地高辛标记的寡核苷酸探针两步原位杂交检测胸液细胞hTERT mRNA

目的 建立原位杂交法检测胸液细胞中人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的实验方法,初步评价该法识别胸液中肿瘤细胞的效果。方法 取23例胸腔积液病例标本,以地高辛标记的寡核苷酸探针对胸液细胞hTERT mRNA行两步原位杂交,再通过抗原-抗体-酶-显色途径,测出hTERT mRNA信号。实验研究设严格的阴性、阳性对照,且与临床诊疗各自独立进行。结果 本法对9例恶性胸腔积液病例检测的结果均为阳性,即无论细胞形态是否异常,镜下均可见到有细胞质深染及部分细胞核少许点状着色的细胞。此9例中,7例经胸液细胞形态学检查亦示阳性者,可同时观察到形态明显异常的肿瘤细胞,其余2例经反复胸液细胞形态学检查阴性,但胸膜活检确诊为恶性胸腔积液者,虽未见到形态明显异常细胞,但镜下可发现胞质深染、部分细胞核少许着色的细胞。14例良性胸腔积液病例的检测结果均为阴性。结论 原位杂交法检测胸液细胞hTERT mRNA可望作为一种临床细胞病理学的新方法,用以鉴别胸腔积液的良、恶性,同时判定肿瘤细胞的类型。     

银屑病遗传流行病学初步分析

目的 探讨遗传因素在银屑病发病中所起的作用。方法 采用调查表形式对２４７例银屑病患者进行调查，用Ｅｐｉｉｎｆｏ ６．０软件及Ｆａｌｃｏｎｅｒ法对数据资料进行统计计算。     

抗ErbB2抗体曲妥珠单抗的耐药机制与展望

曲妥珠单抗(trastuzumab)在治疗ErbB2高表达的乳腺癌病人中存在耐药现象,对其机制进行研究发现,主要有曲妥珠单抗同ErbB2受体的有效结合受阻、EGFR家族受体和IGF-IR等共表达以及PI3K-AKT信号通路的异常活化等方面。针对这些机制研制了一些可能提高曲妥珠单抗疗效的新型药物。     

抗人IFN—α单克隆抗体杂交瘤细胞的建株及应用研究

人ＩＦＮα在治疗淋巴细胞瘤、黑色素瘤、白血病和肾癌等肿瘤疾病，以及预防感冒、治疗乙型肝炎、单纯疱疹等病毒性疾病中，具有广泛的应用前景。据统计，我国约有肿瘤患者３００～４００万人，慢性乙肝患者近１００万人，单纯疱疹及带状疱疹患者约有１亿人以上，估计每年对ＩＦＮα的总需求量大约为５～６亿支。由于应用于临床（尤其是注射用）的ＩＦＮα纯度要求极高，因此作为治疗用的ＩＦＮα必须进行高度纯化。应用ｍＡｂ技术进行ＩＦＮα的分离纯化，具有操作简便、回收率高、可重复使用等优点，尤适合大规模地对重组和天然…     

腺病毒介导的RNA干涉对乳腺癌SKBR3细胞HER2的下调及生长抑制效应

目的:探讨采用腺病毒做为载体介导基于RNA干涉的针对高HER2肿瘤的基因治疗的可能性。方法:构建HER2-绿色荧光蛋白融合蛋白表达质粒pHER2-GFP,并与9种针对HER2不同靶序列的siRNA表达质粒分别共转染CHO-K1细胞,根据荧光蛋白表达量从中筛选出沉默效率最高的质粒。将筛选出的质粒转染HER2高表达乳腺癌SKBR3细胞,检测它们对HER2表达的影响。随后,将siRNA转录单元克隆入腺病毒载体,成功包装病毒后感染SKBR3细胞,再次测定其下调HER2的效应及其对细胞生长的影响。结果:2种有效下调HER2表达的质粒被筛选出来。将此2种质粒所含siRNA转录单元包装入腺病毒后仍然保持了原有的基因沉默效应。HER2下调增加了SKBR3细胞中G1期细胞的比例,并且诱导部分细胞凋亡。MTT和细胞长期增殖抑制实验表明腺病毒介导的RNA干涉抑制了SKBR3细胞生长。结论:重组腺病毒介导的RNA干涉能够下调HER2的表达并且对高表达HER2的乳腺癌细胞有生长抑制作用。     

抗HER-2嵌合抗体chA21对SKOV3细胞增殖的抑制及诱导其凋亡的作用

目的：探讨抗HER-2嵌合抗体chA21在体外抑制高表达HER-2的人卵巢癌SKOV3细胞增殖并诱导其凋亡的作用。方法：采用MTT比色法、HE染色、透射电镜、流式细胞术及TUNEL染色法等观察和检测chA21对人卵巢癌细胞SKOV3增殖抑制和凋亡的诱导作用：结果：chA21（0．2mg／L～5．4mg／L）可显著抑制SKOV3细胞增殖并诱导其凋亡．其作用呈剂量和时间依赖性：结论：chA21在体外可显著抑制SKOV3细胞的增殖，诱导凋亡可能是其主要的作用途径，     

六泉穴解惑刺法治疗缺血性脑卒中后吞咽障碍随机对照研究

目的:观察六泉穴解惑刺法治疗缺血性脑卒中后吞咽功能障碍的临床疗效。方法:将缺血性脑卒中后吞咽功能障碍患59例随机分为治疗组30例(采用六泉穴解惑刺法)、对照组29例(神经内科常规治疗联合吞咽康复训练)。治疗前后进行洼田饮水试验评估。结果:治疗后,2组在饮水试验评分比较有统计学意义(P0.05);治疗后2组在吞咽困难总体疗效比较,治疗组总有效率为90.00%,对照组总有效率为65.52%;2组总有效率比较有显著性差异(P0.05)。结论:六泉穴解惑刺法可显著改善脑卒中患者吞咽功能。     

人乳腺癌细胞MCF-7/HER2稳转株裸鼠移植瘤模型的建立

<正>HER2受体属于表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)家族,在乳腺癌、胃癌与卵巢癌等恶性肿瘤中的过表达往往预示肿瘤易发生转移及预后不良[1]。本实验室在国内较早开展抗HER2治疗性抗体研发工作,相继制备有鼠源性单克隆抗体A21及人源化抗体chA21等[2-4],为了评价这类针对HER2受体的靶向治疗药物的药理作用,本研究采用HER2表达质粒稳定转染人乳腺癌细胞MCF-7,经筛选获得HER2过表达的MCF-7/HER2细胞株,     

针刺不同腧穴组方联合Schuell语言训练治疗缺血性脑卒中后失语症的平行对照研究

目的:探讨针刺不同腧穴组方联合Schuell语言训练治疗缺血性脑卒中后失语症的临床有效性及差异性。方法:选择缺血性脑卒中后失语症患者120例,随机分为治疗组、对照1组和对照2组,每组40例。3组均给予Schuell刺激法进行语言康复训练,对照1组给予"四冲穴"针刺;对照2组给予辨证取穴针刺;治疗组给予百会八阵取穴针刺。治疗8周后观察并评定临床疗效。结果:治疗后治疗组在阅读能力、口语表达、听语理解积分和CFCP评分方面与对照1组、对照2组比较均有统计学差异(P0.05)。治疗组临床疗效总有效率为90%,分别高于对照1组(80%)、对照2组(77.5%),比较均有统计学意义(P0.05)。结论:针刺百会八阵穴可以明显改善患者的阅读能力、口语表达、听语理解,明显提高临床疗效。     

125 I标记的抗p185抗体的体外代谢与体内生物学分布

目的：研究^125Ⅰ标记的抗p185抗体（鼠mAb A21、人鼠嵌合抗体A21 scFv-Fc及单链抗体A21 seFv）在体外的细胞代谢和在体内的生物学分布，为其在诊断和治疗高表达p185肿瘤的临床应用提供依据。方法：通过FACS检测抗体是否与高表达膜表面抗原p185的SKOV，特异结合。采用氯胺T法进行碘标记抗体，用细胞放射免疫分析实验，检测抗体在SKOV、细胞中的代谢。建立荷SKOV，裸鼠模型，以观察抗体的体内生物学分布。结果：体外细胞代谢实验表明，抗体在与细胞膜表面结合后，进而被内吞入细胞，在细胞内降解和脱碘，最后被分泌出细胞外。体内药物代谢实验表明，抗体在动物体内肿瘤部位出现选择性放射性浓聚，而无关抗体未出现放射性浓聚，呈全身分布。结论：mAb A21，A21 seFv-Fc和A21 scFv对于高表达p185的卵巢癌在体内和体外都具有亲和力，可单用作高表挟D185肿瘤的诊断和治疗。