乙型肝炎病毒（adr亚型）转基因小鼠的研究

目的：制备含有2.0拷贝乙型肝炎病毒（HBV,adr亚型）基因组的转基因小鼠,为HBV相关医学问题的研究准备实验动物模型。方法：应用受精卵原核显微注射的方法,产生HBV转基因小鼠。用PCR, Southern-blotting杂交、放射免疫、免疫组织化学以及亚显微结构分析等方法,研究外源基因在转基因小鼠体内的整合、表达以及复制。应用常规病理切片及血清生物化学方法分析转基因小鼠的病理学改变。结果：得到了4只整合有HBV基因组的建立者小鼠,并证明HBV基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传,在肝、肾组织内可特异性表达、复制,并在肝细胞内发现了Dane颗粒。转基因小鼠的肝、肾组织未见明显的病理学改变。结论：获得了HBV的转基因小鼠,其病毒基因可以表达,并有病毒颗粒形成。该小鼠对于HBV的各个基因产物是免疫耐受的,其基本生物学特性与人类的HBV携带者特征相似。     

乙肝病毒adr型基因疫苗诱导小鼠体液免疫应答

目的：构建乙肝病毒adr型基因疫苗pCMVS2-S,观察其免疫小鼠的特异性体液免疫应答。方法：将构建的乙肝病毒基因疫苗注射于C57BL/6小鼠胫骨前肌肉,运用ELISA检测不同时间小鼠血清中抗HBs抗体。结果：注射基因疫苗1周后,血清中抗HBs抗体转阳,1个月后抗体达到高峰,并以高水平维持至少2个月。结论：基因疫苗pCMVS2-S诱导C57BL/6小鼠产生较好的体液免疫应答。     

宫颈癌组织中水通道蛋白1mRNA的表达及临床意义研究

目的 探讨水通道蛋白1(AQPl)mRNA在宫颈癌组织中的表达及其与肿瘤侵袭、转移的关系.方法 采用免疫组化Eli Vision法、RT-PCR技术检测20例正常宫颈组织(对照组)和89例宫颈癌患者手术切除标本组织中AQP1蛋白、AQPl mRNA的表达,应用图像分析软件分析AQPl mRNA的平均光密度和灰度值.结果 宫颈癌组织AQPl mRNA、AQP1蛋白的表达明显高于正常对照组,有淋巴转移组高于无转移组;FIGO分期Ⅲ期组明显高于Ⅰ+Ⅱ期组,差异均有统计学意义(P＜0.05).肿瘤组织中AQPl蛋白表达与肿瘤分期有关(P＜0.05),而与患者年龄及肿瘤大小无关(P＞0.05).结论 AQPl mRNA及AQPl蛋白在宫颈癌组织中呈高表达,AQPl蛋白的表达上调可能参与了宫颈癌的侵袭和转移.     

土三七致肝小静脉闭塞病1例报告

1临床资料患者,女性,37岁,因"腹痛、乏力、纳差4个月,加重伴腹胀3个月"于2009年4月16日收住入院。2008年12月中旬曾因月经不调自行服用土三七数日(具体用量不详)。2009年1月出现右上腹胀痛伴乏力纳差,自服奥美拉唑后好转。2009年2月因腹胀伴乏力纳差加重在当地医     

CYP1A1基因多态性与宫颈癌遗传易感性的关系

目的 探讨CYP1A1基因Exon7位点和Msp1位点多态性与宫颈癌遗传易感性的关系.方法 280例老年官颈癌患者为实验组,280例健康体检者为对照组,用CR-RELP技术和ASAPCR技术分别检测两组人群Msp1位点和Exon7位点的多态性.结果 两组在CYP1A1Ⅱe/Val位点分布上差异有统计学意义(P＜0.05);且携带Ⅱe/Val基因型的个体发生官颈癌的危险是携带Ⅱe/Ⅱe基因型个体的2.473倍.而两组的Mspl基因型多态性分布频率及OR值均无统计学差异(P＞0.05).结论 CYP1A1 Exon7基因多态性是发生宫颈癌的危险因素,有可能成为宫颈癌遗传易感标记物.Mspl位点多态性与官颈癌易感性可能无关.     

乙型肝炎转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.0)SMMU的生物学特征

目的：评价乙肝转基因小鼠品系C57－TgN(HBV adr2.0)SMMU生物学特征的稳定性。方法：以F6代乙肝转基因小鼠C57－TgN(HBV adr2.0)SMMU为研究对象，采用基因组DNA PCR，血清ELISA检测，Western印迹分析，免疫组织化学，血清DNA PCR，透射电镜和H－E染色的方法分析HBV基因在转基因小鼠中的整合，表达，复制和组织这变化。结果：F6代乙肝转基因小鼠基因组中稳定整合有HBV基因，肝组织中可检测用HBsAg,HBcAg和X蛋白3种病毒蛋白，血清中HBsAg和HBeAg的表达率分别为19．54％和3．39％，且在血清和肝组织中存在病毒NA和病毒样颗粒；长期的病毒DNA整合，表达和复制可以引起转基因小鼠肝，肺等组织的病理性损伤。结论：乙肝转基因小鼠品系C57－TgN(HBV adr2.0)SMMU具有基因组中稳定整合病毒DNA，血清和肝组织中有病毒蛋白表达和病毒复制的特征，并具有一定的组织这变化，作为生物医药研究的实验动物模型具有推广应用价值。     

过氧化物酶体增殖物激活受体α、γ调控长链酰基辅酶A合成酶1对肝纤维化进程的影响

在肝纤维化的发生发展进程中,过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α、γ具有调控脂代谢、脂肪酸代谢和抗肝纤维化等生物学功能,并与调控脂肪代谢的相关酶类关系密切。长链酰基辅酶A合成酶1(ACSL1)作为脂肪代谢的关键酶之一,在肝脏中参与脂质的合成与分解代谢,可引起肝脏内脂质沉积、炎症反应,并在肝脏中直接或间接促进肝纤维化进程。回顾了PPARα、γ和ACSL1各自的生物学功能与作用;简述了PPARα、γ对ACSL1的转录调控机制;从肝脏脂代谢和肝星状细胞活化等两个方面分析了PPARα、γ对ACSL1的调控作用,进而影响肝纤维化进程。从而指出在肝脏中PPARα、γ通过调控ACSL1直接或间接参与肝纤维化进程。     

医学实验技术课教学—方法学的研究与应用(摘要)

医学实验技术课教学—方法学的研究与应用（摘要）龚志锦詹熔洲戴益民余宏宇王建军（第二军医大学病理解剖学教研室，上海２００４３３）病理实验技术在医学中是一个不可缺少的重要组成部分。“方法学研究与应用”一课中，用以在本行业中具有成就的先进典型事例进行教学。...     

HBV基因疫苗诱导正常及HBV转基因小鼠产生体液免疫应答

目的:用乙型肝炎病毒(HBV)蛋白基因真核表达载体诱导正常小鼠及HBV转基因小鼠产生特异性体液免疫应答,以探讨其预防及治疗HBV慢性感染的可行性.方法:将HBV S2.S基因的真核表达载体pCMV-S2.S(PS)和相应的空载体pcDNA3.0分别免疫正常C57BL/6小鼠及同一品系HBV转基因小鼠(n=5).每只小鼠肌内注射纯化质粒100 μg.用ELISA方法检测小鼠血清抗HBs和抗preS2效价及HBV转基因小鼠血清HBsAg和HBeAg的水平.注射基因疫苗后第8周,活检取转基因小鼠肝脏组织,制备石蜡切片并行H-E染色,光镜下观察其病理改变.结果:PS诱导正常及转基因小鼠产生了抗HBs及抗preS2,并且抗preS2的出现早于抗HBs约1～2周.PS免疫8 周后,转基因小鼠血清HBsAg和HBeAg为阴性.注射基因疫苗后第8周病理检查转基因小鼠肝脏组织,肝细胞出现程度不同的广泛浊肿和水样变性,而相应的对照组无明显改变.免疫前后肝组织内单个核淋巴细胞数量无显著变化.结论:研究表明HBV中蛋白基因疫苗能够有效诱导HBsAg特异性的体液免疫应答,能够清除转基因小鼠血清中的HBsAg和HBeAg;初步的实验结果为研制治疗HBV慢性感染的基因疫苗提供了依据.