弓形虫病核酸疫苗研究进展

弓形虫病是一种由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)引起的人兽共患机会性寄生虫病，对人类健康和畜牧业生产造成威胁。疫苗是防治弓形虫病有效手段之一。弓形虫病疫苗研制经历了下列发展阶段：1．全虫疫苗，包括死疫苗、弱毒活疫苗和减毒活疫苗；2．虫体特异组分疫苗；3．基因工程疫苗；4．核酸疫苗。     

IL-12对伯氏疟原虫红内期感染小鼠Th1/Th2细胞因子表达水平的影响

目的观察白细胞介素12 (IL-12) 对伯氏疟原虫(P.b)红内期感染小鼠Th1/Th2细胞因子表达水平的影响,探讨IL-12介导Th1/Th2免疫偏移在抗P.b红内期感染中的免疫调节作用.方法 BALB/c小鼠接种5×105个感染P.b的红细胞,同时分别给予0.03 μg/d或0.15 μg/d IL-12处理,用ELISA方法检测P.b感染小鼠血清或脾淋巴细胞体外培养上清中细胞因子IFN-γ、IL-4表达水平的动态变化.结果 0.03 μg/d IL-12处理组小鼠接种感染后第7天取脾淋巴细胞体外经PHA或可溶性抗原sAg刺激培养产生的IFN-γ水平较感染对照组显著升高,IL-4水平显著下降,而0.15 μg/d IL-12处理组脾淋巴细胞产生的IFN-γ及IL-4水平均较感染对照组显著下降.在感染后第3天,0.03 μg/d或0.15 μg/d IL-12处理组小鼠血清中IFN-γ均已出现,第5天达高峰,但感染后第7天 0.15 μg/d IL-12处理组血清中IFN-γ迅速下降,甚至低于感染对照组及0.03 μg/d IL-12处理组,感染对照组直到感染后第7天血清中方可检测到IFN-γ水平.结论适当低剂量IL-12诱导CD4 Th1免疫应答,产生细胞因子IFN-γ,以诱导抗P.b红内期感染的免疫保护作用;而较大剂量IL-12抑制机体抗感染免疫,甚至可致免疫病理损害.     

弓形虫GRA6可溶性蛋白在大肠埃希菌中的表达及纯化

目的在大肠埃希菌中高效表达及纯化弓形虫GRA6抗原,为制作弓形虫感染基因工程诊断试剂盒奠定基础.方法将重组pGEX-GRA6表达载体转化大肠埃希菌BL21-Codon Plus（DE3）-RP菌株,在异丙基硫代-β-D半乳糖苷（IPTG）诱导下表达.超声破壁后,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析表达产物的表达形式,并对表达产物以硫酸铵沉淀、Sephedax G50脱盐和GST亲和层析柱进行目的蛋白的纯化.通过Western blotting检测其纯化的重组抗原的免疫反应性.结果GRA6以融合蛋白（GST-GRA6）的形式在大肠埃希菌中得到了高效表达.对表达产物可溶性分析表明,表达蛋白在上清液中和包涵体中均有表达.在上清液中表达的可溶性蛋白经纯化后蛋白纯度可达90%以上.Western blotting分析表明纯化蛋白能被弓形虫感染的人血清所识别.结论GRA6在大肠埃希菌中得到了高效表达,重组抗原经纯化后能特异性地被弓形虫感染者血清所识别.     

聚合酶链反应用于现症间日疟和恶性疟病人的检测

本文选择种特异性引物MPV、PF检测采自云南混合流行区门诊病人的滤纸干滴血119例,并与传统镜检法比较。MPV引物根据P.v.线粒体细胞色素C氧化酶基因序列设计,扩增产物片断为374bp,PF引物根据p.f.中度重复序列PBK1-14基因序列设计,扩增产物片段为206bp。MPV引物系国内首次应用。血样本处理采用1％Tritonx-100裂解煮沸法,并作了改进。其研究结果显示:PCR法与镜检法符合率为86.6％。PCR法:P.v.阳性率为64.7％,P.f.阳性率为29.4％,混合感染率为7.6％,误诊为0,漏诊率为2.5％;镜检法:P.v.阳性率为58.8％,P.f.阳性率为2.7％,混合感染率为3.4％,误诊为2.5％,漏诊率为8.4％。本PCR诊断疟疾方法具有准确、敏感、快速、简易等特点,有潜在的现场应用价值。     

残胃114例胃镜检查结果分析

自１９９０年以来为有症状的术后胃１１４例行纤维胃镜检查,现报告分析如下：１　临床资料１１４例中,男９６例,女１８例,年龄最大７４岁,最小２４岁。术后至胃镜检查时间２月～３３年,手术方式：毕Ⅰ氏４３例,毕Ⅱ氏２７例,３４例胃癌及胃底贲门癌１０例均行肿瘤根治术。术后５年内行检查６１例,１０～２０年３５例,２０年以上１８例。１１４例中８例因急性消化道出血行急诊胃镜检查,其余均为择期检查。检查前病人有消瘦６６例,腹痛５９例,腹胀５７例,食欲减退５４例,乏力３８例,呕血或黑粪２８例,嗳气２７例,贫血及腹泻…     

细胞因子在寄生虫感染中的免疫作用

有关细胞因子的基本概念细胞因子(cytokine,CK)是由活化的免疫细胞(淋巴细胞、单核-巨噬细胞等)和基质细胞(成纤维细胞、内皮细胞等)分泌的,介导和调节免疫、炎症反应的小分子多肽,是免疫球蛋白和补体以外的另一类非特异性免疫效应物质。已知有100多种,功能多样。     

聚合酶链反应检测恶性疟原虫的研究

通过５ 对根据恶性疟原虫不同基因序列设计的引物筛选及７ 种从滤纸干血滴中快速制备疟原虫ＤＮＡ模板的方法的比较,以建立一种敏感、特异、简便、快速的聚合酶链反应（ＰＣＲ） 检测恶性疟原虫的方法。结果表明,根据恶性疟原虫中度重复基因序列ｐＢＲＫ１１４ 设计的引物,可从恶性疟原虫ＤＮＡ 中扩增出２０６ ｂｐ 大小的ＤＮＡ片段,而间日疟原虫、人白细胞ＤＮＡ均无此扩增带出现,并至少可检测出原虫血症为５ ×１０－ ７ 的感染水平,且适用于我国不同地理株恶性疟原虫的检测;滤纸干血滴样本经生理盐水溶血煮沸法处理的ＰＣＲ 扩增效果最为理想,且简易、经济、重复性好;在云南疟疾流行区采集的３６０ 份血样中,ＰＣＲ 法与镜检法符合率为９７ ．５％ 。本研究建立的ＰＣＲ 检测恶性疟原虫方法具有敏感、特异、简易和快速的特点,便于现场推广应用。     

重视造影剂在CT增强扫描中的不良反应和预防

随着CT增强扫描在临床诊断作用的重要性显现，水溶性碘造影剂被大量应用。离子型造影剂其渗透压高（最高可达人体血浆8倍），在静脉内快速大量注入时，可引起红血球变形，皱缩和聚集；从而使血管扩张，心室收缩减弱，血压降低，患者难以耐受而造成过敏反应；且因所带电荷（在水溶液中可电离出大量阴离子），可造成神经毒性引起惊厥或抽搐；还因其化学结构亲水性弱，亲脂性强，引起副反应相对增多。