双重实时荧光PCR检测肠出血型大肠埃希菌stx1和stx2基因方法的建立

目的建立一种检测肠出血型大肠埃希菌(EHEC)产毒基因stx1和stx2的TaqMan双重实时荧光PCR法。方法根据GenBank公布的EHECstx1和stx2基因序列进行比对后设计相应的PCR引物和TaqMan探针,探针报告基团分别使用FAM和HEX标记,淬灭基团使用BHQ1标记。建立双重实时荧光PCR反应体系并对反应条件进行优化,对方法的灵敏度、特异性及其重复性进行分析。结果建立了EHEC双重实时荧光PCR检测方法。菌液浓度为102～108cuf/ml时,均可观察到扩增曲线,且扩增曲线平滑;检测30份模拟临床样品,均检测到stx1和stx2基因,且均培养出EHEC,该方法灵敏度为100%;3次重复测定108、105、102cfu/ml3个高、中、低浓度的菌液DNA模板,得到其扩增曲线,计算各浓度的Ct值标准差及变异系数,均小于5%,在误差允许范围内。结论建立的双重实时荧光PCR法可快速、灵敏、特异、有效地检出EHEC。     

实验室质量管理体系运行中常见问题剖析

实验室质量管理是在实际管理工作中,以标准的制定和贯彻等形式,进行计划、组织、协调、实施、监督和控制的过程,是提高实验室管理工作的重要手段。使实验室出具的检测数据、结果科学、准确和具有可比性,以及获得国际上的承认,对于提高社会和政府部门对疾病预防控制中心(以下简称疾控     

2008年深圳市龙岗区医疗卫生单位传染病漏报调查分析

目的了解深圳市龙岗区医疗卫生单位的法定传染病漏报情况,为进一步提高传染病疫情网络报告质量与效率提供理论依据。方法采取抽样调查的方式对深圳市龙岗区辖区内27家医疗卫生单位2008年1～8月诊治的法定传染病进行漏报调查。结果本次共调查传染病638例,漏报17例,总漏报率为2．66％,乙类传染病的漏报率高于丙类,但差异无统计学意义（P〉0．05）;化验室的漏报率高于门诊和住院部（P〈0．05）;民营医院的传染病漏报率高于公立医院（P〈0．05）,且其报告卡及时性及准确性均低于公立医院（P〈0．05）。结论龙岗区不同级别医疗卫生单位的传染病报告与管理工作存在一定差距,民营医疗机构内部的传染病疫情报告与管理机制有待于进一步加强与完善。     

饮用水大肠菌群Taqman-MGB荧光定量PCR检测方法研究

[目的]建立快速、灵敏、特异的饮用水大肠菌群荧光定量PCR定量检测方法.[方法]以大肠菌群的lacZ基因为检测靶基因,设计荧光定量PER引物和Taqman-MGB探针,建立荧光定量PER定量反应体系,并评价荧光定量PER方法的灵敏度、特异性、重复性.[结果]建立大肠菌群的荧光定量PER检测方法.25μl荧光定量PER反应体系主要成分浓度分别为Mg2+5.0 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.2μmol/L,探针0.5μmol/L,4xROX参比荧光染料0.5μl,Taq DNA聚合酶2.0 U,模板5μl.方法可检出每微升单个拷贝大肠菌群模板,方法的特异性、重复性良好.[结论]荧光定量PER方法可快速、灵敏、特异地检出水质中大肠菌群,可为饮用水大肠菌群快速检测标准方法的建立提供参考.     

2007-2009年广东省深圳市龙岗区流感监测分析

目的分析广东省深圳市龙岗区流感监测结果,为制定流感防控策略提供参考。方法对2007-2009年流感样病例的流行病学监测、病原学监测、职业暴露人群人禽流感血清抗体监测、重点人群血清抗体监测等资料进行分析。结果 2007-2009年龙岗区监测流感样病例78 650例,占监测就诊病例总数的7.29%;流感样病例主要集中在0～及5～岁年龄组,占79.92%;全年均有病例发生,主要集中在4-8月,占55.89%;3年间共分离出流感病毒毒株316株,阳性率为16.89%(316/1871);其中季节性流感A型25株、B型60株,甲型H1N1流感183株。3年共发生流感暴发疫情126起,累计发病例数1381例;暴发时间多在6-7月及9-11月,占总暴发疫情数的78.57%,流感暴发疫情主要发生在中、小学校,占80.95%;病原学检测2007年以A型流感病毒(60.00%)为主,2008年以B型流感病毒(57.58%)为主,2009年8月后以甲型H1N1流感病毒(56.96%)为主。结论龙岗区2007-2008年季节性流感发病相对平稳,未发生较大规模的暴发流行,2009年8-11月甲型H1N1流感较为活跃。     

深圳市龙岗区男男性行为者HIV感染状况及其高危行为特征分析

目的了解深圳市龙岗区男男性行为者(MSM)的艾滋病病毒(HIV)感染状况及其高危行为特征,分析HIV感染的影响因素,为在龙岗区MSM中采取针对性的干预措施提供参考依据。方法 2015年1月至2016年12月,在龙岗区MSM聚集场所,采用时间场所抽样(TLS)和"滚雪球"的抽样方式获取样本,并进行单因素和多因素Logistic回归分析,双侧P0.05为检验水准,显示差异有统计学意义。结果共调查研究801人,平均(26.5±4.3)岁,青壮年为主;高中/中专及以上占58.80%。HIV感染率为18.48%(148例),梅毒感染率为16.48%(132例),丙型肝炎病毒感染率为0.37%(3例)。梅毒感染[比值比(OR)=3.44,95%可信区间(CI):1.40~8.46)]、发生肛交(OR=1.86,95%CI:1.07~3.23)是HIV感染的危险因素;肛交时坚持使用安全套(OR=0.34,95%CI:0.17~0.69)是HIV感染的保护因素。结论龙岗区MSM中HIV感染率较高;梅毒感染、发生肛交是导致HIV感染的危险因素。提示应继续强化性病治疗转介服务,提高安全性行为比例,降低MSM艾滋病的发病率。     

地表水中肠道病毒检测结果分析

目的了解某地地表水中EV71、CoxA16等人肠道病毒的污染情况。方法选择某地1个污水处理厂和1条河流(上、下游)作为采样对象,每月采集未经处理的污水和上、下游河水各1份,经过滤、浓缩后进行人肠道病毒核酸检测。结果 36份水样中,肠道病毒检出率为52.77%;其中EV71阳性检出率为44.44%,CoxA16阳性检出率为16.66%,其它肠道病毒的检出率亦高达36.11%。夏季地表水体中的肠道病毒阳性率(100.00%)显著高于其它季节(37.03%)(P<0.00)。污水中各类肠道病毒的检出率与河水中肠道病毒的检出率差异无统计学意义(P>0.05)。地表水中肠道病毒的检出率与当地手足口病、手足口病重症及肠道传染病(甲乙丙类)的发生无相关(P>0.05)。结论地表水中肠道病毒的污染严重,有必要开展进一步的研究了解肠道病毒经水传播的风险。     

氢生理盐水对梗阻性黄疸大鼠肝功能的保护作用

目的研究氢生理盐水对梗阻性黄疸大鼠肝功能的保护作用并探讨其可能机制。方法将雄性SD大鼠随机分为3组(n=14),除假手术组外,均采用双重结扎胆总管造成阻黄模型,不同组大鼠分别给予等量生理盐水和氢生理盐水(5ml/kg,i.p.),10天后检测血清肝功能、内毒素及HMGB1水平,肝组织MDA、HMGB1、TNF-α、IL-1β、IL-6含量及MPO活性,并用光镜观察肝细胞变性、死亡和炎细胞浸润情况。结果胆总管结扎后,对照组大鼠肝功能水平明显降低,血清内毒素、HMGB1及肝组织MDA、HMGB1、TNF-α、IL-1β、IL-6含量及MPO活性明显升高,光镜下肝细胞大量变性坏死伴炎性细胞浸润。氢生理盐水治疗组大鼠肝功能显著好转,各指标明显低于对照组(P0.01)。结论氢生理盐水能显著减轻梗阻性黄疸大鼠肝损伤,并能有效抑制氧化应激及炎性反应。     

预防胰瘘的胰十二指肠切除术式进展

<正>自从1935年Whipple等首次报道胰十二指肠切除术(pancreaticoduodenectomy;PD)以来,该术式已成为治疗胰头和壶腹周围肿瘤最有效的治疗方法。但因该术式费时、复杂,虽经过不断的演变、改良,胰十二指肠切除术手术死亡率仍在5%左右,术后并发症仍高达27%~50%[1-3]。其中胰瘘是最严重、最常见的并发症之一。据Bassi等[4]报道,胰瘘发生率约为9%~29%。胰瘘不仅可引起严重的腹腔感染、败血症、腹腔大出血等一系列严重并发症,显著延长患者     

消毒剂在使用过程中污染菌的调查分析

目的：通过对1995－1999年深圳市龙岗区各级医院及个体诊所使用消毒剂的污染菌情况进行调查，了解消毒剂使用中污染菌的分布情况。方法：相关细菌学分类鉴定方法。结果：5年间我区使用中消毒剂以0．1％新洁尔灭污染最为严重。医院使用中消毒剂污染菌检出率明显低于个体 诊所。共检出3个种属细菌，其中芽孢杆菌占68．57％，球菌占31．43％。结论：我区使用中消毒剂污染较严重，应加强日常消毒监测及基层医疗卫生单位消毒知识的培训力度。