间接ELISA法测定转基因小鼠血清中核糖核酸酶抑制因子的表达

[目的]建立间接ELISA法测定血清中核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)含量的方法,并测定在转RI基因小鼠血清中RI的表达情况。[方法]用血清样品包被酶标板,兔抗人RI抗体为一抗,辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG为二抗,建立血清RI定量检测的间接ELISA法;取转染了RI基因的小鼠的血清,用上述建立的间接ELISA法测定不同时相小鼠血清中RI的表达水平。[结果]定量检测血清RI的间接ELISA法最适反应条件为一抗最佳稀释度为1∶4000,二抗的最佳稀释浓度为1∶2000。转基因小鼠第2、3周血清中RI含量较低(0.556±0.080),1个月左右达到最高值(0.836±0.113),3个月时明显下降(0.640±0.100)。[结论]间接ELISA法可以用于测定血清中的RI抗原含量。     

龟甲提取物干扰NF-κB-NLRP3炎症体正反馈回路改善老年性骨质疏松的研究

目的：探讨龟甲提取物对NF-κB-NLRP3炎症体正反馈回路的调节作用及改善老年性骨质疏松的起效机制。方法：超高效液相联用质谱技术完成龟甲水提液中有效成分的鉴定。体外实验中,TRAP染色法检测龟甲提取物对骨髓源性巨噬细胞破骨分化的影响,使用NF-κB信号通路激动剂与抑制剂验证龟甲提取物对NF-κB信号通路的影响,使用NLRP3炎症体激动剂与抑制剂验证龟甲提取物对NLRP3炎症体活性的影响,RT-qPCR检测Nfatc1、Ctsk基因的表达量,Western Blot法检测p50、p-p50、NLRP3、IL-1β、pro-IL-1β的表达量。体内实验中,将6只3月龄C57BL/6小鼠作为对照组,12只22月龄自然衰老小鼠随机分为老年性骨质疏松模型组、龟甲提取物干预组,每组6只,连续干预8周。结果：筛选出龟甲水提液有效成分肉豆蔻酸。体外实验：与对照组比较,肉豆蔻酸显著抑制破骨分化（P<0.01）,Nfatc1、Ctsk基因的表达量被显著抑制（P<0.05,P<0.01）,p-p50、NLRP3、IL-1β、pro-IL-1β的表达量显著下调（P<0.01）。体内实...     

停循环动物模型研究进展

急性主动脉夹层(acute aortic dissection,AAD)是一种病情凶险且病死率较高的血管疾病,亦是较常见的致死性主动脉疾病,具有发病急、进展快和预后差的特点^[1-2]。目前,AAD较有效的治疗方法仍然是外科手术,既往该手术多在深度低温停循环(deep hypothermic circulatory arrest,DHCA)下进行。在DHCA下可行无血视野手术,避免或减少因停循环引起的重要器官缺血和缺氧^[3]。     

心内粘液瘤切除术后中期疗效观察

目的 探讨心内粘液瘤切除术的中期疗效。方法 回顾性分析北部战区总医院心血管外科自2011年6月至2015年6月收治的146例行心内粘液瘤切除术的粘液瘤患者临床资料,其中,124例(84.9%)粘液瘤原发点位于左心房,16例(11.0%)粘液瘤原发点位于右心房,5例(3.4%)粘液瘤原发点位于右心室,1例(0.7%)粘液瘤原发点位于左心室。患者主要临床症状为呼吸困难,术前均行心脏超声检查,且经术后病理检查明确为粘液瘤。所有患者经胸骨正中开胸行外科手术治疗。结果 患者无院内死亡(成功率100.0%)。1例患者因术后愈合不良行二次清创缝合术。术后定期复查和随访,最终随访132例(随访率90.4%)。随访患者1、3年的术后累积生存率分别为99.3%、97.8%。存活患者美国纽约心脏病学会心功能分级为Ⅰ～Ⅱ级。结论 粘液瘤因附着部位不同可引起心力衰竭或动脉栓塞,应尽快手术切除。外科手术切除的安全性较高,术后应定期随访,常规复查超声心动图。     

养血解毒方对银屑病角质形成细胞紧密连接的调节作用

目的:观察银屑病样小鼠皮损紧密连接蛋白中水闸蛋白(claduin-1,claudin-7),闭锁蛋白(occludin)的表达,明确养血解毒方对银屑病表皮通透屏障的修复作用,为养血解毒方治疗银屑病提供科学依据。方法:将C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、甲氨喋呤组、养血解毒方组,制备甲氨喋呤溶液、养血解毒方水煎剂对应灌胃干预,同时小鼠背部剃毛后给予咪喹莫特涂抹诱导银屑病样皮损模型。每日拍照记录皮损形态并对严重程度指数(PASI)评分;水油测试笔检测皮损表皮含水量;苏木素-伊红(HE)染色观察其病理改变、测量表皮厚度;免疫荧光法检测增殖相关的核抗原(Ki67);免疫组化法检测表皮兜甲蛋白(loricrin),真皮中CD3^+T淋巴细胞浸润和紧密连接蛋白claduin-1,claudin-7,occludin的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测皮损中claudin-7,occludin的表达。模拟银屑病皮损微环境,建立白细胞介素-17(IL-17,1 mg·L^-1)刺激的角质形成细胞(Hacat)模型,制作养血组分、解毒组分、养血解毒方喷干粉进行干预。采用细胞增殖毒性检测试剂盒-8(CCK-8)法检测药物对Hacat细胞的毒性;细胞免疫荧光法检测药物对角质形成细胞claudin-1,claudin-7,occludin表达的干预作用。结果:与模型组比较,养血解毒方可显著减轻小鼠银屑病样皮损表现,降低PASI评分及皮损表皮厚度(P<0.01),增加皮损区表皮水分含量(P<0.01),减少表皮ki67,loricrin的异常表达和真皮CD3+T细胞浸润(P<0.01),并增加紧密连接蛋白claudin-1,claudin-7,occludin的表达(P<0.05),增加紧密连接结构的完整性;体外研究发现,与模型组比较,养血解毒方组和养血组分组明显升高紧密连接蛋白claudin-1,claudin-7,occludin的表达(P<0.05);与模型组比较,解毒组分组蛋白表达水平无统计学差异。结论:养血解毒方通过调节角质形成细胞间紧密连接的表达抑制其异常的增殖分化过程,进一步恢复破坏的表皮通透屏障,可能是其治疗银屑病的作用机制之一。其中养血解毒方的养血组分对调节紧密连接的修复起主要作用。     

经尿道前列腺钬激光剜除术治疗良性前列腺增生的疗效评估

目的 探讨经尿道前列腺钬激光剜除术对良性前列腺增生患者前列腺功能、尿动力学及性功能指标的影响。方法 选取2018年1月至2022年9月南京医科大学附属泰州人民医院收治的良性前列腺增生患者130例,应用随机数字表法分为对照组（65例,行经尿道前列腺等离子电切术治疗）、观察组（65例,行经尿道前列腺钬激光剜除术治疗）,均于术后随访6个月。比较两组患者围术期指标,术前与术后6个月前列腺功能、尿动力学,以及术后6个月性功能障碍发生情况。结果 与对照组比,观察组患者术中出血量较少,膀胱冲洗时间、手术时间、留置导尿管时间均较短;与术前相比,术后6个月两组患者国际前列腺症状评分表（IPSS）评分及血清总前列腺特异性抗原（t-PSA）、游离前列腺特异性抗原（f-PSA）水平均降低,观察组低于对照组;与术前比,术后6个月两组患者最大尿流率（Qmax）、膀胱顺应性（BC）均升高,观察组高于对照组;两组患者排尿后残余尿量（PVR）降低,观察组低于对照组;术后6个月观察组患者勃起障碍、逆行射精、射精量减少发生率均低于对照组（均P<0.05）。结论 相较于经尿道前列腺等离子电切术,良性前列腺增生患者应用经...     

离断尿道板一期尿道成形术后并发症的多因素分析

目的通过多因素分析离断尿道板一期尿道成形术后并发症的临床特点, 为离断尿道板一期尿道成形术后并发症的防治提供思路。方法回顾性分析2020年12月至2021年12月本院收治的325例行离断尿道板一期尿道成形术患者的临床资料, 其中采用Duckett术式201例(61.8%)、Duckett+Duplay术式90例(27.7%)、改良Koyanagi术式34例(10.5%), 根据术后有无并发症将患者分为并发症组(82例)及无并发症组(243例)。术后随访12～60周, 总结临床诊治特点, 采用多因素logistic回归分析尿道成形术后并发症的影响因素。结果术后并发症组患者中出现尿道瘘33例(40.2%), 尿道狭窄28例(34.1%), 尿道憩室7例(8.5%), 伤口感染14例(17.1%)。无并发症组与并发症组的年龄、尿道下裂分型、阴茎下弯程度、尿道长度、居住地区、术后照护人身份、照护人学历、是否留守儿童、手术者手术量级、龟头宽度、是否合并前列腺囊、是否低出生体重、是否早产、C反应蛋白(CRP)比较, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。术后第1天CRP预测术后并发症发生的最...     

模拟长航时飞行对骨盆周围肌肉肌电活动和下背部主观疼痛等级的影响

目的 研究模拟长航时飞行对受试者骨盆周围肌肉肌电活动和下背部主观疼痛等级的影响,探讨肌肉功能失衡是否为引起下背痛的原因,为改善相关肌肉功能预防和治疗长航时飞行引发的下背痛问题提供理论依据.方法 16名男性受试者分为2组,对照组8人,未经历过下背痛;背痛组8人,有或曾经有过3个月以上下背痛史.受试者完成4h模拟长航时飞行...     

糖尿病急性ST段抬高心肌梗死应用雷帕霉素药物洗脱支架1年随访分析

目的探讨雷帕霉素药物洗脱支架在糖尿病急性ST段抬高心肌梗死(STEMI)患者急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)中应用的安全性和有效性。方法选择2002年11月至2005年10月间首都医科大学附属北京朝阳医院心脏中心收治的糖尿病急性STEMI患者106例,于发病12h内行急诊PCI治疗,置入雷帕霉素药物洗脱支架。记录术后1个月和12个月随访终点时的心血管事件发生率、支架内血栓发生率及支架内再狭窄发生率。结果105例患者急诊PCI治疗获得成功。106支梗塞相关血管(IRA)的110处罪犯病变处置入雷帕霉素药物洗脱支架134枚,未发生与介入治疗有关的并发症。1个月随访终点时死亡4例(3.77%),发生急性心肌梗死1例,心血管事件总发生率为4.72%;发生支架内血栓1例;血运重建1例。12个月随访终点时除1个月时死亡的4例外未再发生死亡病例,共发生心血管事件11例(10.38%),发生支架内血栓2例(1.89%),52例接受冠状动脉造影复查患者中发生支架内再狭窄6例(11.54%)。结论雷帕霉素药物洗脱支架在STEMI急诊PCI中应用有较高的安全性和有效性,并可以明显降低再狭窄率。     

急性心肌梗死患者急诊介入治疗联用替罗非班出血情况分析

目的:分析急性ST段抬高心肌梗死患者急诊直接经皮冠状动脉介入治疗(PCI)联合应用血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂替罗非班时出血并发症的发生情况,探讨发生心肌梗死溶栓治疗临床试验(TIMI)出血事件的相关影响因素。方法:2005年4月至2006年3月,150例急性ST段抬高心肌梗死患者行直接PCI时应用替罗非班,平均年龄57.8±9.6(35～78)岁,男性116例。分析出血并发症发生情况,根据住院期间出血事件是否达到TIMI出血标准将所有患者分为TIMI出血组(n=10)和非TIMI出血组(n=140),分析两组的相关临床和介入治疗情况,以及出血事件对近期临床预后的影响,探讨应用替罗非班发生TIMI出血事件的相关影响因素。结果:在TIMI出血组中,达到轻、重度出血标准的患者分别占总病例的4.7%和2.0%。住院期间随访发现,发生TIMI轻重度出血的患者住院期间死亡/再梗联合事件发生率明显高于非TIMI出血组(分别为40%和3.6%,P<0.01),住院时间延长(P<0.01)。单因素分析显示,发生TIMI出血事件的患者中,女性比率,补救性应用替罗非班比率和术后即刻的活化部分凝血酶原时间较高(P<0.05)。Logistic多因素回归分析提示术后即刻的活化部分凝血酶原时间是急诊PCI治疗应用替罗非班发生TIMI出血事件的独立预测指标(P=0.013,OR=1.458)。结论:急性ST段抬高心肌梗死急诊介入治疗时,联合应用替罗非班存在一定的出血发生率,发生TIMI轻重度出血的患者近期预后不良。较高的活化部分凝血酶原时间是应用替罗非班发生TIMI出血事件的独立危险因素。