缺血预适应KATP通道的实验研究

目的探讨KATP通道在缺血预适应（ischemic preconditioning，IP）中所起的作用。方法建立在体犬鼠缺血再灌（ischemia／reperfusion，IR）模型，将60只犬鼠随机分为5组：缺血再灌（IR）组，缺血预适应（IP）组，尼可地尔（NIC）组，格列苯脲（GLI）组，5-HD组。分别测定各组的心肌梗死范围，血清CK，LDH浓度，监测各组心电图，应用透射电镜观察其超微结构的变化。结果相对与IR组，IP组明显的减少了心律失常分值和室颤发生率（P〈0．05），而5-HD组，NIC组则有加重心律失常发生的趋势；相对IR组，NIC组可部分模拟IP作用，而5-HD组则完全取消了IP的抗心肌缺血的保护作用。结论KATP通道可能是IP发生的效应器；线粒体KATP通道特异性阻滞剂能阻断KATP通道的抗心肌缺血的作用，推测至少在缺血阶段，线粒体KATP通道在IP中发挥了主要的作用。     

Antiapoptotic Mechanism of Insulin in Reoxygenation-induced Injury in Cultured Cardiomyocytes of Neonatal Rats

To examine the protective effect of insulin on reoxygenation-induced injury and explore the underlying mechanisms, the model of anoxia/reoxygenation （A/R） injury was established by inducing anoxia for 2 h and reoxygenation for 4 h in cultured cardiomyocytes of neonatal rats. The rats were randomized to four groups receiving vehicle, insulin, LY294002, insulin plus LY294002 at the onset of reoxygenation after 2 h of anoxia. At the end of reoxygenation of 4 h, activity of lactate dehydrogenase （LDH） and content of malondialdehyde （MDA） were spectrophotometrically determined, apoptosis of cardiomyocytes were detected by using TUNEL and DNA Ladder, and Western blotting was employed to examine the expression of phosphorylated Akt in all groups. Our results showed that compared with vehicle-treated group, activities of LDH, contents of MDA, apoptosis index （AI） were significantly decreased, and expression of phosphorylated Akt was increased significantly in insulin-treated group. However, changes in LDH, MDA, AI and phosphorylated Akt resulting from insulin were attenuated or abolished by LY294002 （PI3K inhibitor）. These data strongly suggest that early administration of insulin at reoxygenation protects cardiomyocytes from reoxygenation-induced apoptosis through PI3K/Akt signaling pathway.     

蝙蝠葛碱对豚鼠缺氧心脏释放去甲肾上腺素量的影响

为探讨蝙蝠葛碱(Dau)对缺氧心脏去甲肾上腺素(NE)释放的影响,运用高效液相色谱 电化学法测定不同缺氧条件下豚鼠离体心脏流出液中NE含量. 结果显示：Dau组(n=13)停灌时心脏NE释放显著低于对照组(n=11, P<0.01);在低氧灌注,低氧酸性灌注及低氧高钾灌注电刺激时,Dau组(n=12-13)心脏NE释放明显低于对照组(n=11-12, P<0.001). 表明Dau可抑制缺氧心脏NE的释放.     

叶酸降低高同型半胱氨酸大鼠主动脉内皮黏附分子VCAM-1表达

目的:探讨叶酸治疗对高蛋氨酸(MET)喂养所致的高同型半胱氨酸(HHCY)血症大鼠主动脉内皮黏附分子VCAM-1表达的影响. 方法: SD大鼠30只随机分3组: 正常对照组(Control组), 高蛋氨酸组(MET组)和蛋氨酸 叶酸组(MET Folate组), 每组10只,分别给予普通饲料,普通饲料加17 g/kg蛋氨酸,普通饲料加17 g/kg蛋氨酸和0.06 g/kg的叶酸,饲养45 d,测定血浆总同型半胱氨酸浓度(HCY),分别采用免疫组织化学染色法及RT-PCR法检测大鼠的主动脉VCAM-1蛋白及mRNA表达. 结果:高MET组血浆HCY浓度明显高于Control组[(140.7±36.9) μmol/L vs (6.5±1.1) μmol/L, P＜0.05],MET Folate组血浆HCY浓度明显低于高MET组[(50.6±21.8) μmol/L vs (140.7±36.9) μmol/L, P＜0.05];在高MET组中,主动脉内皮表达的细胞黏附分VCAM-1在蛋白及mRNA水平均较Control组明显增加,而MET Folate组减少蛋氨酸饮食诱导的HHCY血症所致的主动脉内皮表达的细胞黏附分子VCAM-1表达. 结论: 补充叶酸显著降低血浆HCY水平,也降低HHCY大鼠主动脉内皮细胞黏附分子VCAM-1的表达.     

胰岛素对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用及机制研究

目的 探讨胰岛素对大鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用及其保护机制。方法 结扎SD大鼠左冠状动脉前降支（LAD）．建立大鼠缺血再灌注模型，将48只SD雄性大鼠随机分组为：缺血再灌注对照组（18只），假手术组（12只），胰岛素处理组（18只），分别给予生理盐水、冠脉穿线（不结扎）、胰岛素干预。在再灌注结束后，检测心肌组织中丙二醛（MDA）含量、血清中乳酸脱氢酶（LDH）活性、心肌梗死范围（IS／AAR％）及心肌细胞凋亡指数（AI），并进行组间比较。结果 与缺血再灌注对照组相比，胰岛素处理组可明显降低MDA（P〈0．05）、LDH值（P〈0．01），减少心肌IS／AAR％和AI（P〈0．01）。结论 胰岛素对大鼠再灌注心肌损伤具有保护作用，其保护机制可能与抑制细胞凋亡及抗氧自由基作用有关。     

蝙蝠葛碱减轻家兔快速心房起搏间隙连接蛋白40降解

目的：观察家兔快速心房起搏所致的心房肌间隙连接蛋白40（connexin 40, Cx40）的改变及蝙蝠葛碱（DAU）的防治效果。方法：40只家兔随机分为3组：对照组（n=8）、DAU组（n=8）、起搏组（n=12）、起搏+DAU组（n=12）。经颈内静脉将电极置入右心房，后两组以600 beat/min行快速心房起搏，同时DAU组和起搏+DAU组于快速起搏前30 min按5 mg·kg^-1静脉给予DAU，另两组给等容量的生理盐水。连续刺激8 h后开胸取右心耳组织，分别用生化方法检测心房肌Na⁺、K⁺和Ca²⁺含量，用Western blot检测心房肌Cx40含量，并用透射电镜观察超微结构。结果：起搏组心房肌Na⁺、Ca²⁺含量高于对照组和DAU组，而Cx40及K⁺含量低于对照组和DAU组（P<0.01），心房肌细胞超微结构损伤明显。起搏+DAU组心肌Na⁺、Ca²⁺含量低于起搏组（P<0.05，P<0.01），而Cx40和K⁺含量高于起搏组（P<0.05，P<0.01），Cx40的降解和心房肌细胞超微结构损伤轻于起搏组。结论：钙超载可能参与持续快速心房起搏引起的Cx40降解。DAU能明显减轻快速心房起搏引起的Cx40的降解，对快速起搏导致的心肌细胞损伤有拮抗作用。     

右心导管术对静脉血中循环内皮细胞的影响及临床意义

目的 :观察右心导管术对静脉内皮的影响 ,明确其机制及临床意义。方法 :1 2例行右心导管术的患者 ,手术前后分别采静脉血 4.5 ml,用五步法分离脱落的静脉内皮细胞 ,免疫荧光法鉴别 ,光镜计数。结果 :右心导管术后循环内皮细胞计数明显高于术前 (P <0 .0 0 1 ) ,但其数量变化与手术时间无线性关系。结论 :右心导管术对静脉内皮有机械损伤。     

血管紧张素Ⅱ预处理对体外大鼠缺血再灌注心肌的保护作用

目的 :研究血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )预处理是否对缺血 /再灌注 (I/R)心肌有保护作用 ,其作用是否通过蛋白激酶C(proteinkinaseC ,PKC)及线粒体ATP依赖性钾通道 (KATP)而起作用。方法 :4 0只SD大鼠 ,随机分为 5组 (每组各 8只 ) :AngⅡ预处理组 (APC组 )、缬沙坦加AngⅡ预处理组 (VAPC组 )、PKC阻滞剂chelerythine加AngⅡ预处理组 (CLT组 )、线粒体KATP通道阻滞剂 5 Hydroxydecanoate加AngⅡ预处理组 (5 HD组 )和对照组(C组 )。应用Langendorff主动脉逆行灌流的体外大鼠I/R心脏模型 ,观察各组大鼠I/R后心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)及肌酸激酶 (CK)漏出率、心肌组织三磷酸腺苷 (ATP)含量及心功能指标 (LVSP与±dp/dtmax)。结果 :APC组CK、LDH漏出率较C组明显减少 (P <0 .0 1) ,心肌ATP含量较C组增加 (P <0 .0 1) ,心功能 (LVSP与±dp/dtmax)较C组改善。VAPC组、CLT组及 5 HD组上述各指标 (LDH、CK、ATP、LVSP及±dp/dtmax)分别与C组相应的各指标比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :AngⅡ预处理对I/R心肌有保护作用     

卡维地洛和庚醇对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究卡维地洛（CVD）、庚醇（HT）在缺血再灌注心肌损伤中作用。方法通过建立的心脏缺血再灌注模型，采用2％氯化三苯四唑（TTC）染色测量心肌梗死的重量，监测心肌型肌酸激酶同功酶（CK—MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）等的变化。观察CVD、HT对心肌梗死的影响。结果在缺血30min，再灌注6h后，CVD减少CK—MB、LDH及MDA的释放，稳定NO的分泌。HT组在一定程度上也减少了LDH、CK—MB的释放，但对NO、MDA的释放似乎没有太大影响。CVD组的大鼠梗死心肌仅占左心室心肌重量的（6．2±1.1）％，比对照组减少了51.6％。HT组梗死心肌占左心室心肌重量的（7．4±1.0）％，比对照组减少了42．2％。HE常规染色发现CVD组心肌细胞损伤程度明显减轻，粒细胞浸润也明显减少，大部分仅表现肌纤维肿胀和断裂。CVD可以防止内皮型一氧化氮合酶的减少。电镜下，CVD组和HT组心肌润盘肌丝、线粒体等损伤较轻。结论CVD通过B受体拮抗、抗氧化等方面的作用来保护心肌。HT可能是使缝隙连接可逆性解藕联产生心肌保护作用。     

丹参酮ⅡA磺酸钠对家兔快速心房起搏时心房动作电位及有效不应期的影响

研究丹参酮ⅡA磺酸钠(TSN)对家兔短期快速心房起搏时在体心房单相动作电位(AMAP)及心房有效不应期(AERP)的影响,探讨其防治心房颤动的可能机制。家兔24只,随机分为对照组与TSN组各12只。将电极经颈内静脉置入右房记录AMAP,观察基础状态下、给药后0.5h及以600次/分心房快速起搏后0.5,8hAMAP及其频率适应性的变化。结果:与起搏前相比对照组在S1S1200ms刺激时测量的AERP(AERP200)在起搏后0.5h缩短21.2ms,起搏后8h缩短21.6ms(P<0.05),且心房肌的频率适应性丧失。TSN在基础状态下对AMAPA、AMAPD无明显影响,但使AERP200由105.9±3.8ms延长至114.7±7.2ms(P<0.05)。起搏后TSN组维持原有的心房肌频率适应性。结论:快速心房起搏使心房肌的频率适应性丧失而致电重构,TSN能减轻短期快速心房起搏所致电重构。