一种快速简便的血浆脂蛋白分离方法

目前 ,较常用的血浆脂蛋白分离方法有固定角头密度梯度超速离心和甩头等密度超速离心 2种方法。但其缺点较多 ,如步骤繁琐 ,不宜操作 ,费时 (长达 2 4～ 72ｈ) ,也不经济 ,尤其对微量血浆中各种脂蛋白成分的分离和定量受到限制。我们用的血浆脂蛋白分离方法与国际上大多数实验室分离血浆脂蛋白所用的序列超离心法相比有以下不同 :将 2种密度梯度液简化成只用 1种液体 ;将 70 0 0 0ｒ/ｍｉｎ ,4ｈ的离心条件简化为只用 1 0 0 0 0 0ｒ/ｍｉｎ ,2ｈ ;同时 ,最小上样量由原来的3ｍｌ缩小到 6 μｌ,因此更简便、快速和经济。一、材料和方法1 .材…     

兔血清高密度脂蛋白载脂蛋白A-I的制备

免血清先经硫酸右旋醣酐沉淀、浓缩HDL,然后再超速离心分离HDL,经脱脂后再进行大柱床体积Sepha-dex G-150凝胶柱层析,较大批量地分离apoA-I,一次可获碍纯品数百毫克,经鉴定为apoA-I.可满足实验室或临床对apoA-I大量使用的需要。     

SARS-CoV恒河猴模型动物中组织病理学动态变化

目的在感染的8只恒河猴的SARS-CoV模型动物中,观察肺等组织中出现的系列病理学改变,为针对抗SARS药物筛选、疫苗评价中的免疫病理反应等奠定实验依据。方法SARS-CoV经鼻腔接种8只恒河猴,在感染的第5、7、10、15、20、30和60天,分别安乐处死动物,组织病理取材,制片,观察。结果经病毒分离和RT-PCR证实动物感染是成功的。系列病理改变表明,早期肺组织可见间质性肺炎,水肿、结构破坏、出血,巨噬细胞浸润;后期出现内皮细胞受损及再生,透明膜形成,小血管玻璃样变,肺组织纤维化及肺气肿形成,肺泡网状纤维和弹力纤维破坏并增生等,脾脏、淋巴结生发中心早期有萎缩,后期有恢复等病理学改变均和SARS患者相似。结论感染恒河猴出现与SARS患者类似的临床和病理学改变,为进一步研究该病毒的病原特性、发病机理、药物筛选、疫苗评价等方面的研究奠定了重要基础。     

高脂血清对易感和不易感动脉粥样硬化动物的动脉平滑肌细胞生长的影响

体外培养家兔和树鼩为主动咏平滑肌细胞,分别观察各自的高脂血清对平滑肌细胞生长的影构,以~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H—TdR)掺入细胞DNA,用液体闪烁计数器计数。结果表明:兔高脂血清对兔平滑肌细胞生长有显著的增殖作用,而树鼩高脂血清对树鼩平滑肌细胞的生长未见显著的促进增生作用。     

载脂蛋白A-Ⅰ在形成实验性高脂血症最初阶段时的作用

目的探讨高胆固醇血症兔模型在血脂升高的最初阶段，血清中血脂水平的变化与合成新生ａｐｏＡⅠ主要部位的关系。方法两组实验，共用家兔３５只，在实验前和实验第１、２、４、７周末检测血清总胆固醇（ＴＣ），游离胆固醇（ＦＣ），高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬＣ），主动脉内壁脂质沉积以及小肠和肝脏ａｐｏＡⅠｍＲＮＡ的变化。结果饲养１周后兔血清中ＴＣ和ＦＣ增高，卵磷脂胆固醇乙酰转移酶（ＬＣＡＴ）活性在２周后显著增高，ＨＤＬＣ在第１周内增高，至第７周末出现显著降低。小肠中ａｐｏＡⅠｍＲＮＡ第１周显著增高，肝中ａｐｏＡⅠｍＲＮＡ早期无明显变化。结论在家兔高脂血症最初阶段，新生ａｐｏＡⅠ主要在小肠内合成     

家兔主动脉平滑肌细胞HDL3受体及配体特性的探讨

应用同位素标记高密度脂蛋白_3(HDL_3),探讨家兔主动脉平滑肌细胞HDL_3的结合部位及其影响因素。结果表明,在平滑肌细胞表面存在具有特异性、高亲和力的HDL_3受体(Bmax=0.31μg/mg细胞蛋白,KD=5.6×10~(-8)mol/L)。培养液中的高浓度apoA_1可抑制~(125)I-HDL_3结合量的50％;用大鼠抗apoA_2抗体封闭~(125)I-HDL_3,其结合量可下降70％,而~(125)I-HDL_3与胆固醇预孵育,其与平滑肌细胞的结合率不受影响,提示apoA_1在HDL_3与受体结合过程中起着主要作用。培养液的pH在6.0～8.0之间,不影响HDL_3的结合;HDL_3结合部位对胰酶和裂解蛋白酶(pronase)处理均不敏感,且不依赖于Ca~(2+);4℃时其结合量最大。这些特性均与LDL受体不同,提示在平滑肌细胞表面存在着不同于apoB、E、apoE受体的HDL_3受体。     

动脉粥样硬化研究的一些新进展

动脉粥样硬化被认为是一种特殊形式的慢性炎症,动脉壁的平滑肌细胞、内皮细胞、来自大单核细胞的巨噬细胞以及T淋巴细胞间的相互作用和细胞介质的调控,激活并促使平滑肌细胞增生。其间始终涉及脂质的转运和积聚,动脉内膜的纤维增殖     

Suppression of induced atherosclerosis in h-apo AI transgenic mice by overex pression of human apo AI in the aortic wall

ｅｔｈｏｄｓ　Ｂｏｔｈｈ ａｐｏＡＩｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｍｉｃｅａｎｄｎｏｒｍａｌＣ57ｍｉｃｅｗｅｒｅｆｅｄｗｉｔｈｅｉｔｈｅｒａｒｅｇｕｌａｒｃｈｏｗｏｒａｈｉｇｈ ｆａｔｄｉｅｔｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ 5%ｐｏｒｋｌａｒｄ ,1 2 5%ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌａｎｄ 0 2 5%ｓｏｄｉｕｍｃｈｏｌａｔｅｆｏｒ 14ｏｒ 2 4ｗｅｅｋｓｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ＨｕｍａｎａｐｏＡＩｍＲＮＡｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＮｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ ＰｌａｓｍａａｐｏＡＩｌｅｖｅｌｓｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｕｓｉｎｇａｒａｄｉ…     

组织型纤溶酶原激活物在兔髂动脉平滑肌细胞的表达

组织型纤溶酶原激活物在兔髂动脉平滑肌细胞的表达马晓莉，黄文英，佘铭鹏，李晓惠，常文兰，笪冀平，吕凤英，李秀云（中国医学科学院阜外心血管病医院病理科，北京１０００３７）平滑肌细胞（ＳＭＣ）从中膜向内膜迁移以及在中膜和内膜的增生在动脉粥样硬化和血管成形术...