小鼠PD-L1胞外段基因的原核表达及活性分析

目的原核表达小鼠程序性死亡分子1配体胞外段(exPD-L1)蛋白基因并在体外初步验证其生物学活性。方法应用小鼠脾脏细胞总RNA,反转录PCR克隆exPD-L1基因序列,将其克隆到pGEX-4T-1载体中构建原核表达载体pGEX-4T-1-exPD-L1,经酶切和测序鉴定正确后,转化到E.coli BL21(D3)中,经IPTG诱导表达后,对包涵体蛋白进行复性和纯化。对表达产物进行SDS-PAGE分析和Western blot法检测证明其正确后,采用GST pull-down检测融合蛋白和PD-1的相互作用,鉴定其生物学活性。结果成功构建重组质粒pGEX-4T-1-exPD-L1,并在宿主菌中成功表达相对分子质量(Mr)55 000的重组蛋白,包涵体成功复性和纯化后经Western blot法证明其正确表达,同程序性死亡分子1(PD-1)蛋白的GST pull-down结果表明融合蛋白具有生物学活性。结论成功克隆和表达小鼠exPD-L1蛋白,并证明其具有生物学活性。     

ICP-MS法测定喜炎平注射液中重金属及有害元素

目的 建立喜炎平注射液中17种重金属及有害元素的含量测定方法。方法 样品经消解后采用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法测定,射频功率1 550 W;蠕动泵转速0.3 r/s;等离子气体积流量15 L/min;辅助气体积流量0.2 L/min;载气体积流量1 L/min;采样深度10 mm,重复次数为3次。结果 该方法下Li、Al、V、Cr、Fe、Co、Ni、Cu、As、Ag、Cd、Sn、Sb、Ba、Hg、Pb、Bi的检测限分别为9.584、49.858、0.504、3.016、51.209、0.142、1.116、0.675、0.924、1.421、0.403、2.770、0.711、3.584、0.590、0.411、0.169 ng/mL,定量限分别为28.933、151.085、1.528、9.139、155.179、0.429、3.381、2.046、2.799、4.312、1.220、8.394、2.155、10.861、1.965、1.244、0.513 ng/mL,各元素在一定质量浓度范围内,响应值与质量浓度的线性关系良好（r>0.999 1）,进样精密度RSD在0.8%~3.8%（n=12）,重复性RSD在0.7%~2.0%（n=6）,17种元素的加样回收率在95.7%~104.8%。20批大生产样品检测结果：Ag为未检出,Li和V为检出但低于定量限,Al、Ni、Cu、As、Ba、Hg、Pb最大质量浓度分别为0.685、0.013、0.007、0.006、0.208、0.070、0.027 μg/mL,Cr、Fe、Co、Cd、Sn、Sb、Bi为未检出或检出但低于定量限。结论 方法的专属性、线性、灵敏度、精密度、准确度、耐用性等均良好,可用于喜炎平注射液中Li、Al、V、Cr、Fe、Co、Ni、Cu、As、Ag、Cd、Sn、Sb、Ba、Hg、Pb、Bi 17种元素的含量测定,20批大生产样品中17种元素检测结果均小于限度要求,符合规定。     

C2-神经酰胺在A549/PC9细胞凋亡中的作用及影响

目的 探讨C₂神经酰胺(鞘磷脂类物质之一)对非小细胞肺癌(A549和PC9)细胞凋亡的影响。方法 培养非小细胞肺癌细胞系(A549和PC9),提取总蛋白进行Western blot,检测两种细胞中凋亡蛋白Caspase-3及cleaved Caspase-3蛋白的表达情况;使用CCK-8比色法筛选药物浓度;Hoechst 33258凋亡染色检查细胞凋亡情况;流式细胞化学术检测细胞凋亡比率,RT-PCR检测凋亡蛋白Caspase-3的表达。结果 神经酰胺在50μmol/L浓度处理后细胞活力均在70%左右;与对照组相比,神经酰胺组凋亡蛋白表达升高(P<0.05);流式细胞化学术及凋亡染色检测显示神经酰胺处理组凋亡率与对照组相比增加(P<0.05);在基因水平检测mRNA显示凋亡蛋白Caspase-3表达增加(P<0.05)。结论 C₂-神经酰胺可以促使非小细胞肺癌细胞凋亡,从而为临床肺癌的化疗提供新的治疗靶点。     

开胸手术后伤口持续输注局麻药和PCIA的镇痛效果

目的比较开胸手术后伤口持续输注局麻药和PCIA的镇痛效果。方法择期开胸非心脏手术患者60例,ASAⅠ或Ⅱ级,随机均分为两组:伤口持续输注局麻药镇痛组(A组)和PCIA组(B组)。A组患者缝皮前在切口皮下处放置镇痛泵导管,继之通过导管快速给予0.5%罗哌卡因5ml,术毕48h内以2ml/h持续输注0.5%罗哌卡因。B组患者手术结束前30min缓慢静注舒芬太尼3μg,术毕接PCA泵以2ml/h(3μg/kg舒芬太尼配置成100ml)持续泵注。分别记录患者术后2、8、12、24、36、48h安静和活动时VAS评分、Ramsay镇静评分、术后需哌替啶镇痛例数、不良反应、住院时间及总体满意率等。结果两组患者术后不同时点安静时和活动时VAS评分差异无统计学意义。与A组比较,术后不同时点A组Ramsay镇静评分明显升高(P0.05)。术后A组无一例患者发生不良反应,明显低于B组嗜睡26例(87%)、头晕11例(37%)(P0.05)、呼吸抑制2例(6%)。A组满意率29例(97%),B组25例(83%),患者术后需哌替啶镇痛A组8例(26.7%),B组7例(23.3%),两组差异均无统计学意义。结论伤口持续输注局麻药镇痛和PCIA具有同样的镇痛效果,但伤口持续输注局麻药镇痛不良反应发生率低。     

延续性护理对老年高血压患者治疗依从性及血压水平的影响

目的探讨延续性护理对老年高血压患者治疗依从性及血压水平的影响。方法选取2018年1月至2019年6月在安徽医科大学附属安庆医院住院治疗的老年高血压患者100例,按随机数字表法分为观察组(50例)及对照组(50例)。两组均给予常规护理,观察组基于此基础上给予延续性护理,干预6个月后,比较两组患者治疗的依从性及血压控制水平。结果干预6个月后,观察组治疗依从性高于对照组,差异有统计学意义(P 0. 05);干预后3个月、6个月,观察组血压水平均低于对照组,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论通过延续性护理能提高老年高血压患者治疗依从性,有助于血压控制。     

风险分级管理模式预防脑卒中患者深静脉血栓的效果研究

目的 探讨风险分级管理模式对预防脑卒中患者深静脉血栓的影响。方法 研究对象为郑州大学第五附属医院收治的112例脑卒中患者,采用随机抽样法分为对照组和试验组各56例。对照组采用常规护理,实验组在对照组的基础上实施风险分级管理模式,分别在干预前、干预后及干预后2个月对患者行彩超、血浆D-二聚体测定,并用治疗决策满意度量表及生活质量量表进行评定。结果 干预后2个月,实验组深静脉血栓发生率为1.89%,低于对照组的11.11%,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后2个月,实验组D-二聚体水平为(397.94±29.77)分,对照组为(432.52±30.19)分,差异有统计学意义(t=—5.963,P<0.05)。干预后2个月,实验组治疗决策满意度得分(54.09±4.14)分,对照组为(51.69±5.05)分,差异有统计学意义(t=2.697,P<0.05)。患者治疗决策满意度得分[时间效应(F=197.349,P<0.001)、分组效应(F=6.970,P<0.05)及交互效应(F=2.517,P<0.05)]比较差异均有统计学意义。干预后2个月,...     

汉语发展性阅读困难儿童复合词加工的事件相关电位研究

目的:探索汉语发展性阅读困难(DD)儿童汉语简体字双字符复合词加工的事件相关电位(ERP)特征。方法:抽取新疆某地区2所小学3～5年级儿童进行筛查,共筛出18例DD儿童,年龄匹配26例正常对照(CA)儿童。使用ERP测量方法,让DD组和CA组儿童识别真词、反向非词和随机非词,比较两组儿童反应时、正确率、P200和N400的差异。结果:行为学结果显示DD组真词、反向非词和随机非词的反应时均长于CA组,正确率均低于CA组(均P<0.01)。ERP结果显示未发现P200效应,但有N400效应。DD组真词、反向非词和随机非词中N400平均振幅差异无统计学意义(P>0.05),但CA组随机非词的N400平均振幅比真词和反向非词的N400平均振幅更负(均P<0.05)。CA组随机非词的N400平均振幅比DD组更负(P<0.05)。结论:汉语发展性阅读困难儿童存在语素意识缺陷,复合词加工与N400有关,发展性阅读困难儿童缺乏N400效应。     

食管间叶性息肉1例

患者男性,73岁。自述进食梗噎感10年,加重2月余。近来只能进流食,经常口内吐出一肿物,能咽下,无疼痛。胃镜检查:下咽部形成一长约15cm条索状新生物,距门齿32~36cm,管腔变形、狭窄,黏膜不规则增生糜烂。行全食管切除术。术中见食道口端有带蒂茄形新生物,蒂位于食管入口处前壁,长     

糖类抗原125及血小板与淋巴细胞比值早期诊断卵巢癌的应用价值

目的 探讨糖类抗原125 (CA 125)及血小板与淋巴细胞比值(PLR)早期诊断卵巢癌的应用价值.方法 选取2015年6月至2019年6月北京京煤集团总医院、首都医科大学附属北京康复医院老年康复中心及中国中医科学院广安门医院收治的卵巢良性肿瘤患者40例为良性肿瘤组,卵巢癌患者40例为卵巢癌组,并于同期选取健康体检者40例为对照组.根据国际妇产科联盟(FIGO)分期标准将卵巢癌患者分为工+Ⅱ期组(n=25)、Ⅲ+Ⅳ期组(n=15);并按照肿瘤分化程度将卵巢癌患者分为低分化组(n=12)、中分化组(n=19)及高分化组(n=9).比较各组对象间CA125及PLR的水平,分析CA125及PLR在卵巢癌不同FIGO分期及不同分化程度中的水平变化.并采用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分析各参数对卵巢癌的诊断价值.结果 良性肿瘤组、卵巢癌组CA125及PLR水平明显高于对照组(P＜0.05),且卵巢癌组明显高于良性肿瘤组(P＜0.05);Ⅲ+Ⅳ期组CA125及PLR水平明显高于I+Ⅱ期组(P＜0.05);低分化组、中分化组CA125及PLR水平明显高于高分化组(P＜0.05),且低分化组明显高于中分化组(P＜0.05);CA125及PLR诊断卵巢癌的AUC分别为0.873、0.832.结论 卵巢癌患者CA125及PLR水平明显升高,随着卵巢癌病情加重,CA125及PLR水平越高,CA125及PLR在卵巢癌早期诊断中具有一定的诊断效能.