117名RhD阴性个体RHD基因序列分析

目的 研究调查辽宁地区RhD阴性个体的分子机制及RHD基因的多态性.方法 用间接抗球蛋白方法(IAT)确认RhD阴性个体,采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)扩增RHD基因特异性的外显子1～10,测序分析RHD基因全长编码序列;同时用特异性Rh盒子进行RHD基因的纯合性测定.结果 在117名RhD阴性个体中,84例(71.80％)RhD阴性个体完全缺失RHD基因,23例(19.66％)RhD阴性个体携带RHD1227A等位基因,8例(6.84％)携带RHD-CE-(2-9)-D2融合基因,2例(1.71％)携带RHD 711 delC等位基因.完全或部分含有RHD基因的个体均含有RhC抗原.结论 辽宁地区RhD阴性个体的RHD基因具有丰富的多态性和不同的遗传背景,主要以RHD基因完全缺失为主,其次部分缺失和无缺失,并存在其他稀有基因型.     

细小病毒B19的芯片检测方法构建

 目的   运用基因芯片技术构建快速简便检测B19 细小病毒的方法,用于B19 病毒的大规模筛查和早期诊断。方法  利用Oligo6.0和primer5.0 软件分别设计出5 对引物（其中每对引物中的1 个用Cy5 标记）和6 个探针,将探针固定在特制的醛基检测芯片上。分别提取B19 病毒全基因组质粒、患者组血清、正常组血清的DNA,进行不对称扩增,产物与芯片杂交,观察结果;DNA测序验证芯片检测结果的准确性;观察等倍稀释不对称PCR 扩增产物杂交信号的强度变化,检测芯片的灵敏度。结果  电泳结果表明PCR扩增获得的DNA片段和预期表达片段大小一致。芯片杂交结果和DNA测序验证结果完全吻合,芯片杂交信号的强弱会随着DNA浓度的降低而减弱。结论  本研究建立了细小病毒B19的芯片检测方法,该方法并具有较高的灵敏度和特异性。     

一例ABO血型cisAB06亚型的基因序列分析

目的 探讨1例ABO亚型cisAB06的血清学和分子遗传特征.方法 应用单克隆抗体检测1例ABO正反定型不符的患者红细胞ABO抗原,标准A、B、O红细胞检测血清中ABO抗体.用序列特异性引物-聚合酶链反应进行ABO基因分型.用PCR技术特异性扩增A、B基因第6～7外显子,PCR产物纯化后直接测序分析.结果 患者红细胞有A、B抗原,同时血清中存在抗A抗体.聚合酶链反应-序列特异性引物基因分型结果为B/O02型,直接测序结果为cisAB06型,与B101基因序列比对仅在第526位发生G＞C的突变(c.526G＞C),该位点的突变导致176位甘氨酸变成精氨酸(p.R176G).结论 B等位基因c.526G＞C突变形成cisAB06等位基因,其血清学表现为AB型.     

流式磁珠反向杂交法HLA基因分型中磁珠读数减少对结果的影响

目的分析流式磁珠反向杂交法HLA基因分型中磁珠读取数目减少对结果的影响。方法将正常杂交、读取、获得基因分型结果的样本溶液分别按照1∶2、1∶4、1∶8、1∶16的倍数稀释,进行再次读取、判定分型结果。结果所有样本稀释前后每种磁珠的荧光信号反应格局一致,分型结果完全相同。结论读取到的磁珠数目在一定范围内的减少,通过仔细分析,可保证分型结果准确可靠。     

重症监护病房住院患者输血情况调查

通过回顾性分析2003年1月至2005年10月期间所有的重症监护病房住院患者的输血情况。发现输血在不同年龄、不同疾病类型中分布不同,输血与否与输血前的疾病状态、贫血程度、感染与否、肾功能情况有关。     

Duffy血型基因定型及其用于HDN产前诊断的探讨

目的　探讨用分子生物学方法检测血液Duffy血型基因型及该方法应用于HDN产前检查的可行性。方法　采用聚合酶链反应 限制性酶切片短长度多态性 (PCR RFLP)方法检测Duffy基因型。结果　用本研究采用的方法检出了 90例中国辽宁地区汉族血液样品Duffy血型的 3种基因型 ;检测出丈夫为Fy(a+b - )型、本人为Fy(a -b +)型的孕妇羊水样品 1例 ,其Duffy基因型为FYAFYB。结论　本方法可准确检测血液及羊水样品的Duffy基因型 ,可用于Duffy血型不合引起的HDN的产前诊断     

紫外线充氧照射前后红细胞C_(3b)受体花环形成率比较

紫外线充氧照射前后红细胞Ｃ３ｂ受体花环形成率比较１１０００３中国医科大学第二临床学院刘显智孙英任淑华高云霞张正侯笔者对健康献血者静脉抗凝血经紫外线充氧照射处理前后的红细胞Ｃ３ｂ受体花环实验做了比较，报告如下。１材料和方法１．１受检对象健康献血者２５名...     

街头采血初检血型错误原因分析及预防

笔者对本中心2004年以来街头采血车献血者血型初检错误情况进行了调查,分析如下。1对象与方法1.1对象2004年1月~2005年6月本市街头无偿献血者93062人次。1.2试剂与仪器抗-A、抗-B单克隆抗血清(长春生物制品研究所);试剂红细胞(上海市血液中心);YH-5型回旋震荡仪(深圳);KA2200台式离心机(KUBOTA)。1.3血型检测方法初检:玻璃毛细管采集献血者无名指末稍血,纸板法检验。复检:纸板法检验,正定型采用血袋小辫血;反定型采用血样管中血。正反定型不符者,则用试管法继续确证[1]。ABO亚型根据其血型血清学性质进行确定[2]。2结果(表1)表119例初…     

rhSCF、rhGM-CSF对再障骨髓CFU-GM生成作用的体外研究

应用体外集落生成方法，我们对10例再生障碍性贫血（再障）和13例正常对照在体外培养粒－单集落形成单位（CFU-GM）。结果表明：重组人干细胞因子（rhSCF）和重组人粒－单集落刺激因子（rhGM-CSF）均刺激CFU-GM生成，二者联合应用比单独应用rhGM-CSF作用明显增强，但rhSCF单独应用作用很小。