PI3K/Akt信号通路对高糖状态下视网膜Müller细胞的影响

目的探讨PI3K/Akt信号通路对高糖状态下视网膜Müller细胞的影响及机制。方法本实验分两部分,动物实验:雄性SD大鼠随机分成对照组、糖尿病组、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factors-1,IGF-1)组、IGF-1+LY294002(PI3K/Akt信号通路抑制剂)组。后三组采用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)(50 mg·kg^-1)诱导成为糖尿病模型。模型诱导成功后,IGF-1组给予IGF-1 (80 g·L^-1) 5μL玻璃体内注射给药,IGF-1+LY294002组给予5μL(IGF-1+LY294002)(80μg·L^-1)玻璃体内注射给药。细胞实验:对培养的Müller细胞进行不同处理,分为对照组(空白对照)、高糖组(30 mmol·L^-1葡萄糖)、IGF-1组(30 mmol·L^-1葡萄糖+80μg·L^-1 IGF-1)、IGF-1+LY294002组[30 mmol·L^-1...     

采用药效团模型和分子对接方法筛选新型的组蛋白甲基转移酶G9a抑制剂

目的利用药效团模型和分子对接方法对商业化合物库ChemDiv中的G9afocused-libraries进行筛选,希望发现新骨架结构的G9a抑制剂。方法首先,使用Discovery studio 3.1软件分别构建基于配体的药效团模型和基于配体-受体复合物的药效团模型,并根据构建的2个模型再重新定义2个新的药效团模型。然后,构建测试集并测试药效团模型的预测能力。最后,选取最优药效团模型对G9afocused-libraries进行筛选,对筛选出的化合物使用CDOCKER分子对接进行分析与评价。结果测试结果显示,所构建的药效团模型具有一定的预测能力,通过该药效团筛选得到了2个结构新颖的潜在的G9a抑制剂。结论所构建的药效团模型具有一定的可靠性,虚拟筛选发现的G9a抑制剂还需进一步的实验证明。     

小剂量顺铂配合放疗治疗食管癌5O例

目的：探讨超分割放射治疗配合小剂量顺铂对食管癌的治疗价值。方法：100例食管癌患者随机分为2组：顺放组（50例），行超分割放疗配合小剂量顺铂化疗；单放组（50例），行单纯超分割放疗。两组患者均随访5年，观察记录两组患者1、3、5年的生存率、死亡率和毒性反应的发生情况。结果：顺放组1年、3年、5年的生存率均明显高于单放组（P〈0．05）；两组患者的死因均以局部未控或复发为主，但顺放组局部未控和远处转移的死亡率均明显低于单放组（P〈0．05）；两组均无严重毒副作用发生。结论：超分割放疗配合小剂量顺铂化疗治疗食管癌疗效较好，值得临床进一一步研究推广。     

新生儿机械通气撤机失败的影响因素及预测指标分析

目的 探讨导致新生儿机械通气撤机失败的影响因素及寻找预测指标减少撤机失败率.方法 回顾性分析我院2015年1月至2019年12月新生儿重症监护病室350例机械通气时间≥72 h并存活的新生儿.根据撤机48 h内是否再次插管,分为撤机成功组与撤机失败组.比较两组撤机前一般情况、临床变量、呼吸机设置及血气分析,撤机后无创通...     

直接从粪便中检测致犊牛腹泻产肠毒素大肠杆菌的双重PCR方法的建立与应用

目的产肠毒素大肠杆菌(Enterototxigenic,Escherichia Coli,ETEC)是造成人和动物腹泻的主要病原之一,也是造成新生乳用犊牛腹泻的主要原因,一株ETEC可能产生一种或者多种肠毒素。根据产肠毒素大肠杆菌产生的两种主要毒素的基因序列,设计了两对引物,建立多重PCR方法。该方法仅用4.5小时即可检测出导致犊牛腹泻的产肠毒素大肠杆菌菌株,具有敏感度高、特异性强和检测速度快等特点。本试验的目的是用所建立的多重PCR方法来确定ETEC在导致犊牛腹泻中的作用。采用该方法对乳用犊牛的203个腹泻样品进行了检测,结果,用传统的分离培养方法得到的203株典型大肠杆菌中有135株为ETEC;其中LT阳性为105株,ST阳性为126株,LT+ST阳性的为96株,阳性率为66.5%。而采用直接从粪样中提取PCR模板的方法进行PCR,检测到146个犊牛粪样为ETEC阳性,其中LT阳性为112株,ST阳性为137株,LT+ST阳性为103株,阳性率为71.9%,明显高于传统的检测方法;并且所检测到的146个ETEC阳性的犊牛粪样完全包含用传统的分离培养方法得到的135个阳性粪样,且基因分型结果相同。     

抑制JAK/STAT信号通路对糖尿病早期大鼠视网膜Müller细胞的保护作用及对谷氨酸转运蛋白表达的影响

目的　探讨JAK/STAT信号通路对糖尿病早期大鼠视网膜Müller细胞及对谷氨酸转运蛋白（glutamate transporter，GLAST）表达的影响。方法　雄性SD大鼠30只，随机分成对照组、糖尿病组、AG490组，每组10只。后两组大鼠采用单次腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin，STZ） 50 mg·kg^-1诱导糖尿病模型。模型诱导成功后，AG490组给予AG490 10 μL（17 mmol·L^-1）玻璃体内注射给药。注射1个月后，利用试剂盒检测3组大鼠视网膜中谷氨酸含量变化，免疫荧光检测视网膜GLAST表达，免疫组织化学检测视网膜p-JAK2表达，Western blot检测视网膜GLAST、p-JAK2及p-STAT3蛋白相对表达量。结果　与对照组GLAST相对表达量（65.35±0.66）%、p-JAK2相对表达量（32.80±0.40）%、p-STAT3相对表达量（17.62±1.09）%、谷氨酸含量（23.93±0.67）μmol·g^-1相比，糖尿病组视网膜p-JAK2相对表达量（52.16±0.62）%、p-STAT3相对表达量（47.41±0.95）%及谷氨酸含量（44.88±0.27）μmol·g^-1均明显增加，GLAST相对表达量（32.96±0.64）%明显下降（均为P<0.01）；而与糖尿病组相比，AG490组p-JAK2相对表达量（13.67±0.45）%、p-STAT3相对表达量（14.47±0.25）%及谷氨酸含量（25.18±0.66） μmol·g^-1均明显降低，GLAST相对表达量（49.48±0.32）%明显增加（均为P<0.01）。结论　糖尿病早期大鼠视网膜GLAST表达明显降低，抑制JAK/STAT通路的活化可上调视网膜GLAST表达，降低视网膜谷氨酸含量，这可能有助于减轻糖尿病状态下视网膜Müller细胞的损伤。