从肝治心方对急性心肌梗死大鼠多器官血管内皮生长因子表达的影响

目的：探讨从肝治心方（CGZXP）对急性心肌梗死（AMI）大鼠多器官血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法：大鼠AMI造模后分为CGZXP组和生理盐水（NS）组．每组分为3天、7天、14天、21天4个时间点。分别制备血浆及不同部位组织蛋白；制备含药血清，分为CGZXP高、中、低剂量和NS组ELISA法检测以上血清、血浆及组织中VEGF含量。结果：各组含药血清及AMI大鼠血浆、肺、脾组织中均无或仅有微量VEGF表达；模型组各时间点心、肝、肾、大脑组织均可检测到VEGF分泌，其中梗死边界心肌VEGF含量高于梗死中心区；CGZXP组除AM17天梗死中心、AM13天肝脏VEGF无明显表达外，心、肝、肾、大脑各时间点均可见VEGF显著上调，较NS组差异有显著性（P〈0．01）。结论：CGZXP可上调AMI大鼠缺血心肌VEGF蛋白表达，还能同时促进AMI后肾、脑、肝多器官组织不同程度分泌VEGF，可能对AMI后多器官缺血应激损伤有一定保护作用。     

以药测证绘制肾虚证两大基因网络调控路线图谱

目的 研究肾虚证基因网络调控的路线和规律.方法 选择青年组（4月龄）、老年组（24月龄）、淫羊藿总黄酮（Epimedium Flavonoids,EF）治疗组SD大鼠,取全面反映肾虚的7个组织下丘脑、垂体、肾上腺、淋巴细胞、骨骼、肝脏、肾脏,采用Affymetrix公司的大鼠全基因组芯片再次重复肾虚证基因表达谱差异研究.结果 老年大鼠下丘脑、垂体、肾上腺（HPA轴）显示神经递质γ氨基丁酸（GABA）,促性腺激素释放激素（GnRH）,促甲状腺激素释放激素（TRH）与促甲状腺激素（TSH）,生长激素释放激素受体（GHRH）、胰岛素样生长因子及结合蛋白（IGF、IGFBP）;淋巴细胞显示与细胞生长相关的生长因子相关蛋白（GFRP）,与免疫调节相关的IFNγ、IL-4、IL-6等;骨骼显示甲状旁腺（PTH）、降钙素（calcitonin）与骨基质相关的前胶原、胶原、结缔组织生长因子等;肝脏显示氧化磷酸化相关的细胞色素Cytochrome P450、NADH脱氢酶,与蛋白质代谢相关的谷氨酸脱氢酶（Glutamate dehydrogenase）,与糖代谢相关的葡萄糖-6-磷酸酶（G-6-Phosphatase）均为低表达.EF作用后,可见老年大鼠7个标本低表达的基因几乎全部上调,此外还有大量与衰老机理相关的基因明显上调.包括HPA轴的神经递质如GABA,激素如GnRH,细胞周期相关基因如CyclinB,免疫调节相关基因如NF-κB105;淋巴细胞与生长调节相关的基因如GFRP,免疫调节相关的基因如IFNγ;骨骼的甲状旁腺、降钙素、IGF、前胶原、胶原、GnRH、Progesterone等;肝脏的大量代谢相关的基因如Cytochrome P450、NADH脱氢酶;肾脏的代谢相关基因及钠、氯通道等基因.结论 通过以药测证,发现肾虚证大鼠模型存在神经-内分泌-免疫以及神经-内分泌-骨代谢两大基因调控路线的紊乱,补肾能纠正该网络功能低下.     

从肺论治顽固性消化性溃疡92例

消化性溃疡属中医“胃脘痛”、“嘈杂”、“吞酸”等范畴,现国有标准《中医诊疗术语》统一命名为“胃疡”。顽固性消化性溃疡是指十二指肠溃疡（ＤＵ）经８周,胃溃疡（ＧＵ）经１２周治疗而未痊愈者（１）。笔者从１９９６年１１月至１９９７年１１月运用王行宽教授经验...     

从肝治心组方对实验性心肌梗死大鼠心肌血管新生的影响

目的观察从肝治心组方(CGZXP)对急性心肌梗死大鼠心肌微血管密度和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的影响.方法复制大鼠急性心肌梗死模型,分别设CGZXP组、生理盐水(NS)组,7d及14d后分别取材(梗死与非梗死区交界处、梗死中心区心肌组织),用碱性磷酸酶(ALP)组织化学和免疫组织化学法,LEICAQ550CW图像分析系统分析缺血心肌微血管密度、VEGF蛋白表达情况,同时比较用药前后心肌梗死面积的变化.结果CGZXP组7d、14d单位面积微血管密度、VEGF蛋白表达均较NS组明显增加(P＜0.01),并能相应减少心肌梗死的面积,对梗死中心区心肌的血管生成作用弱于梗死与非梗死交界部位.结论本研究初步证实CGZXP能促进实验性心肌梗死大鼠缺血心肌微血管生成,缩小心肌梗死面积;CGZXP对VEGF表达的上调可能是其血管生成的作用机制之一.     

胆囊切除术患者经胆囊管内镜行胆总管探查12例分析

自2002年6月至2003年7月对12例胆囊切除术患者行术中经胆囊管用纤维胆道镜(简称纤胆镜)行胆总管探查及取石术,获满意效果,报告如下。     

心肌缺血再灌注损伤的钙信号调节

目的：综合分析钙离子的调节机制及钙超载与心肌缺血再灌注损伤的关系。资料来源：应用计算机检索Pubmed 1994-01／2004-01有关钙离子的调节机制及钙超载与心肌缺血再灌注损伤关系的文献，检索词“myocardial ischemia／repemsion iniury，calcium overload”，并限定文章语言种类为English：同时计算机检索CNKI数据库1996-01／2004—04有关钙离子的调节机制及钙超载与心肌缺血再灌注损伤关系的文献，检索词“心肌缺血，再灌注损伤，钙超载”，限定文章语言种类为中文。 资料选择：对检索到的钙离子调节机制及钙超载与心肌缺血再灌注损伤关系的相关信息进行整理，选取针对性强的文章，同一领域的文献则选择近期发表或权威杂志的文章。 资料提炼：共检索到154篇相关文献，其中18篇文章符合要求。 资料综合：①胞内钙离子浓度维持在一定范围时，细胞维持正常生理功能。当钙离子浓度升高，会发生一系列生理、生化反应，如细胞结构的损伤、凋亡、死亡和细胞的退行性改变等。②心肌缺血再灌注损伤与能量代谢障碍、氧自由基产生、钙超载等因素有关，但钙超载在缺血再灌注损伤中起极其重要的作用。 结论：调节细胞内钙离子的动态平衡对维持细胞正常的生理功能和信息传递十分重要。钙超载是心肌缺血再灌注不可逆损伤的最后通路，但其具体作用途径有待于进一步研究。     

应用核磁共振代谢组技术研究生理性肾虚证

目的 观察生理性肾虚过程中尿液代谢物的特征性变化,以及补肾中药淫羊藿总黄酮(EF)的干预作用.方法 收集4、10、18、24月龄组和EF干预组SD大鼠的尿液进行1H核磁共振检测,分别采用T2检验和趋势过滤法筛选生理性肾虚证的特征性代谢物,同时观察EF对这些代谢物的影响.结果 筛选了34个与生理性肾虚证密切相关的谱峰,并鉴定了13个代谢物;发现生理性肾虚进程中存在明显的代谢差异,EF能明显地改变生理性肾虚进程中的代谢物轨迹.结论 生理性肾虚证是和多个代谢途径相关,补肾可能改善了部分代谢途径,代谢组学技术为生理性肾虚证的研究提供了新的手段和方法.     

从整体论到系统生物学进行肾虚和衰老的研究

中医学对世界医学的贡献之一就是整体观,我们从整体观出发研究了肾阳虚证与下丘脑－垂体－靶腺轴功能紊乱的联系;采用基因芯片技术研究老年大鼠（肾虚证）及中药干预后下丘脑－垂体－肾上腺－胸腺（HPAT）轴的分子网络调控规律;通过基因芯片也揭示存在于老年大鼠下丘脑、垂体、肾上腺、淋巴细胞、骨骼、肝脏、肾脏等与“肾”相关组织的神经－内分泌－免疫以及神经－内分泌－骨代谢两大基因网络路线,从而推进“证”的整体性研究。近年按照系统生物学的动态、干预、多层面整合的要求,在全基因组转录水平、代谢组和单个衰老相关信号通路3个不同层面揭示衰老在不同层面的共同规律;揭示出基因的时空关联随着衰老进程逐渐弱化;并且中药淫羊藿总黄酮能有效改善衰老在上述两方面的系统改变。因此从整体观到系统生物学的转变可能促进中医学进入现代生命科学领域。     

基于基因表达谱数据建立肾虚证量化数学模型

目的 利用基因表达谱数据,建立量化肾虚证程度的数学模型。方法 采用4、10、18、24月龄SD大鼠,以24月龄大鼠加淫羊藿总黄酮（EF）干预,摘取大鼠下丘脑、垂体、肾上腺、淋巴细胞、骨、肝、肾、脾,利用基因芯片技术,检测全基因组mRNA表达,用不同月龄大鼠的基因表达谱数据建立神经网络模型,然后用此模型评价EF干预肾虚证的效果。结果 7个组织共筛选到199个基因表达具年龄依赖特征,其中相当一部分为神经内分泌免疫相关基因。模型预判发现EF作用后,24月龄老龄大鼠下丘脑 、垂体、肾上腺、肝、肾、骨、脾的基因表达与8～13月龄大鼠相似,分别为12．64、10．87、8．10、12．70、11．93、13．14、10．13月龄。结论 基于基因表达谱数据能建立量化肾虚证程度的模型,并能预测补肾药的效果,研究也表明EF能使老年状态基因表达向年轻化靠近,提示其具有改善肾虚、延缓衰老的作用.     

心肌缺血损伤小型猪模型内关穴位埋针后血管新生及成纤维细胞生长因子mRNA和蛋白的表达

背景：血管生成及成纤维细胞生长因子与心肌缺血损伤后修复关系密切,针刺内关防治心肌缺血损伤的机制是否与此有关尚不清楚。 目的：观察内关穴位埋针对心肌缺血损伤小型猪血管新生及成纤维细胞生长因子基因和蛋白表达的影响。 方法：将32只小型猪随机分为4组,采用左冠状动脉前降支结扎法建立心肌缺血模型,假手术组穿线但不结扎,内关组和膈俞组分别在造模的基础上进行内关、膈俞穴埋针治疗,模型组和假手术组不进行任何干预。 结果与结论：免疫组织化学染色显示小型猪经冠脉结扎后心肌毛细血管密度降低(P < 0.01),内关、膈俞穴埋针治疗7 d,损伤心肌组织毛细血管密度增加(P < 0.05或P < 0.01),内关组优于膈俞组(P < 0.05);Real time PCR和Western blot检测显示小型猪经冠脉结扎后心肌组织成纤维细胞生长因子mRNA和蛋白表达量显著增高(P < 0.05或P < 0.01),内关和膈俞穴位埋针治疗均可上调成纤维细胞生长因子mRNA和蛋白表达量,以内关埋针效果最明显(P < 0.05)。揭示内关、膈俞穴位埋针均可通过上调成纤维细胞生长因子mRNA和蛋白的表达,增加心肌毛细血管密度,改善缺血心肌的损伤,且内关优于膈俞。