转染NF—kB抑制物基因对食管癌细胞系生物活性的影响

目的：将NF—kB抑制物基因pcDNA3／mI kBα S32A／S36A转染食管癌细胞株EC1，观察对NF—kB因子活性及对细胞生长的影响。方法：采用脂质体转染法将pcDNA3／mI kBα S32A／S36A质粒转染入EC1细胞进行瞬时表达．检测其对EC1细胞的影响，用Western blot和RT—PER方法检测转染前后NF—kB p65、NF—kB p50蛋白和mRNA表达水平的变化。结果：与转染pcDNA3．0质粒和未转染质粒组比较，转染pcDNA3．0／mI kBα S32A／S36A质粒EC1细胞的生长速度受到明显抑制，P〈0．05。转染pcDNA3／mI kBα S32A／S36A质粒的EC1细胞，在0、24、48、96小时未见NF—kB p65、NF—kB p50蛋白和mRNA表达，而转染pcDNA3．0质粒EC1细胞可见核内NF—kB p65和NF—kB p50蛋白表达。结论：转染NF—kB抑制物基因IkBα后可抑制EC1细胞的生长，并抑制细胞NF—kB p65、NF-kB p50基因的表达．该结果提示调节NF—kB的表达可能是食管癌基因治疗的靶点。     

中国河南林州市食管鳞状细胞癌组织中Ras蛋白的表达

癌基因ｒａｓ蛋白在细胞的生长和分化中起重要的作用,其编码的蛋白分子量约为Ｍｒ２１０００,称Ｐ２１蛋白,Ｐ２１蛋白位于细胞浆膜内面．具有与鸟苷酸结合的能力和ＧＴＰ酶的活性,参与膜的信号传递［１］．癌基因ｒａｓ突变,特别是第１２,１３和６１密码子部位的点突变可使细胞发生恶性转化［２］．消化道肿瘤,尤其是结肠癌,有较高的ｒａｓ基因突变发生率［１,２］,但是有关食管癌和ｒａｓ基因变化的关系的研究报道不尽一致［３,４］．我们通过对我国食管癌高发区食管癌组织中癌基因ｒａｓ蛋白的研究,进一步了解不同地区食管癌…     

大肠癌组织中血管内皮生长因子的表达及意义

目的 探讨血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）在大肠癌组织中的表达及其与大砀癌发展的关系。方法 应用名单组织化学ＬＳＡＢ法检测５２你人大肠癌组织的ＶＥＧＦ表达,分析ＶＥＧＦ与大肠癌组织类类型、分化程度、Ｄｕｋｅｓ分期及淋巴结转移毕率随关大肠癌Ｋｕｋｅｓ分期的进展而增加,且Ｄｕｋｅｓ Ｃ期的ＶＥＧＦ表达率与ＤｕｋｅｓＡ期相比有显著性差异（Ｐ〈０．０５）,ＶＥＧＦ在有淋巴结转移组的４０．００％（Ｐ〈０．０１）     

食管鳞癌组织中肿瘤抑制基因maspin表达的初步研究

目的 :探讨食管鳞癌组织中新肿瘤抑制基因maspin的变化。方法 :采用免疫组化ABC方法测定食管癌高发区食管癌组织中肿瘤抑制基因maspin蛋白的表达状况。结果 :食管癌组织中maspin免疫阳性表达率为 10 % ( 3/ 30 ) ,免疫阳性反应主要位于癌组织的细胞浆中。结论 :肿瘤抑制基因maspin可能在食管癌变过程中起一定作用     

食管癌变过程中p53、BrdU、P21waf1和PCNA 蛋白表达的变化

目的:探讨食管癌及癌前病变组织中p53、P21waf1、PCNA及S期细胞标记指数(BrdU)表达的变化.方法:采用免疫组化ABC法对食管癌高发区无症状食管活检组织179例(正常上皮31例,基底细胞过度增生(BCH)117例,不典型增生(DYS)31例)、食管癌手术切除标本26例以及同一个体食管癌手术标本37例及相应癌旁组织中(正常上皮7例,BCH 29例,DYS 23例)p53、PCNA、BrdU和P21waf1进行检测.结果:不同个体和同一个体病理形态学相似的食管正常、各级癌前病变和癌组织中p53、P21waf1、PCNA和BrdU蛋白表达变化相似.随病变程度加重,PCNA、p53和BrdU阳性细胞数均呈上升趋势,但P21waf1呈下降趋势(P＜0.05).BrdU阳性表达与食管癌患者的年龄、性别、分化程度、肿瘤浸润程度及淋巴结转移均无关(P＞0.05).p53蛋白表达与食管癌患者淋巴结转移有关(P＜0.05),与其他指标无关;P21waf1的表达与细胞分化程度有关(P＜0.05);PCNA的表达与细胞分化程度和淋巴结转移有关(P＜0.05).结论:不同个体和同一个体食管癌变过程中存在相似的分子变化.在食管癌变过程中p53蛋白可能起重要的促进细胞增生的作用;P21waf1可能是一个重要的保护因子.     

河南贲门癌高发区贲门癌组织ATP7B的表达

目的:了解贲门癌组织中ATP7B的表达情况.方法:采用免疫组化ABC法检测49例河南贲门癌高发区贲门癌及其相应癌旁正常组织中ATP7B的表达.结果:ATP7B在贲门癌组织中阳性表达率为51%(25/49),高于癌旁正常组织中的29%(14/49),差异有统计学意义(x2=5.15,P＜0.05).贲门癌组织ATP7B表达与肿瘤体积、淋巴结转移和远处转移无关,而与肿瘤分化程度有关.结论:ATP7B在贲门癌对铂类抗肿瘤药的先天耐药形成过程中发挥了重要作用,ATP7B可作为贲门癌的预后判断指标.     

食管癌高/低发区1981～2010年882例原发性食管腺癌临床病理特征和家族史变化初步分析

目的探讨1981年至2010年食管癌高/低发区原发性食管腺癌(esophageal adenocarcinoma,EAC)临床病理特征和家族史变化,加深对EAC发病流行特征的了解。方法 882例EAC资料来自河南省食管癌重点开放实验室食管癌资料库,利用SPSS软件进行频率描述和卡方检验,采用Kaplan-Meier生存曲线和单变量Log Rank检验评估EAC生存期。结果 882例EAC临床病理分析显示:EAC明显以男性患者为主(男∶女=2.9∶1),50～60岁为高发年龄段(69%);家族史阳性率26%;首次确诊的患者中,95%以上为中、晚期;发生部位以食管中(49%)、下段(46%)为主;肿瘤大体类型以溃疡型最常见(54%),其次为髓质型(19%);肿瘤分化程度以低分化为主(59%),其次为中分化(33%),高分化少见(8%);近半EAC患者确诊时已发生淋巴结转移(48%)。对其中150例随访结果显示:EAC 5年生存率为20%,淋巴结转移是影响EAC生存期的主要危险因素(χ2=14.539,P<0.05)。按确诊年代,将患者分成前(1981～1990年)、中(1991～2000年)和后(2001～2010年)十年3个时间段进行比较分析显示:食管下段EAC检出率呈下降趋势(75%,43%和44%,χ2=17.876,P<0.05);淋巴结转移阳性检出率呈下降趋势(56%,56%和43%,χ2=7.565,P<0.05);临床早期EAC检出率呈上升趋势(3%,4%和5%,χ2=12.266,P<0.05);低发区EAC呈明显上升趋势(28%,25%和62%,χ2=74.635,P<0.05)。结论 EAC多发于食管中、下段,以溃疡型、中晚期、低分化癌为主,易发生淋巴结转移,5年生存率为20%;EAC在食管癌高/低发区的构成比相近,提示EAC地区分布可能有别于食管鳞癌(ESCC);近1/3EAC患者肿瘤家族史阳性提示遗传因素在EAC的发病过程中起一定的作用。     

熊果酸对食管癌KYSE105细胞增殖、凋亡的影响

目的 探讨熊果酸(ursolic acid,UA)对人食管癌KYSE105细胞增殖、细胞凋亡的影响及其分子机制.方法 应用0～50μmoL/L熊果酸处理KYSE105细胞24～72 h后,采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测细胞增殖抑制率;流式细胞术(FCM)检测KYSE105细胞周期及凋亡率;RT-PCR检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 as-sociated X protein,bax)及细胞周期素D1(cyclinD1)mRNA的表达.结果熊果酸作用后KYSE105细胞生长明显减慢,抑制率8.55%～89.48%(P<0.05),呈时间-剂量效应关系,使细胞周期阻滞在G0/G1期,凋亡率16.62%～21.54%(P<0.05).bax mR-NA表达升高,bcl-2、cyclinD1 mRNA表达下调(P<0.05).结论 熊果酸能明显抑制KYSE105细胞的增殖,诱导其凋亡,其机制可能与抑制bcl-2、cyclinD1表达,同时促进bax表达有关.     

食管及贲门癌变患者亚甲基四氢叶酸还原酶、胸腺嘧啶合成酶基因多态性分析

目的:探讨血清叶酸代谢关键酶亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)与胸腺嘧啶合成酶(TS)基因多态性与食管及贲门癌易感性的关系.方法:选取安阳地区病理证实的275例食管鳞癌(SCC)及129例贲门腺癌(GCA)患者和315例年龄性别与其匹配的正常对照人群,采用PCR基础上的限制性片段多态检测法(PCR-RFLP)对其NTHFR和TS各基因型进行分析.结果:①对照组MTHFR677 CC、CT及TT基因型的分布频率分别为24%、45%和31%;SCC组分别为19%、38%和43%;GCA组分别为19%、35%和46%.对照组TSER3R/3R(4R)、2R/3R及2R/2R基因型的分布频率分别为64%、34%和2%;SCC组分别为62%、35%和4%;在GCA组,分别为63%、30%以及7%.②与MTHFR677 CC及MTHFR677 CT两基因型相比,TT携带者患SCC的危险度升高1.62倍(OR=1.62,95%可信区间(CI)为1.15～2.30,P=0.006),而GCA OR=1.81(95%CI为1.17～2.81,P=0.008).③与其他基因型相比,纯合突变型(TSER 2R/2R)患SCC的危险度升高2.44倍(OR=2.44,95%CI为0.89～6.73,P=0.084),患GCA的危险度升高3.94倍(OR=3.94,95%CI为1.29～12.0,P=0.016).④相对于无基因突变者,仅有MTHFR677 TT者患SCC的危险度升高1.60倍(95%CI为1.13～2.28),患GCA的危险度升高1.84倍(95%CI为1.17～2.88),仅有TSER 2R/2R者患SCC的危险度升高1.89倍(95%CI为0.62～5.79),差异无统计学意义,但患GCA的危险度升高3.56倍(95%CI为1.03～12.3),双突变型组合(MTHFR677 TT和TSER 2R/2R)携带者在SCC组中占1.5%,在GCA组中占3.1%,在对照组中未检测到.结论:突变型MTHFR677 TT及TSER 2R/2R增加安阳地区人群SCC与GCA的易感性,当二者共同存在时,肿瘤的易感性更高.MTHFR与TS基因多态的存在可能是SCC与GCA地理分布一致性的遗传学基础之一.