p38/ERK激酶调控TGF-β1诱导的HLF-02细胞Ⅰ型胶原表达及MMP-2活力

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路在调控人肺成纤维细胞Ⅰ型胶原表达、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活力中的作用.方法 以人肺成纤维细胞HLF-02细胞系为研究对象,给予10 ng/ml的TGF-β1刺激不同时间;阻断实验以P38激酶特异性抑制剂(SB203580)、ERK激酶特异性抑制剂(PD98059)分别阻断p38通路和细胞外调控激酶(ERK)通路;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内Ⅰ型胶原mRNA的表达;运用Western印迹检测细胞上清液中Ⅰ型胶原蛋白表达;酶谱分析细胞上清液中MMP-2、MMP-9的活力.结果 (1)TGF-β1刺激HLF-02细胞,24、48、72 h组的Ⅰ型胶原mRNA表达水平分别为1.33±0.07、2.46±0.09、2.39±0.08;Ⅰ型胶原蛋白表达水平分别为114.89±8.95、208.16±6.75、211.46±8.05;MMP-2的活力分别为190.33±5.86、214.33±8.39、212.67±11.59.(2)SB203580对TGF-β1诱导的Ⅰ型胶原mRNA水平、蛋白水平及MMP-2活力的抑制率分别为51%、24%、20%.(3)PD98059对TGF-β1诱导的Ⅰ型胶原mRNA水平、蛋白水平以及MMP-2活力的抑制率分别为42%、13%、16%.结论 TGF-β1可促进HLF-02细胞Ⅰ型胶原的转录和蛋白表达,上调MMP-2活力;p38、ERK激酶通路在此过程中具有重要的调控作用.     

大鼠肝细胞癌变过程中CyclinB1的异常表达及意义

目的 探讨肝细胞癌变过程中cyclinB1的异常表达及其意义.方法 用0.05%的2-乙酰氨基芴(2-AAF)诱导Wistar大鼠建立肝癌动物模型,应用免疫组化和原位杂交法检测大鼠肝脏在癌变过程中cyclinB1的蛋白和mRNA表达.结果 正常组8只中cyctinB1蛋白和mRNA表达均正常,肝硬化组16只中有12只cyclinB1蛋白和mRNA过表达,肝癌组11例中有4只cyclinB1蛋白和mRNA过表达.结论 在3组中cyclinB1蛋白和mRNA表达一致,差异无统计学意义.肝硬化组和肝癌组的cyclinB1异常表达均高于正常组,而且肝硬化组的cyclinB1异常表达高于肝癌组.     

维生素C防治肿瘤作用的研究进展

维生素C（又称抗坏血酸）是具有许多生物学功能的水溶性己糖衍生物，它的分子式是C6H8O6，其分子中2位和3位碳原子的两个烯醇式羟基极易解离，释放出H^＋，而被氧化成脱氢维生素C。维生素C和脱氢维生素C在人体内形成可逆的氧化还原系统，此系统在生物氧化、还原作用及细胞呼吸中起重要作用。维生素C参与氨基酸代谢、神经递质、胶原蛋白和组织细胞间质的合成；可降低毛细血管的通透性，加速血液凝固，刺激凝血功能，促进铁在肠内的吸收，     

高危型HPV在宫颈癌发生中的作用

本文利用PCR技术检测了44例宫颈癌患者和15例慢性宫颈炎患者病变组织中高危型HPV（16，18，31，33）的感染率，发现44例宫颈癌患者高危型HPV的阳性率高达91％（40／44），其中HPV16型感染率54．55％（24／44），HPV18型感染率18．2％（8／44），HPV31型感染率13．6％（6／44），HPV33型感染率4．55％（2／44）；15例慢性宫颈炎患者有2例感染HPV16型。结果提示HPV16型是宫颈癌发生最常见的基因型，其次为HPV18型和HPV31型，故对育龄妇女定期进行高危型HPV感染的普查，在早期预防宫颈癌的发生具有十分重要的意义；联合采用分子生物学和宫颈脱落细胞学技术进行即定期普查，既能提高阳性率，又能对感染高危型HPV的慢性宫颈炎患者进行早期的有效预防。     

血管内皮生长因子在兔正畸牙牙周组织中的表达

目的检测血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在兔正畸牙移动过程中牙周组织中的表达与分布，探讨VEGF在正畸牙移动中的作用机理。方法25只兔随机分为1、3、7、14d正畸加力组和正常对照组，每组5只。采用免疫组织化学方法检测牙周组织中VEGF的表达，并对其表达强度进行半定量分析。结果VEGF在正畸加力组兔牙周组织压力侧和张力侧中的表达均明显强于正常对照组，1、3、7d组依次递增，7d达到高峰，14d有所下降。VEGF的表达位于胶原纤维以及血管内皮细胞、成纤维细胞、成骨细胞和破骨细胞胞浆中。结论VEGF参与了牙齿移动过程中的牙周组织早期的改建并可能在其中起重要作用。     

MDM_2及p53在口腔疣状癌中的表达研究

目的:研究癌基因蛋白(MDM2)过度表达及p53功能失活与口腔疣状癌发生的相关性。方法:利用免疫组 织化学SP法检测13例口腔疣状癌、10例口腔高分化鳞癌、10例口腔低分化鳞癌组织中的MDM2蛋白及p53蛋白 表达,并分析其相关性。结果:口腔疣状癌中的MDM2蛋白表达与口腔鳞癌间差异无显著性,而其p53蛋白表达 明显低于口腔鳞癌(P<0.01);虽然两者之间无明显相关性(P>0.05),但在13例MDM 蛋白表达阳性的口腔疣 状癌中,仅4例(30.8％)呈现p53阳性,69.2％的病例呈现p53阴性表达。结论:MDM2蛋白过度表达与p53失活 并存可能与口腔疣状癌的发生相关。     

P16蛋白在口腔疣状癌组织中的表达及意义

目的 :研究P16蛋白在口腔疣状癌中的表达状况并与其在口腔黏膜鳞状细胞癌的表达对比 ,探讨其在口腔疣状癌发生发展中的生物学意义。方法 :采用SP免疫组化方法分别检测 8例正常口腔黏膜、13例疣状癌、10例高分化鳞癌、10例低分化鳞癌组织中P16蛋白的表达。结果 :疣状癌P16蛋白表达缺失率为 2 3 .1% ( 3 /13 ) ,过度表达率为 69.2 % ( 9/13 ) ,其平均染色强度高于高分化鳞癌和低分化鳞癌组 (P <0 .0 5 )。结论 :P16基因变异在口腔疣状癌的发生过程中起一定作用 ,疣状癌中P16蛋白过度表达提示疣状癌可能与HPV关系密切。     

miRNAs在不同亚型胃癌组织中的表达差异分析

目的 选取4种在胃癌组织中异常表达的miRNAs,探讨它们在不同亚型胃癌组织中的表达差异.方法 采用Real-time PCR检测29例肠型胃癌与21例弥漫型胃癌组织及其相应正常胃黏膜组织中miR-27a、miR-494、miR-145和miR-886-3p的表达水平.结果 miR-27a在弥漫型胃癌组织中的表达水平增加2.87倍,在肠型胃癌组织中增加4.64倍,均为高水平表达(P＜0.01),与弥漫型胃癌相比,在肠型胃癌组织中miR-27a的表达更高,差异具有统计学意义(P＜0.01).miR-494在弥漫型胃癌组织中的表达下降了4.39倍,在肠型胃癌组织中则只下降了2.50倍,两者之间差异也有统计学意义(P＜0.01).miR-145在肠型胃癌组织中下调3.28倍(P＜0.01),在弥漫型胃癌组织中只下调2.02倍(P＜0.01).miR-886-3p在肠型胃癌组织中异常高表达,且与弥漫型胃癌组织中表达水平相似.结论 在不同亚型胃癌组织中miRNA表达水平与表达模式存在显著性差异,可能导致胃癌亚型间基因表达水平的不同.     

慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌组织中cyclin D1和CDK3表达的动态变化及其意义

[目的]探讨慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌组织中细胞周期素D1(cyclin D1)和细胞周期依赖性激酶3(CDK3)表达的动态变化及其意义.[方法]利用免疫组化检测30例慢性肝炎,41例肝硬化和49例肝细胞癌组织中cyclin D1和CDK3的表达.[结果]cyclin D1阳性信号位于细胞核,CDK3阳性信号主要位于细胞浆,少数呈核浆型;在慢性肝炎、无非典型增生肝硬化、有非典型增生肝硬化和肝细胞癌中cyclin D1的表达强度依次增高;CDK3在肝细胞癌和有非典型增生的肝硬化组织中表达最强,无非典型增生的肝硬化组织中表达次之,慢性肝炎组织中几乎阴性,且CDK3在有非典型增生的肝硬化组织和肝细胞癌组织中表达强度无明显差异,统计学分析表明在cyclin D1和CDK3的表达强度具有明显正相关.[结论]在肝细胞癌发生过程中cyclin D1和CDK3的表达具有良好的一致性;CDK3的过表达和激活可能是肝细胞癌发生的早期事件,故检测CDK3的表达和活性有可能作为肝细胞癌的早期诊断指标之一.