阳离子脂质体介导小干扰RNA转染EOMA细胞时转染条件的优化

目的 优化在阳离子脂质体Lipofectamine^TM2000介导下将小鼠NF-κB的小干扰RNA（siRNA）转染入EOMA细胞时的转染条件.方法 将1.0 μl和1.5 μl的Lipofectamine^TM2000与20 pmol、30 pmol、40 pmol、50 pmol 、60 pmol的带荧光标记的siRNA分别组合,制备成相应的转染混合物,转染小鼠血管瘤内皮细胞（EOMA细胞）,于转染24 h后在荧光显微镜下计数阳性细胞率、MTT法检测各转染条件下EOMA的细胞活性.结果 在siRNA量相同的情况下,分别采用1.0 μl和1.5 μl的Lipofectamine^TM2000进行转染其转染效率、细胞毒性无明显差异（P＞0.05）;转染混合物中siRNA浓度为50 pmol时,转染效率最高达到86%,继续增加siRNA的浓度,转染效率提高并不明显;siRNA浓度为60 pmol时转染混合物表现出较高的细胞毒性.结论 以1.0 μl Lipofectamine^TM2000与50 pmol的siRNA组成转染混合物可以实现对EOMA细胞高效转染并保持较高的细胞活性.     

三种阳离子转染试剂对小鼠血管瘤内皮细胞转染效率及细胞毒性的影响

目的 从三种常用的阳离子转染试剂中筛选出对小鼠血管瘤内皮细胞(EOMA)有较高转染效率和较低细胞毒性的转染试剂.方法 以含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体pEGFP-N1为报告基因,以阳离子脂质体LipofectamineTM2000、LipofectamineTM PLUS和阳离子聚合物JetPEITM为转染试剂,按照转染试剂盒的说明优化其转染条件,分别转染EOMA细胞,24 h后在荧光显微镜下计数阳性细胞率、MTT法检测各转染条件下对EOMA的细胞毒性.结果 经优化转染条件,LipofectamineTM PLUS和JetPEITM转染的细胞中阳性细胞的最高比例分别为45%和47%,LipofectamineTM2000转染的细胞中荧光蛋白表达的比例最高(＞80%),Lipofecta-mineTM2000试剂在最高转染效率的剂量下仍然保证了80%的细胞存活率.结论 阳离子脂质体LipofectamineTM2000对小鼠EOMA细胞有较高的转染效率和较低的细胞毒作用.     

原位心脏移植围手术期处理的几点体会

一、临床资料患者女性 ,44岁 ,体重 67ｋｇ ,Ａ型血 ;因反复胸闷、气急 3年 ,加重 4个月入院 ,诊断为扩张性心肌病、全心衰 ,心功能Ⅲ～Ⅳ级。体检 :血压 80 / 65ｍｍＨｇ ,心率 78次 /ｍｉｎ ,肺动脉瓣第一音分裂 ,第二音亢进 ,心影明显增大 ,心尖区Ⅰ～Ⅱ级收缩期杂音 ,肝肋下 4ｃｍ ,双下肢轻度凹陷性水肿。辅助检查 :(1)胸部Ｘ线检查 :心影明显增大 ,心胸比0 .8,以右室、左室大为主 ,两肺淤血。(2 )ＥＣＧ :频发室早。 (3 )超声心动图检查 :左心房内径 44ｍｍ ,室间隔 6ｍｍ ,左室后壁 8ｍｍ ,射血分数 0 .3 1。 (4 )右心导管检查 :肺动…     

24例50岁以上房间隔缺损手术治疗分析

目的总结50岁以上(以下简称“老年”)继发孔型房间隔缺损(ASD)外科手术治疗及术后处理的经验。方法回顾性分析经外科手术治疗的24例50岁以上ASD的病例。结果全组病例无手术死亡,无神经系统及其他脏器严重并发症。结论老年房缺一经诊断,只要不并发严重的肺部血管病变,无论有无症状,均应考虑手术治疗,术中注意缺损的修补方法及房室瓣的成形,大龄房缺患者心律失常的发生率高,术后需加强抗心律失常的治疗。     

心脏移植围手术期血液透析的时机初探

心脏移植手术后4例中，2例术后出现急性肾功能衰竭(ARF)，均进行了血液透析。结果，1例经透析等对症治疗后痊愈出院，另1例因晚期的不可逆的脑损害死亡。认为在心脏移植围手术期出现急性肾功能衰竭迹象时，积极血透可取得较好的效果。     

全肺切除术后并发心律失常32例分析

心律失常是全肺切除术后常见的并发症之一。 1999年1月～ 2 0 0 1年 12月我们共为 113例患者施行了全肺切除术 ,术后发生心律失常 3 2例 ,占 2 8.3 %。现分析报告于下。1　临床资料113例中 ,男 79例 ,女 3 4例。年龄 3 4～ 71岁 ,平均 5 8.4岁。左全肺切除术 86例 (占 76.1% ) ,右全肺切除术 2 7例(占 2 3 .9% )。术前有基础心脏病者 3 8例 (占 3 3 .6% )。 113例术后均入ＩＣＵ病房 ,常规鼻导管吸氧 4Ｌ/ｍｉｎ ,均使用惠普系列监护仪 2 4ｈ心电监护。3 2例心律失常中 ,发生于术后 3ｄ内 2 7例 (占 84.3 % ) ,其中发生于术后 2 4ｈ内 13例 …     

外科手术治疗冠心病的临床疗效分析

目的：探讨冠状动脉搭桥术的外科手术及临床治疗效果。方法回顾分析2012年3月至2013年12月冠心病患者64例临床资料。结果死亡2例（3.1%）,并发症发生率7.8%（5/64）,平均搭桥（2.4±0.3）支,左乳内动脉使用率93.4%（57/61）。全组随访5个月~1年。结论科学的外科策略,精湛的手术技术及麻醉、体外循环技术的改进,使CABG术的病死率和并发症明显下降,效果满意。     

瓣膜病变合并心脏恶液质患者的围手术期处理

目的 总结瓣膜病变合并心脏恶液质(SOCC)的外科围手术期治疗体会.方法 回顾性分析了15例合并心脏恶液质的瓣膜手术病例.结果 15例患者术后存活13例,早期死亡2例,死亡原因1例为多器官功能衰竭,另1例为呼吸功能衰竭伴重度肺部感染,其余患者痊愈出院.结论 对于瓣膜病变合并心脏恶液质患者,需要充分重视术前准备、手术时机的选择、术后营养支持及多器官功能的维护.     

猪到猴异种胸腺修饰对受体心脏移植物存活时间及外周血T细胞的影响

目的通过猪-猴心脏移植模型来探讨异种胸腺修饰对移植物存活时间的影响,并在此基础上,研究异种器官移植中T细胞的作用及诱导异种T细胞中枢性耐受的可能性。方法将受体(中国猕猴)分为4组:(1)空白组:对受体不作任何处理。(2)照射组:于心脏移植前30 d(d30),接受60Co 3Gy全身剂量,余同空白组。(3)胸腺注射组:于心脏移植前21 d(d21),胸腺内注射供体脾细胞(5×107),余同空白组。(4)照射+胸腺注射组(8只):于心脏移植前28 d(d28),即1.5月龄时接受60Co 3Gy全身剂量,心脏移植前21 d(d21),胸腺内注射供体脾细胞(5×107),余同空白组。结果照射+胸注组存活期较空白组明显延长(P<0.01),照射+胸注组存活期较胸注组和照射组延长(P<0.05)。CD4+、CD8+与同期未照射的另两组相比有显著性差别(P<0.01),但照射的两组同期相比差别不大(P>0.05)。照射+胸腺注射组于手术当天MLR刺激效应较空白组、照射组下降明显(P<0.01),同时单独胸腺注射组与照射组、照射+胸腺注射组相比,刺激效应也有所下降(P<0.05)。结论(1)异种胸腺修饰对CD4+、CD8+T细胞亚群的生成与分布情况并无影响,但其针对异种抗原反应能力有所下降。(2)异种胸腺注射可支持T细胞的重建和诱导供体特异性的T细胞功能抑制或耐受,并有效地延长供心存活时间。     

止血芳酸在体外循环心脏瓣膜置换术中的应用

目的探讨止血芳酸在心肺转流(CPB)心脏瓣膜置换手术中的临床应用价值。方法CPB心脏瓣膜置换手术患者44例中,21例术中给予止血芳酸50mg/kg(A组),23例不用止血芳酸(B组)。比较两组患者术后引流液量、引流管拔除时间、术后输血量。结果 A组术后引流液量和术后输血量均显著少于B组[(934.33±196.95)ml vs.(1542.96±1315.75)ml和(966.67±478.89)ml vs.(1410.87±914.52)ml](P<0.05)。结论大剂量止血芳酸能明显减少CPB心脏瓣膜置换手术后的失血、输血量。