用标准淋巴细胞鉴定HLA抗血清特异性

随着HLA分型技术的日趋完善,微量淋巴细胞毒试验重复性的提高以及低温长期保存淋巴细胞的成功,应用已知 HLA 型的“标准细胞”鉴定 HLA 抗血清特异性,已成为实验室的一项常规技术。本文介绍该技术在研制 HLA-AB 分型血清中的应用以及 HLA分型血清的某些质量标准。材料与方法一、微量淋巴细胞毒试验:按标准方法改良而成,即在反应孔中依次加入1微升 HLA 抗血清和1微升淋巴细胞悬液(2,000个淋巴细胞),于22±2℃培育30分钟,然后加兔补体5微升,于相同温度继续培育60分     

固相血小板免疫血清学试验在血小板输注治疗中的应用——Ⅰ.血小板交叉配合技术和临床效果

本文应用固相免疫血清学试验(SPISA)技术,成功地进行血小板的抗体检查和血小板交叉配合试验,为因血小板表面抗原同种免疫而致血小板输注无效的患者,筛选配合的血小板供体,作单采血小板后供输注治疗。在报导的4例患者中,血小板输注24小时回收率均在20％以上,获得良好的治疗效果。     

试剂红细胞液氮(-196℃)滴珠保存的研究

本文介绍应用毛细滴管,将试剂红细胞在液氮里滴成球状小珠,于-196℃下长期保存的方法.结果证明,该法具有微量和长期有效保存,操作简易,抗原特异性不受影响,回收率高,随时可取用等特点.     

环磷酰胺抑制作用下小鼠对人红细胞抗原的选择性耐受

目的　以环磷酰胺 (CY)作为免疫抑制剂 ,诱导小鼠产生对人红细胞血型抗原的选择性免疫耐受。　方法　1 0 2只 Balb/c小鼠分成 1 7组 ,在 2× 1 0 7人红细胞免疫注射后 ,分别以不同 CY剂量和给药时间给予抑制。并通过直接和间接血凝反应测定小鼠免疫应答所产生的抗人红细胞抗原的 Ig M和 Ig G型抗体效价。　结果　在 5 0～ 1 5 0 mg/kg CY剂量范围内 ,免疫注射当天至免疫后第 4天 (d0～d4)均可对小鼠的免疫应答产生抑制。而诱导小鼠产生对人红细胞抗原完全耐受的最佳 CY抑制时间和剂量分别为免疫注射后的第 1天和 1 0 0 mg/kg。　结论　 CY能有效抑制小鼠对人红细胞免疫所产生的应答 ,选择适当的给药时间和 CY剂量对耐受的建立十分重要。本项研究对诱导小鼠免疫系统产生对人红细胞血型弱抗原的应答具有探索意义。     

血小板输血反应及其对策

血小板输血反应是指由于免疫性或非免疫性原因,使输入患者体内的血小板发生异常破坏,而引起发热、输血相关急性肺损伤、血小板输注后紫癜(post-transfusion purpura,PTP)、血小板输注后无效(platelet transfusion refractoriness,PTR)等输血不良反应[1]。本文对血小板输血反应及其对策作一简述。     

应用多重PCR-RFLP技术检测头发、口腔腭粘膜的ABO基因型

目的探讨对头发、口腔腭粘膜等组织标本进行ABO基因分型的可行性.方法应用多重聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(多重PCR-RFLP)技术,检测8例头发和6例口腔腭粘膜标本的ABO基因型,标本的基因组DNA经2对引物同时进行扩增,扩增后的产物同时用Msp Ⅰ和Kpn Ⅰ 2种限制酶进行消化,通过消化后产生的片段即可判断结果.然后将分析结果与血清学技术检测的ABO表现型和受检者血液标本的基因型进行比较.结果 14例标本共检出6种ABO基因型,与表现型和血液标本的基因型结果完全一致.结论该方法操作方便,重复性、稳定性好,可鉴定15种基因型,应用于法医学鉴定具有可行性.     

220例患者血型不规则抗体分析

目的 对上海地区患中不规则抗体检出情况进行回顾性总结。方法 对2000年以来上海各医院送捡的免疫血液学标本2149例,应用盐水、抗球蛋白法、聚凝胺法检测不规则抗体。结果 共鉴定确认血型不规则抗体220例。其中自身抗体66例、确定同种特异性抗体154例,分别为：抗-D 41例、抗-E 37例、抗-cE 19例、抗-Ce 4例、抗-CD 3例、抗-c 4例、抗-M 15例、抗-N 3例、抗-PI 2例、抗-Le^a 1例、抗-Le^b 4例、抗-Le^x 1例、抗-Mur 3例、抗-S 2例、抗-HI 11例、抗-Jk^b 1例、抗-Fy^b 1例、抗—Tj^a 1例、抗-I 1例。结论 检出的不规则抗体与国外数据存在较大差异,国外常见的抗—K、抗—Fy^a在国内较少见。产生抗体的患(不包括孕妇)以女性居多。     

HPA和HLA已知型的血小板供者库建立及应用

目的 开展血小板同型或配合性输注是预防和治疗免疫性血小板输注无效(PTR)的良策.为此建立一定规模的HPA和HLA已知型血小板资料库,为临床提供匹配的单采血小板,是血小板输注安全有效的保障.方法 对所有供者库单采血小板进行ABO、HLA-A、B及HPA1-6,15基因分型.根据ABO、HPA同型和HLA同型或HLA交叉反应组相同(CREG)配型策略,编制数据库软件,建立上海市单采血小板供者资料库.结果 上海市血小板供者库至今已接受80人/次患者查询,共有78名患者找到合适的供者.HPA和HLA的CREG相同配合率为97.5％.其中50名患者接受了单采血小板的同型(或配合型)输注,47名输注有效(24 h血小板回收率＞20％).其中更有15名患者同型输注疗效明显,24 h回收率＞80％.结论 建立血小板供者HPA和HLA Ⅰ类抗原基因分型资料库,为患者提供HLA和HPA、ABO匹配的单采血小板,可以降低PTR的发生率,是解决免疫性PTR的根本手段.     

与HLA-A2纯合子细胞反应的一组血清

在6名经产妇献血员血清中,发现一个起共同反应的HLA抗体,被称为抗SH1。该抗体与大约19％的表现型为A2的细胞反应,通过血清学和遗传学分析表明,抗SH1实际检出的是HLA-A2纯合子细胞。     

上海地区献血人群免疫球蛋白A缺乏调查

目的筛查免疫球蛋白缺乏症(IgAD)患者,了解上海地区献血者中IgAD缺乏频率,以预防IgA输血过敏反应风险发生。方法采用IgA完全缺乏检测标准(IgA含量<0.05 mg/dl),以ELISA法对上海地区22 609名健康献血者的血清标本作初步筛查,IgAD者再用凝胶免疫法确认,同时对IgAD标本作抗-IgA检测。结果在22609份健康献血者标本中,有7例确认为IgA含量<0.05 mg/dl,由此推算出上海地区献血人群完全IgAD缺乏比例为0.031%(7/22 609);另有7例血清IgA含量在(0.39~3.70)mg/dl,表现为相对IgAD。在这14例IgAD(IgA<5mg/dl)标本中鉴定出2例含抗-IgA。结论上海地区健康献血者中IgA缺乏发生频率介于日本人种与高加索人种之间,但对IgAD者的输血仍存在潜在的风险,需要采取一定措施预防和规避输血过敏反应的发生。