分光光度法测定鱿鱼生殖腺提取物中总磷脂

目的建立鱿鱼生殖腺提取物中总磷脂的测定方法.方法采用乙醇提取、正己烷萃取法得到鱿鱼生殖腺提取物,浓硫酸-高氯酸法消化样品,抗坏血酸-钼蓝法测定无机磷的量,再乘以系数26.31折算成鱿鱼生殖腺提取物中总磷脂的量.结果磷在0.2～1.0μg/mL线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为95.06%,RSD为1.09%.结论该方法方便、快速、准确度较高,可用于鱿鱼生殖腺提取物中总磷脂的测定.     

响应面法优化竹柳皮总黄酮提取工艺及其抗氧化活性研究

目的:采用响应面法优化竹柳皮总黄酮提取工艺并评价其抗氧化活性。方法:采用响应面法,以总黄酮含量为指标,对提取时间,提取温度,醇提浓度等条件进行优化,确定竹柳皮总黄酮最佳提取工艺,采用DPPH自由基清除及还原力试验,研究其体外抗氧化活性。结果:优选的竹柳皮总黄酮提取工艺为:100倍量40%乙醇溶液,超声提取50min,温度为70℃,功率为40 W,该工艺条件下所得竹柳皮总黄酮含量的实测值与理论值相近。总黄酮清除DPPH自由基的IC50值为23.26μg·m L-1,还原力IC50值为252.20μg·m L-1。结论:响应面法优选的提取工艺稳定,操作简便,试验周期短,可用于工业化生产,竹柳皮总黄酮具有较好的抗氧化能力,本实验可为竹柳皮的深入开发,产业附加值的提高提供理论基础。     

斑马鱼模型在糖尿病研究中的应用

作为一种模式生物,斑马鱼具有其他动物模型所不具备的诸多优势,非常适用于进行人类疾病建模及机制研究。斑马鱼胰腺经历两次发育分化过程,其间伴有多种信号途径的活化参与。成鱼的胰腺结构与其他动物胰腺相似,能分泌包括胰岛素在内的多种激素。斑马鱼胰腺及对胰岛素敏感的肝脏、肌肉等这些与代谢调控相关的主要器官及外周组织,在进化上具有保守性,糖代谢调控机制也与其他哺乳动物相似,这使得斑马鱼非常适用于糖代谢调控研究。除利用STZ诱导胰岛β细胞凋亡造成斑马鱼糖尿病模型外,高糖溶液交替暴露及外源性干预代谢相关信号途径也可以造成斑马鱼血糖升高。成鱼血糖水平、幼鱼组织糖含量、视网膜及视网膜血管形态变化是目前斑马鱼糖尿病模型研究中的常用检测指标。     

基于斑马鱼模型的紫河车冻干粉水提物抗衰老功效研究

目的 应用斑马鱼模型评价紫河车冻干粉水提物（PHFAE）抗衰老的功效。方法 将健康产妇新鲜胎盘冷冻干燥后碾磨为粉,并使用蒸馏水进行提取,制成紫河车冻干粉水提物（PHFAE）。发育8 h （8 hpf）的AB系斑马鱼使用PHFAE（0、1、10、25 μg·mL^-1）连续作用72 h,对其体内β-半乳糖苷酶进行染色。随后将AB系与皮肤荧光转基因斑马鱼均随机分成对照组、模型组和PHFAE （1、10、25 μg·mL^-1）组,对照组给予培养水,模型组给予0.5 mmol·L^-1 H₂O₂溶液制备氧化损伤模型,PHFAE组同时给予H₂O₂与不同浓度PHFAE,连续作用72 h后,测定皮肤表面荧光斑点的数量;试剂盒法检测鱼体内活性氧（ROS）含量;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测ampk、mdm2、Cu/Zn-sod和Mn-sod的mRNA表达变化。结果 与对照组比较,1、10、25 μg·mL^-1的PHFAE组斑马鱼体内β-半乳糖苷酶的活性均显著降低（P＜0.01）;与模型组比较,1、10、25 μg·mL^-1的PHFAE显著抑制H₂O₂诱导的角质细胞的死亡（P＜0.01）,明显抑制ROS的积聚,显著升高ampk、mdm2、Cu/Zn-sod和Mn-sod的mRNA表达（P＜0.01）。结论 PHFAE通过调控ampk、mdm2、Cu/Zn-sod和Mn-sod基因的表达,提高了机体的抗氧化能力,进而发挥抗衰老之功效。