大鼠杏仁皮质核内γ-氨基丁酸与一氧化氮共存神经元分布及对痛觉信息传递的调控

背景大鼠杏仁复合体分布有较多的还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶阳性神经元,γ-氨基丁酸也是广泛地存在于哺乳动物中枢神经系统的一种重要的抑制性神经递质,γ-氨基丁酸与一氧化氮合酶是否在大鼠杏仁复合体内共存目前尚不清楚.目的采用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学和免疫组化双重染色相结合的方法,观察杏仁皮质核内是否存在γ-氨基丁酸与还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶共存的神经元.设计以实验动物为研究对象,验证性对照研究.单位两所大学的解剖教研室.材料实验于2004-05/06在浙江大学医学院解剖教研室完成.选择SD大鼠6只,雌雄不拘,体质量250～300 g.干预制备大鼠脑组织冠状连续冰冻切片,取4套切片分别用作尼氏染色、还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学、还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学和γ-氨基丁酸免疫组化双重染色以及检查抗体特异性的对照实验.计数杏仁皮质核核团内γ-氨基丁酸标记神经元数目、还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶阳性神经元数目以及还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶/y-氨基丁酸双标神经元的数目,计算出双标阳性神经元数占单标阳性神经元数的百分比.内氏染色用作核团定位.主要观察指标还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶和γ-氨基丁酸双标和单标神经元分布情况.结果显示γ-氨基丁酸阳性神经元多散在分布于杏仁皮质后内侧核、杏仁皮质后外侧核,以小型为主,中型较少,还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶阳性神经元多散在分布于杏仁皮质后内侧核、杏仁皮质后外侧核,杏仁皮质前核以中、小型神经元为主,双标神经元(γ-氨基丁酸/还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶均阳性)多散在分布于杏仁皮质后外侧核,以中、小型神经元为主.还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶和γ-氨基丁酸双标神经元与单标神经元的比例分别24.5%(γ-氨基丁酸),46.7%(还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶).结论大鼠杏仁皮质核内有γ-氨基丁酸与还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶共存的神经元,提示一氧化氮对杏仁皮质核内的γ-氨基丁酸能神经元可能有调控作用.     

再生基因蛋白的研究进展

再生基因蛋白(regenerating gene protein)是一种胰腺炎时自胰液中提纯的炎症蛋白，再生基因蛋白家族属钙依赖的植物血凝素超家族。它代表一组分泌蛋白,其功能相当于急性反应蛋白,抗凋亡因子或胰腺β细胞和神经细胞的生长因子。Reg蛋白家族的作用最早是在糖尿病研究中发现的，近年来随着研究的深入,Reg蛋白在神经系统损伤中的重要作用逐渐被人们所注意。     

微量海人藻酸刺激大鼠延髓网状背侧亚核后脊髓和三叉神经脊 …

为了观察起自延髓网状背侧亚核的下行投射对脊髓和三叉神经脊束核尾侧亚核神经元活动的影响，将微量海人藻酸注入大鼠ＳＲＤ中，致ＳＲＤ神经元兴奋，在ＳＲＤ下行通路的作用部位引起ｃ－ｆｏｓ的表达。实验结果表明，在注射后３０ｍｉｎ，脊髓灰质内出现ＦＯＳ阳性神经元，１．５－２ｈ时达高峰，４ｈ后明显减少。     

微量海人藻酸刺激大鼠延髓网状背侧亚核后脊髓和三叉神经脊束核尾侧亚核内c-fos的表达

为了观察起自延髓网状背侧亚核（ＳＲＤ）的下行投射对脊髓和三叉神经脊束核尾侧亚核（Ｖｃ）神经元活动的影响，将微量海人藻酸注入大鼠ＳＲＤ中，致ＳＲＤ神经元兴奋，在ＳＲＤ下行通路的作用部位引起ｃ－ｆｏｓ的表达。实验结果表明，在注射后３０ｍｉｎ，脊髓灰质内出现Ｆｏｓ阳性神经元，１．５～２ｈ时达高峰，４ｈ后明显减少。在高峰期，同一脊髓节段的不同板层内Ｆｏｓ阳性神经元的密度不同：Ⅰ、Ⅱ层＞Ⅲ、Ⅳ层＞Ⅴ～ⅩⅡ、Ⅹ层，Ⅷ、Ⅸ层中偶见。Ｖｃ内Ｆｏｓ阳性神经元的出现时间和分布与脊髓后角相似。上述结果提示，ＳＲＤ发出的下行纤维主要调控脊髓和Ｖｃ（尤其是浅层）中的神经活动     

下腔静脉瓣与冠状窦口的应用解剖

检查了100个已固定的心脏标本。冠状窦瓣和下腔静脉瓣的形状多变,其中以半月状瓣最多,分别为39.0％和53.3％。下腔静脉瓣与冠状窦口的位置关系可分为三种:窦口位于瓣的左前方者最多,占90.2％;位于后下方者占6.5％;位于后上方者占3.3％。本文就心导管检查的有关应用解剖学进行了讨论。     

谷氨酸受体在延髓网状背侧亚核内的分布

谷氨酸是哺乳类中枢神经系统的一种重要的神经递质。为了探讨谷氨酸是否作用于延髓网状背核的神经元,采用免疫组织化学方法,对代谢型谷氨酸受体的７种亚型以及离子型谷氨酸受体中的Ｎ－甲基－天门冬氨酸１型受体在延髓网状背侧亚核内分布的情况进行了研究。结果显示,几种谷氨酸受体的免疫阳性产物主要定位在神经元的胞体和树突上。在延髓网状背侧亚核可以观察到ｍＧｌｕＲ５,ｍＧｌｕＲ７和ＮＭＡＤＡＲ１这３种受体亚型的免疫阳     

不同张力扩张子宫颈诱导大鼠延髓内脏带c-Fos及神经型一氧化氮合酶的表达变化

目的观察不同张力扩张子宫颈(UCD)诱导大鼠延髓内脏带神经元c-Fos和神经型一氧化氮合酶(n NOS)的表达变化,探讨UCD疼痛在延髓水平的传导机制。方法成年雌性SD大鼠随机分为对照组(UCD 0g)、宫颈扩张50g张力组(UCD 50g)和宫颈扩张100g张力组(UCD 100g)。UCD组大鼠实施50g及100g张力扩张刺激,UCD刺激后2h,取延髓组织采用还原型辅酶Ⅱ(NADPH)组织化学和c-Fos免疫组织化学双重染色法观察c-Fos、n NOS和c-Fos/n NOS阳性神经元的分布,Western blotting和Real-time PCR法分别检测c-Fos及n NOS蛋白和mRNA水平。结果 c-Fos免疫阳性神经元的细胞核为棕黄色,呈圆形或卵圆形,胞质不着色。n NOS阳性神经元的胞体和突起呈蓝色,胞核不着色,呈空泡状。c-Fos/n NOS双标神经元的胞体和树突染成蓝色,细胞核呈棕黄色,这些神经元主要分布于延髓孤束核(NTS)和外侧网状核(LRN)内。与UCD 0g组相比,UCD 50g组和UCD 100g组大鼠NTS和LRN内c-Fos、n NOS以及c-Fos/n NOS阳性神经元数量明显增加,染色明显加深,c-Fos、n NOS蛋白及mRNA水平均明显升高(P0.01)。结论大鼠急性UCD可导致NTS和LRN神经元c-Fos及n NOS张力依赖性表达增加,NTS和LRN内的n NOS阳性神经元可能参与UCD疼痛在延髓水平的传导。     

一氧化氮合酶和5-羟色胺在体外培养的胚鼠脑干神经元内的共存研究

采用 NADPH-d组织化学和 5 -羟色胺免疫组织化学双重反应技术 ,探讨在体外培养条件下 E14 d SD胚鼠脑干神经元中5 -羟色胺与一氧化氮合酶阳性神经元的体外生长发育过程以及 5 -羟色胺与一氧化氮合酶的共存。将 E14 d SD胚鼠脑干细胞悬液接种于 2 4孔培养板 ,实验按培养龄分 4组分别在接种后 5 d、10 d、15 d和 2 1d终止培养 ,先进行 NADPH-d组织化学反应 ,再行 5 -羟色胺免疫组织化学反应。结果显示 :各实验组均可观察到三种神经元 ,即 5 -羟色胺免疫阳性神经元、一氧化氮合酶阳性神经元和两者的双重阳性神经元 ,其中双重阳性神经元占多数 ,并以梭形神经元为主 ,胞体呈三角形、多角形、梭形或卵圆形。 10 d组的双重阳性神经元突起最长可达 60 0μm以上 ,末端可见明显的生长锥 ,轴突终末分支上分布有大量的膨体 ,并与其它神经元的胞体或突起之间形成接触。本研究结果证明一氧化氮合酶和 5 -羟色胺可以在体外培养的胚鼠脑干神经元内共存 ,提示一氧化氮合酶可能与 5 -羟色胺共同参与胚脑的发育。     

失血性休克大鼠血浆β-内啡肽和一氧化氮含量变化及其联系

目的 了解在失血性休克时β-内啡肽(β-EP)和一氧化氮(NO)之间血浆含量的变化是否存在某种联系并探讨其机制。方法 12只SD大鼠麻醉后经股动脉放血复制失血性休克模型,分别在5个不同时点采集大鼠血浆,通过生物化学方法检测其中β-EP、NO和NOS的浓度。结果失血性休克后血浆β-EP、NO和NOS的浓度都显著升高,并且NO与β-EP的浓度变化存在一定的正相关,与NOS的浓度变化在失血性休克后期存在显著的正相关。结论 ①β-EP和NO在失血性休克中可能都扮演重要角色;②在失血性休克后期血中NO浓度的升高主要是由iNOS所产生的,提示iNOS对失血性休克的发展和预后起着关键性作用;③同时本研究的结果也提示在失血性休克时β-EP和NO可能相互调节并协同地发挥作用。     

一氧化氮合酶在大鼠杏仁基外侧核传入神经元内的分布

目的：研究一氧化氮合酶(NOS)在大鼠杏仁基外侧核(BLA)传入投射神经元中的分布。方法：采用霍乱毒素B亚单位(CTb)逆行追踪和还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH—d)组织化学双重染色相结合的方法。结果：双标神经元(NADPH-d／CTb)主要分布在孤束核、蓝斑、臂旁内侧核、中缝背核、中央灰质背侧部、丘脑室旁核、下丘脑室旁核、下丘脑室周核、下丘脑腹内侧核以及杏仁内侧核等神经核团。结论：NOS在大鼠BLA传人投射神经元中主要分布于上述核团,并且提示NO参与BLA的功能调节。