P53选择性剪接异构体和Bax、P21在胃癌中表达及意义

目的探讨胃癌发病机制。方法应用巢式逆转录多聚酶链反应(NT-PCR)和免疫组织化学(PV-9000二步法)观察P53选择性剪接异构体与Bax、P21在胃癌和相应癌旁组织中的表达关系。结果在30对胃癌及其癌旁胃组织只检测到△133P53、P53βmRNA表达,而未检测到P53γ、△133P53β、△133P53γ。Δ133P53与Bax、P21呈负相关,P53β与Bax、P21呈正相关。结论胃癌组织中P53异构体的差异性表达通过与Bax启动子和P21启动子结合进而调节P53的活性,对胃癌的发生发展起了重要的作用。     

调神疏肝针刺法对脑卒中后抑郁的干预作用

目的探讨调神疏肝针刺法对脑卒中后抑郁的干预效果。方法将60例脑卒中后抑郁患者随机分为治疗组和对照组。对照组予以盐酸氟西汀口服治疗,治疗组在对照组治疗基础上加以调神疏肝针刺法治疗。结果治疗组总有效率为86.67%,对照组总有效率为63.33%,两组总有效率比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组HAMD评分、MESSS评分及Barthel指数评分与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论调神疏肝针刺法能改善脑卒中后抑郁患者的抑郁状态,改善神经功能和生活能力。     

应用直线型缝合器行食管胃侧侧吻合术

目的探讨在食管不同手术入路中应用直线型缝合器行食管胃吻合以减少术后吻合口狭窄的效果。方法自2008年1月~2009年10月应用直线型缝合器纵向缝合食管胃吻合口后壁,使吻合口后壁延长至3 cm以上,应用可吸收缝线连续缝合吻合口前壁,完成食管胃侧侧吻合12例。术后随访观察进食情况,纤维胃镜、造影评估吻合口内径。结果12例均顺利完成食管胃吻合术,胸内吻合10例(83.3%),颈部吻合2例(16.7%)。经左胸切口行食管胃弓下吻合6例,经左胸切口行食管胃弓上吻合2例,经腹部正中切口、右胸切口行食管胃胸顶吻合2例,经三切口行食管胃颈部吻合2例。术后无吻合口瘘,切缘无癌残留,但发生腹部切口感染1例。术后随访1~18个月,进食通畅,行胃镜检查4例,造影检查8例,吻合口直径平均1.5(1.4~1.7)cm,无吻合口狭窄。结论应用直线型缝合器行食管胃吻合通过增加吻合口内径、改变吻合口位置减少了术后吻合口狭窄的发生,是替代传统管型吻合器吻合的有效手术方法。     

以聚合酶链反应确诊中枢神经系统白血病一例

患者男,27岁.2004年6月诊断为急性粒细胞白血病,部分分化型(M2型),核型分析示46,XY,t(8;21),AML1-ETO表达(+).化疗达完全缓解后多方案巩固治疗t年.后停止治疗.2007年3月无明显诱因出现双侧臀部及双下肢疼痛麻木,呈放射性,不伴有发热等其他不适,CT示腰椎间盘突出,相应处理后症状稍缓解.     

肌肉注射脂联素基因对高脂饮食大鼠氧化应激作用的影响

构建人脂联素(hAPN)基因的质粒表达载体,研究其体外转移后的表达情况.通过基因重组构建脂联素基因表达系统,电转导法导入大鼠股部肌肉,RT-PCR检测大鼠肌肉注射部位组织中mRNA水平的表达情况,同时监测外周血中SOD、MDA水平.结果表明:RT-PCR显示该基因能在肌肉组织中表达,血清中SOD水平相应升高,注射后两周达到最高水平;MDA水平降低,注射两周后达到最低水平,持续大约两周.脂联素表达系统可以在动物体内表达,增加了自由基的清除,抑制了脂质过氧化物的产生.     

VITAPEX 根管充填糊剂与ZOE 根管充填组织相容性的比较研究

为评价两种根管充填材料糊剂氧化锌(ZOE)、氢氧化钙碘仿糊剂(VITAPEX)与根尖周组织的相容性进行实验,组织学分析可见在30天ZOE有慢性炎性反应;90天ZOE仍有持续炎性反应;VITAPEX则炎性反应有明显缓解,表现出轻微的炎性反应,修复快,有活跃的成牙骨质细胞.     

DIALOG系统医药品安全信息探析

介绍DIALOG系统医药品安全方面信息的获取,包括MEDLINE、EMBASE等医药品文献数据库及其它类型数据库如时事通讯、副作用反应数据库,以利于医药品安全信息的利用.     

2016-2020年云南省药包材抽验与质量初步分析

目的：分析2016-2020年云南省药品包装材料产品质量监督抽验情况,掌握辖区内药包材的质量状况,为未来监管工作提供参考。方法：对云南省2016-2020年药包材监督抽验数据进行分析。结果与结论：目前药包材质量总体稳定。监督抽验可以有效督促生产企业加强药包材质量控制,特别是药包材关联审评审批制度实施后,更能有效防控质量风险。     

东北岩高兰提取物对上皮性卵巢癌细胞的凋亡作用及机制探讨

目的　探讨东北岩高兰提取物二氢查耳酮类化合物对上皮性卵巢癌细胞抗肿瘤作用,并初步探讨其作用机制。方法　选取2019年1月至2020年9月于聊城市人民医院行妇科手术治疗的上皮性卵巢癌患者10例新鲜肿瘤组织,检测上皮性卵巢癌组织中的Bcl-2、Beclin-1基因表达情况,培养上皮性卵巢癌细胞SKOV3、A2780、OVCAR3及正常卵巢细胞IOSE80,将不同浓度的东北岩高兰提取物与细胞共培养,采用CCK-8（cell counting kit-8）法测定细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,采用实时荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）及Western blot检测药物反应后细胞中Bcl-2、Beclin-1 mRNA及蛋白表达情况。使用统计软件SPSS 22.0、GraphPad Prism进行统计学分析,单因素方差分析进行细胞IC₅₀值测定,GraphPad Prism进行作图分析,计量资料组间比较采用独立样本t检验。结果　Bcl-2在上皮性卵巢癌组织中相对表达量为（0.759±0.110）,Beclin-1表达量为（0.537±0.150）,正常卵巢组织中分别为（0.294±0.160）、（1.612±0.130）,相比正常卵巢组织,上皮性卵巢癌组织Bcl-2表达明显升高、Beclin-1表达显著降低（均P<0.01）。东北岩高兰提取物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ对上皮性卵巢癌细胞SKOV3、OVCAR3、A2780增殖抑制作用显著,细胞凋亡率明显升高（P<0.01）,呈剂量-时间依赖性,按抑制作用排序为：提取物Ⅴ>Ⅳ>Ⅱ>Ⅲ,岩高兰提取物Ⅰ对于肿瘤细胞无增殖抑制作用。经东北岩高兰提取物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ处理的上皮性卵巢癌细胞SKOV3、A2780、OVCAR3组Bcl-2 mRNA相对表达量降低（P<0.01）,Beclin-1 mRNA相对表达量升高（P<0.01）。经东北岩高兰提取物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ处理的上皮性卵巢癌细胞SKOV3中Beclin-1蛋白表达显著升高（P<0.01）,Bcl-2蛋白表达明显减少（P<0.01）。结论　东北岩高兰提取物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ对上皮性卵巢癌细胞SKOV3、A2780、OVCAR3增殖有显著抑制作用,细胞凋亡率明显升高,说明东北岩高兰提取物对于卵巢癌有抗肿瘤特性;经提取物处理后,肿瘤细胞Beclin-1 mRNA及蛋白相对表达量显著升高,Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量明显降低,提示东北岩高兰提取物可能通过调节自噬基因的表达来诱导细凋亡。     

子痫前期胎盘中生长阻滞和DNA损伤45α基因及p38丝裂原活化蛋白激酶的表达

目的 探讨子痫前期胎盘组织中生长阻滞和DNA损伤45α(growth arrest and DNA damage-inducible 45 alpha,Gadd45α)基因和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)信号分子的表达,及其与血清中可溶性血管内皮生长因子受体-1(soluble vascular endothelial growth factor receptor-1,sFlt-1)和可溶性endoglin(soluble endoglin,sEng)的相关性分析.方法 选择2009年9月至2010年3月在重庆医科大学附属第一医院住院分娩的孕妇54例为研究对象,按病情分为子痫前期轻度组20例、子痫前期重度组16例,以足月择期剖宫产孕妇18例为对照组.采用免疫组织化学SP法检测Gadd45α及磷酸化p38 MAPK(phospho-p38 MAPK,p-p38 MAPK)蛋白在各组胎盘组织中的定位;实时荧光定量PCR检测各组胎盘组织中Gadd45α mRNA水平;Western印迹法检测各组胎盘组织中Gadd45α蛋白的表达水平、p38 MAPK及p-p38 MAPK的蛋白表达差异;双抗体夹心酶联免疫吸附法检测各组孕妇血清样本中sFlt-1及sEng的含量,并进行单因素方差及LSD-t检验分析.结果 (1)免疫组织化学检测Gadd45α与p-p38 MAPK蛋白均定位于胎盘滋养层细胞胞质及胞核、血管内皮细胞胞核及少量间质细胞胞核.(2)子痫前期重度及轻度组Gadd45α mRNA相对表达水平(3.33±0.13和2.10±0.11)较正常对照组(1.01±0.18)明显上调,且子痫前期重度组高于轻度组,两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05).(3)Western 印迹法检测正常对照组、子痫前期轻度组及重度组患者胎盘组织中Gadd45α蛋白表达水平分别为0.22±0.11、0.65±0.15、1.34±0.17;p-p38 MAPK蛋白的表达水平分别为0.32±0.08、0.72±0.12、1.45±0.21,两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05);p38 MAPK蛋白水平组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).(4)子痫前期轻度组、重度组孕妇血清sFlt-1、sEng水平明显高于正常对照组,且子痫前期重度组高于轻度组,两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05).(5)各组Gadd45α蛋白水平与孕妇血清中的sFlt-1、sEng含量呈正相关(r分别为0.88和0.87,P均＜0.05).结论 Gadd45α在子痫前期患者胎盘组织中的表达明显升高,其可能通过调控p38 MAPK信号转导通路,诱使循环中的sFlt-1、sEng释放增加,从而加重胎盘血管重铸障碍和抑制滋养细胞浸润,参与子痫前期的发病.

Abstract：

Objective To evaluate the expression of Gadd45α and p38 MAPK in placentas and the correlations of Gadd45α protein and serum soluble vascular endothelial growth factor receptor-1 (sFlt-1) and soluble endoglin (sEng) in preeclampsia(PE). Methods Fifty-four pregnant women who delivered from September 2009 to March 2010 in the First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University were chosen as the subjects. They were classified into mild preeclampsia group (n=20),severe preeclampsia group (n=16) and the control group (normal pregnant women underwent elective cesarean sections at term without labor and perinatal complications, n=18). Western blot and immunohistochemistry were employed to determine the expression and localization of Gadd45α and p-p38 MAPK protein respectively. Gadd45α mRNA level was determined by quantitative real-time PCR. The levels of seum sFlt-1 and sEng were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). One-way ANOVA and LSD-t test were applied for statistical analysis. Results (1)Immunohistochemistry identified that the positive stained cells were mostly located in trophoblast cells in normotensive placentas, whereas in preeclamptic placentas Gadd45α protein and p-p38 MAPK protein were detected in trophoblast and endothelial cells, as well as a few stromal cells at increased levels.(2)The mRNA levels of Gadd45α was significantly elevated in mild and severe preeclampsia groups compared to the control group (2.10±0.11 and 3.33±0.13 vs 1.01±0.18, P＜0.05), and Gadd45α mRNA level in severe group was significantly higher than in mild group (P＜0.05).(3)The data of Western blot revealed that the Gadd45α protein levels in each group were 0.22±0.11, 0.65±0.15 and 1.34±0.17, respectively, with significant differences between each group(P＜0.05). The p-p38 MAPK protein levels in each group were 0.32±0.08, 0.72±0.12 and 1.45±0.21, respectively, with significant differences between each group (P＜0.05). p38 MAPK protein levels in the total groups showed no difference(P＞0.05).(4)Compared with the control group, sFlt-1 and sEng concentrations in maternal circulation were significantly increasing in mild and severe preeclampsia groups, and concentrations in severe group were significantly higher than those in mild group (P＜0.05).(5) There were positive correlations between Gadd45α protein levels and the concentrations of serum sFlt-1 and sEng in each group( r=0.88 and 0.87, respectively all P＜0.05). Conclusions Upregulation of Gadd45α in preeclampsia placentas may play an important role in the pathogenesis of preeclampsia. It may induce the increased maternal serum levels of sFlt-l and sEng by activating p38 MAPK signaling pathway, leading to deficient cytotrophoblastic invasion and abnormal placental vascular reconstruction during pregnancy.