％SDS-PAGE明显增宽，条带数目明显增多，且3组血清小分子量蛋白质表达图谱中均可清晰显示〈20×10^3的小分子量蛋白质斑点。组间比较显示，3组血清共有15个小分子量差异蛋白质点，经鉴定为5种蛋白质。与健康组比较，无癌栓组中载脂蛋白A-I、脂蛋白CⅢ、转甲状腺素蛋白和DNA拓扑异构酶Ⅱ表达降低，而结合珠蛋白-2表达增高；门静脉癌栓组5种蛋白质表达均较无癌栓组降低。结论在肝细胞癌的发生和发展过程中，血清小分子量蛋白质表达谱发生明显变化，差异表达的小分子量蛋白质有可能为肝细胞癌和门静脉癌栓早期预测及治疗监测提供参考。     

上皮钙粘蛋白（E—cadherin）在高侵袭性肝细胞癌中的表达

目的旨在探讨上皮型钙粘蛋白（Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ）与肝癌侵袭的关系。方法选择２５例原发性肝细胞癌及相应癌旁组织、２例门静脉癌栓标本和裸鼠高、低转移人肝癌模型（ＬＣＩＤ２０和ＬＣＩＤ２５），Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎｍＲＮＡ的表达采用半定量逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）检测。结果Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ在２５例肝细胞癌和相应的癌旁组织中基因表达值为８２．９％±５４．９％和４９．５％±２６．９％，两者差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。２例门静脉癌栓标本均不表达Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ，裸鼠高转移人肝癌模型（ＬＣＩＤ２０）也不表达Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ，而低转移模型（ＬＣＩＤ２５）的表达值为６７．４的±１６．０％。高侵袭性肝癌和低侵袭性肝癌Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ表达指数分别为４８．９％±３８．０％和７９．１％±１９．１％，两者差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ表达指数与肿瘤包膜和大小无关。结论肝细胞癌组织Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ表达低于其相应的癌旁组织，高侵袭性肝癌较低侵袭性肝癌表达更低，Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的丧失或低表达是肝癌获得高侵袭转移能力的因素之一。     

新型三聚β肽对人肝癌细胞系迁移和侵袭能力的影响

在肿瘤侵袭转移过程中，肿瘤细胞首先脱离原位，与基底膜和细胞外基质中的大分子蛋白成分黏附，并激活与基质蛋白溶解相关的蛋白水解酶类如基质金属蛋白酶(MMPs)，降解基底膜和细胞外基质，从而细胞移动并穿过基底膜和血管壁进入血液循环。在肿瘤细胞与细胞外基质的黏附过程中，整合蛋白起了非常重要的作用。Liu等根据整合蛋白β亚基和部分α亚基的保守序列设计的抗黏附β肽能阻断肿瘤细胞与基质的相互作用，对高转移的人肝癌裸鼠模型LCID20肝癌切除术后肝内转移和肺转移也具有强大抑制作用。     

不同转移潜能人肝癌细胞系酪氨酸磷酸化蛋白质差异分析

目的研究不同转移潜能人肝癌细胞系中酪氨酸磷酸化蛋白质表达的差异并筛查与肝癌转移相关的酪氨酸磷酸化蛋白质分子。方法应用双电泳(2-D E)、免疫印迹法及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析,对三种不同转移潜能人肝癌细胞系Hep 3B、MHCC97L和MHCC97H进行酪氨酸磷酸化蛋白质组分析。结果对照2-DE胶和免疫印迹发光胶片,Hep3B检测到10个点,MHCC 9 7L检测到19个点, MHCC97H检测到17个点。经质谱鉴定,得到膜连蛋白Ⅰ等19个差异点。结论细胞内酪氨酸磷酸化蛋白的表达差异与肝癌的侵袭转移有关。     

人肝细胞性肝癌组织转移相关分子的比较蛋白质组学研究

目的 应用比较蛋白质组学方法研究肝细胞性肝癌(HCC)转移相关的关键蛋白分子。方法 用双向凝胶电泳(2DE)对有转移的HCC组织和未发生转移的HCC组织总蛋白进行分离，两组间差异蛋白点用质谱和数据库搜索鉴定，并在蛋白质和mRNA水平上进一步检测验证。结果 鉴定出l6个差异表达蛋白，包括S100钙结合蛋白(S100)、热休克蛋白27(HSP27)、细胞角蛋白18(CK18)等。对在转移性HCC组织中表达显著增高的HSP27，应用western blot分析在蛋白水平上验证了2DE结果，RT-PCR检测出两组问mRNA水平也存在差异，但不显著，免疫组织化学检测显示HSP27主要定位于肝细胞胞浆内。结论 HCC转移与多种蛋白表达相关，其中HSP27高表达可能在转移中发挥作用，可能为潜在的判断HCC转移的分子标记或控制转移的治疗靶点。     

糖组学研究技术进展及其意义

糖组学(glycomics)是研究糖链组成及其功能的一门新学科,近年来备受关注。该文对糖组学的研究背景、意义、策略、技术手段以及在肿瘤学中的应用前景进行综述。     

肿瘤表观遗传学研究进展

对肿瘤研究的不断深入使人们认识到几乎所有人类肿瘤都是由表观遗传学异常与基因改变共同引起并促进其演变的.表观遗传学改变主要包括DNA甲基化改变和组蛋白修饰,这两种调控模式本身及之间的相互作用网络可导致印记丢失,染色质重塑,非必需重复序列的转录、基因的异常活化以及抑制肿瘤发生和演进基因的异常沉默等,在异常的克隆性增生和癌性增生的级联事件起始中发挥重要作用,在酵母模型中的研究更深入的理解了肿瘤干细胞的定义以及引起肿瘤的相关分子机制.表观遗传学的研究为进一步了解肿瘤的各种特性,优化肿瘤的早期诊断,改善肿瘤的预后提供了新的策略.     

磷酸化蛋白质的检测技术进展

蛋白质的可逆磷酸化修饰是生物体内普遍存在的信息转导调节方式,几乎参与生命活动的所有过程。现分析磷酸化蛋白质的各种方法及其进展,尤其是近年来蛋白质组学技术的发展与应用为磷酸化蛋白质的定性、定量和功能研究提供了必要的技术,使大规模和系统性进行磷酸化蛋白质的研究成为可能。