不同内固定材料对兔胫骨骨折局部转化生长因子β1信使RNA表达的影响

背景：转化生长因子β是一族多功能的蛋白多肽，在骨折愈合过程中起作用的主要为转化生长因子β1。不同的内固定材料对骨折愈合的影响不同，其影响程度如何是判定内固定材料优劣的一个重要评定指标。目的：通过不同内固定材料固定后骨折愈合不同阶段转化生长因子β1mRNA的表达，了解转化生长因子β1mRNA的细胞内定位，借此探讨不同内固定材料对骨折愈合过程中骨折局部转化生长因子β1mRNA的表达的影响。设计：随机对照观察。单位：解放军第二军医大学长海医院骨科、病理科。材料：实验于2000-03／2001-07在第二军医大学实验动物中心和骨科实验室完成。选用新西兰兔42只，所有动物均随机抽取，雌雄不限，按内固定物分成两组：矩形髓内钉组；不锈钢接骨板组，每组动物21只。方法：以矩形髓内钉与不锈钢接骨板固定兔胫骨制作骨折内固定模型，骨折内固定部位为兔左胫腓骨交界下2mm处。手术前后用市售动物颗粒饲料分笼喂养，饮用自来水，自由活动，不用外固定。每组动物于内固定手术后1．3．7，14，21，28d分别处死3只，取骨折端骨痂及周围组织标本，进行组织切片和原位杂交处理。主要观察指标：观测并记录组织切片中不同细胞内的转化生长因子β1mRNA染色阳性强度和阳性面积比，显示兔骨折愈合过程中骨痂中转化生长因子β1mRNA的分布和含量。结果：共用实验动物42只，腹泻死亡3只，伤口局部感染骨外露3只，共6只未纳入结果分析，矩形髓内钉组和不锈钢接骨板组各3只，进入结果分析动物数36只。①在骨折早期，矩形髓内钉组和不锈钢接骨板组局部的细胞和间质中转化生长因子β1mRNA均无表达；7d后间充质细胞、成骨细胞、成软骨细胞中有转化生长因子β1mRNA阳性表达。②矩形髓内钉组和不锈钢接骨板组转化生长因子β1mRNA阳性染色强度、阳性面积比及阳性指数术后14d最高（12．36&;#177;0．58，0．19&;#177;0．05，2．35&;#177;0．20：10．24&;#177;0．65，0．13&;#177;0．03，1．33&;#177;0．10），28d最低（4．24&;#177;0．57，0．06&;#177;0．02，0．25&;#177;0．08：3．31&;#177;0．27，0．03&;#177;0．01，010&;#177;0．02），同期比较除术后7d阳性面积比外，其余矩形髓内钉组均高于不锈钢接骨板组，组问差异显著（P〈0．05，P〈0．01）。结论：矩形髓内钉较不锈钢接骨板更能促进细胞分泌转化生长因子β1,有利于骨折愈合。     

结构蛋白及血管形成因子在体表海绵状静脉畸形中的表达及意义

背景：体表海绵状静脉畸形，又称为海绵状血管瘤，是一种较常见而难治的血管疾病，目前对其发病机制了解甚少。目的：研究结构蛋白及血管形成因子在体表海绵状静脉畸形(caverilous venous malformation。CVM)中的表达及意义。设计：研究CVM病理标本中的结构蛋白和血管形成因子的表达。用正常中型静脉和小静脉标本作为对照，半定量分析结果。地点和对象：解放军第二军医大学附属长海医院：1996／2000间手术切除的CVM病理标本25例，正常中型静脉和小静脉标本各12例。干预：采用Envision法免疫组化染色观察CVM、正常中型静脉和小静脉标本中的Ⅳ-型胶原、纤维连接蛋白(Fn)、层粘连蛋白(Ln)等结构蛋白及血管内皮细胞生长因子(VEGF)、血管生成素-1(Ang-1)等血管形成因子的表达。主要观察指标：观察Ⅳ-型胶原、Fn、Ln、VEGF、Ang-1在各个标本中的表达强度，分为“-、 、 ”3个等级。结果：Ⅳ型胶原、Fn和Ln在海绵状静脉畸形与在中小静脉中的分布类似，但表达量明显少。畸形组织和小静脉的VEGF表达明显强于中型静脉，小静脉的Ang-1表达明显强于静脉畸形和中型静脉。结论：结构蛋白及血管形成因子表达变化可能是海绵状静脉畸形形成发展的重要因素。Ang-1表达减少可能参与海绵状静脉畸形的血管塑型障碍的发生。     

应用组织芯片技术研究P33ING1在胰腺癌中的表达及意义

目的探讨P33ING1 表达在胰腺癌的发生、发展中的生物学特征和临床意义.方法选取胰腺癌、癌旁组织与胰腺良性病变标本,应用组织芯片(又称组织微阵列)技术和免疫组化方法研究P33ING1、P53和MDM2在胰腺良恶性病变中的表达情况.结果 P33ING1在胰腺癌与癌旁组织中表达的阳性率分别为77.2%(129/167)、60.4%(61/101).P33ING1的阳性表达与肿瘤的分化和神经受累显著相关(P<0.05);P53的阳性表达与肿瘤的分化、淋巴结转移和神经受累均显著相关(P<0.05);MDM2的阳性表达与肿瘤的分化显著相关(P<0.05).胰腺癌组织中P33ING1与P53、MDM2的表达均呈正相关.结论 P33ING1在胰腺癌的发生发展中可能起重要作用,P33ING1与P53及MDM2的联合表达与胰腺癌的临床生物学行为有关.     

乙型肝炎病毒感染与肝细胞癌发生关系的分子病理学研究

乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染是肝细胞癌发生的重要原因之一,但确切的分子机制仍不清楚.     

腺性膀胱炎Ck19的表达及临床意义

细胞角蛋白是上皮细胞分化的特异性标志。我们应用免疫组化法研究了细胞角蛋白19（Ck19）在腺性膀胱炎组织中的表达情况，以探讨Ck19的表达与腺性膀胱炎术后症状复发的相关性。现报告如下。     

TGF-β_1和α-SMA在慢性胰腺炎组织中的表达及意义

目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在慢性胰腺炎组织中的表达及其临床病理意义.方法:应用免疫组织化学EnVisionTM法,检测TGF-β1、α-SMA在38例慢性胰腺炎及20例正常胰腺组织中的表达.结果:TGF-β1在慢性胰腺炎组织中主要表达于胰腺星状细胞(PSC)、腺泡细胞及导管上皮细胞的胞质中,而在正常胰腺组织的腺泡细胞及导管上皮细胞中则不表达;α-SMA在慢性胰腺炎组织中主要表达于胰腺血管或导管平滑肌细胞、PSC的胞质中,而在对照组的PSC中几乎不表达.TGF-β1、α-SMA的表达强度,在正常胰腺组织中要明显弱于慢性胰腺炎组织(P<0.01),并且它们的表达强度与胰腺纤维化的程度呈正相关(P<0.01).结论:TGF-β1是慢性胰腺炎胰腺纤维化过程中的关健因子,而PSC则是产生细胞外基质(ECM)的主要细胞;抑制TGF-β1的表达和PSC和活公在抗胰腺纤维化的治疗方面有着较好的前景.     

食管癌细胞核AgNOR的定量研究

对３４例新近手术切除的食管癌组织和２２例（生存５年以上和半年内复发死亡者各１１例）术后获随访病人的组织进行ＡｇＮＯＲ染色，以正常食管上皮细胞作对照。结果：正常食管上皮细胞ＡｇＮＯＲ／核均数为２．１４±０．３４，食管癌细胞为４．６４±０．６８。分化Ⅰ级的Ａｇ－ＮＯＲ／核均数为３．７１±１．７２，Ⅱ级为４．８７±０．３５，Ⅲ级为５．８４±０．７３，１例未分化者为５．８１。另外，术后生存５年以上者ＡｇＮＯＲ／核均数为４．０８±０．２６，术后半年内复发死亡者为５．４６±０．６５。结果提示ＡｇＮＯＲ计数与食管癌细胞的分化程度和预后有关。     

膀胱癌组织中癌基因ras和C—erbB—2蛋白产物的免疫组织化学研究

采用免疫组织化学ＡＢＣ方法检测５６例膀胱癌组织中的癌基因ｒａｓ和Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白产物，有３０例和１９例分别呈ｒａｓ和Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白产物表达阳性，ｒａｓ表达在分化较高、表浅性和非复发性肿瘤中高于分化较差、浸润性和复发性，而Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白表达在高分级、浸润性和复发性肿瘤中较高。ｒａｓ和Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白产物表达与膀胱癌组织分级、临床分期和复发密切相关。     

p53，rasp21，C－erbB－2癌基因蛋白在胃癌中的表达及分布特征

作者应用免疫金银染色（ＩＧＳＳ）方法检测了８２例胃癌标本ｐ５３，ｒａｓｐ２１，Ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因蛋白。其阳性结果分别为５６．１％，５１．２％，５８．５％，胃癌旁正常粘膜上皮的阳性率分别为１．２％，１４．６％，９．８％，与肿瘤区相比较有显著差异（Ｐ＜０．０１）。ｐ５３阳性细胞的染色部位在细胞核内，ｐ２１及ｐ１８５阳性细胞的染色部位在胞浆及／或胞膜。ｐ５３、ｐ１８５阳性表达与肿瘤的分化程度有关，即分化越差，其阳性表达越高。８２例胃癌中有３６例显示ｐ５３与ｐ２１协同阳性。而无１例单独ｐ５３表达阳性。     

含CD44 cDNA片段细胞系的构建及在肝癌中的应用

目的构建含ＣＤ４４ｃＤＮＡ质粒ＰＧＥＸ２Ｔ和ＰＡＺ的单克隆细胞系．并利用此细胞系合成特异的ＣＤ４４ｃＤＮＡ探针，原位检测肝癌中ＣＤ４４ｍＲＮＡ的表达．方法应用常规的质粒转化方法将质粒ＰＧＥＸ２Ｔ和ＰＡＺ转入ＤＨ５菌株中得到单克隆细胞系．并以从此细胞系中提取的质粒为模板，应用ＰＣＲ法合成ＣＤ４４ｃＤＮＡ探针．应用原位杂交法检测肝细胞癌中ＣＤ４４ｖ６ｍＲＮＡ的表达．结果从ＤＨ５１菌株中提取的质粒含ＣＤ４４（２ｖ－１０ｖ）ｃＤＮＡ（１１ｋｂ），从ＤＨ５２菌株中提取的质粒含全长的ＣＤ４４ｃＤＮＡ（１８ｋｂ），ＰＣＲ合成的ＣＤ４４ｖ６ｃＤＮＡ探针长１４０ｂｐ．ＣＤ４４ｖ６ｍＲＮＡ的阳性检出率：转移高危组为８００％（８／１０），转移低危组为２１７％（５／２３），两者相差非常显著（Ｐ＜００１）．结论从单克隆细胞系ＤＨ５１和ＤＨ５２中提取的质粒，经ＰＣＲ扩增可得到特异的ＣＤ４４ｃＤＮＡ探针．肝细胞癌中ＣＤ４４ｖ６ｍＲＮＡ的表达与肿瘤的转移倾向呈正相关．