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目的 探究新城疫病毒(NDV)感染食管癌ECA109细胞后,NLRP3炎性小体是否激活、其激活是否与K+外排有关及ATP/P2X7轴对NLRP3炎性小体激活的影响。方法 Western blot检测NLRP3和IL-1β表达情况;ELISA检测上清液中IL-1β含量;荧光免疫技术检测ASC斑点的形成情况;荧光探针技术检测细胞内K+浓度变化;使用ATP酶、ATP及P2X7受体抑制剂进行干预,研究其在NLRP3炎性小体激活中的作用。结果 与control组比较,NDV F3感染细胞后,细胞内NLRP3、IL-1β和ASC蛋白表达上调;胞内钾离子浓度随感染时间延长而降低(P<0.05)。P2X7受体抑制剂干预后,胞内K+外流受阻,随抑制剂浓度的增加,K+外流在10 mol/L处受最大抑制(P<0.05)。ATP酶及ATP干预结果显示,ATP酶抑制K+外流,ATP促进K+外流。Western blot结果显示,与control组比较,抑制P2X7受体,... 相似文献
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GRP78存在于人体内质网中,并参与蛋白质成熟、装配、折叠等重要生物学过程。当细胞受到内部或外界刺激时,内质网腔中未折叠和错误折叠的蛋白质会大量聚集造成内质网应激,细胞则通过未折叠蛋白应答(UPR)来缓解这种应激状态,以恢复内质网稳定。这种情况同样会发生在肿瘤细胞中,在肿瘤细胞的内质网处于应激状态时,会伴有过度增殖、缺血、缺氧、代谢异常等一系列反应,此时GRP78会被激活来缓解内质网腔内压力。但实际上过多的GRP78会带来抑制凋亡、产生耐药性等负面作用。本文主要对GRP78与肿瘤内质网之间的关系展开综述。 相似文献
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摘要:目的 探讨新城疫病毒(NDV)在感染宫颈癌HeLa细胞过程中,是否通过影响细胞微丝骨架对细胞增殖、迁移和侵袭具有抑制作用。方法 将宫颈癌HeLa细胞分为对照组、新城疫病毒感染组(NDV F3组)和细胞松弛素D组(Cytochalasin D组)。通过光学倒置显微镜观察NDV F3感染后的细胞形态变化及微丝骨架结构变化;综合利用CCK-8、TUNEL凋亡检测及Hoechst33258染色检测细胞的增殖和凋亡情况;划痕实验和Transwell实验分别观察NDV F3对细胞的迁移和侵袭能力的影响;Western blot检测NDV F3作用细胞后微丝骨架相关蛋白F-肌动蛋白(F-actin)、RhoA和Rho激酶(ROCK)2的表达情况。结果 NDV F3作用细胞后,细胞失去正常形态,部分细胞有融合现象,随着感染时间的增加,细胞变圆、脱落、细胞破裂,贴壁细胞剩余较少;CCK-8结果显示细胞增殖率下降;TUNEL检测和Hoechst33258染色显示细胞在NDV F3的作用下发生凋亡,并且在感染复数(MOI)为0.1时凋亡更为显著;划痕实验和Transwell实验显示NDV F3对细胞的迁移和侵袭能力均有阻碍作用,划痕实验在24 h与48 h时,NDV F3组、Cytochalasin D组与对照组相比迁移率均下降,在48 h时最为显著(P<0.01),Transwell实验显示细胞侵袭数NDV F3组和Cytochalasin D组与对照组相比数量明显减少(P<0.01);Western blot结果显示F-actin、RhoA和ROCK2在作用36 h和48 h时表达量较对照组降低(P<0.01)。结论 NDV F3对HeLa细胞的增殖、侵袭、迁移均有抑制作用,其机制可能与微丝骨架相关的RhoA/ROCK信号通路有关。 相似文献
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0 引言
近年来,应用溶瘤病毒抗肿瘤逐渐成为研究热点,如新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)、腮腺炎病毒、麻疹病毒等.NDV隶属副粘病毒科副粘病毒亚科的副粘病毒属,为不分节段的单股负链RNA病毒.NDV基因组编码6个结构蛋白:核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,NP)、磷蛋白(phospho protein,P)、基质蛋白(matrix protein,M)、融合蛋白(fusion protein,F)、血凝素神经氨酸酶(haemagglutinin neuraminidase,HN)和大聚合酶蛋白(large polymerase protein,L);编码这些蛋白的基因按3'-NP-P-M-F-HN-L-5'的顺序依次排列,其中主要由F基因决定NDV的毒力.许多学者研究证明,NDV能够特异地杀伤肿瘤细胞,而对人类正常细胞没有杀伤作用,也有学者探讨了NDV与其他抗瘤方法的协同作用,现主要就此方面的研究综述如下. 相似文献
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目的: 研究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)弱毒力株HBNU/LSRC/F3对人食管癌ECA109细胞凋亡的影响,并与其他两株NDV(弱毒力株LaSota株、中等毒力Mukteswar株)的抗肿瘤作用进行比较。 方法: 体外培养ECA109细胞,不同NDV经扩增后分别感染ECA109细胞,CCK-8法检测各NDV对ECA109细胞增殖的抑制作用,激光共聚焦显微镜观察经各NDV感染后ECA109细胞的凋亡情况,流式细胞术检测其早期细胞凋亡,DNA琼脂糖凝胶电泳检测其晚期凋亡情况。 结果: HBNU/LSRC/F3株NDV能抑制ECA109细胞的增殖,且强于LaSota株,但稍弱于Mukteswar株(P<0.05)。ECA109细胞感染5×10-4Hu/ml NDV时,HBNU/LSRC/F3株、Mukteswar株、LaSota株对ECA109细胞的增殖抑制率分别为(31.43±157)%、(39.87±1.99)%和(19.89±0.99)%。流式细胞仪检测结果显示,HBNU/LSRC/F3株感染后ECA109细胞的早期凋亡率为(21.32±0.44)%,而Mukteswar株和LaSota株的早期凋亡率为(22.27±0.23)%和(14.32±0.61)%;激光扫描共聚焦显微镜和DNA琼脂糖凝胶电泳检测结果显示,Mukteswar株以诱导晚期凋亡为主,HBNU/LSRC/F3株以诱导ECA109细胞早期凋亡为主,且较LaSota株明显。 结论: 弱毒力HBNU/LSRC/F3株可有效抑制ECA109细胞增殖,诱导ECA109细胞早期凋亡,虽略低于中等毒力Mukteswar株,但远高于弱毒力LaSota株,因此HBNU/LSRC/F3株可能具有更高的抗肿瘤临床应用价值。 相似文献
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目的:了解慢性前列腺炎患者的主要病原体感染情况,探讨其病因学特点。方法:对105例尿道炎后慢性前列腺炎患者行中段尿(VB2)及前列腺按摩液(EPS)的病原体检测并进行结果分析。结果:VB2细菌培养阳性68例(64.8%),其中以表皮葡萄球菌为主要致病菌30例,淋球菌12例,埃希菌9例,解脲脲原体(UU)培养阳性18例(17.1%);EPS细菌培养阳性79例(75.5%),其中表皮葡萄球菌27例,淋球菌13例,埃希菌7例,UU培养阳性21例(20.0%);EPS经PCR检测UU阳性23例(21.9%),沙眼衣原体(CT)阳性29例(27.6%)。同时经PCR检测出复合感染者19例(18.1%)。结论:慢性前列腺炎患者感染主要以表皮葡萄球菌、淋球菌、埃希菌、UU及CT为主。 相似文献
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目的 :观察NDV在体外抗胃癌细胞活性 ,研究NDV感染诱导胃癌细胞热休克蛋白 70 (HSP70 )的表达及其意义。方法 :应用倒置显微镜观察细胞形态 ,MTT法测细胞生长抑制状况 ,血凝试验检测NDV在细胞中的增殖状况 ,免疫组化染色观察细胞中HSP70表达情况 ,流式细胞术检测胃癌细胞HSP70的表达。结果 :NDV在体外可使BGC 82 3胃癌细胞形成明显的细胞病变效应及生长抑制作用 ,且这种抑制作用与肿瘤细胞被NDV感染后HSP70表达增加呈正相关。结论 :NDV的抗BGC 82 3胃癌细胞活性显著 ,其杀伤机制之一为通过感染而诱导BGC 82 3产生过多的HSP70。 相似文献
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新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)为反义负链RNA病毒,能选择性的杀伤人类肿瘤细胞。应用NDV免疫肿瘤细胞进行各种体内外实验研究,均有不同程度的抗肿瘤效应。用NDV对癌症病人进行临床治疗则可延长肿瘤病人的存活期,肿瘤复发率较低。作用机制包括其直接对肿瘤细胞产生细胞毒作用;增强机体的各种细胞及体液免疫;诱导多种细胞因子的产生。其中T细胞的杀肿瘤作用增强及活化巨噬细胞数量增加是主要的抗瘤因素。 相似文献