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目的建立稳定的呼吸道合胞病毒(RSV)感染滴度测定的实时荧光定量PCR(Realtime Quantitative PCR,Q-PCR)检测方法和酶免疫斑点法(Enzyme Immunospots,EIS),并与半数定量方法(50%tissue culture infectious doses,TCID50)进行比较。方法分别采用Q-PCR、EIS和TCID50分析RSV感染的细胞和RSV攻毒后小鼠肺脏标本中的病毒滴度。结果RSV感染细胞的上清中,三种分析方法检测的病毒滴度值之比为:Q—PCR和EIS(pfu)的比约为10:1,EIS(pfu)和TCID50(TCID50换算成pfu)比约为10:1;RSV攻毒后小鼠肺脏标本中,三种分析方法检测的病毒滴度值之比为,Q—PCR和EIS(pfu)比约为1000:1,EIS(pfu)和TCID50(TCID50换算成pfu)比约为5:1。结论成功建立了RSV感染滴度测定的Q-PCR和EIS分析方法,通过与TCID50方法的比较分析,我们认为EIS法分析RSV滴度具有成本低和较高的灵敏度,有较好的应用前景。 相似文献
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重组腺病毒方法的改建 总被引:2,自引:0,他引:2
目的对构建重组腺病毒的AdEasy载体系统的操作过程予以改进,使其更加简便、高效。方法将腺病毒骨架载体pAdEasy-1用电穿孔法转化大肠埃希菌BJ5183,获得含pAdEasy-1的大肠埃希菌BJ5183/p菌株。氯化钙法制备大肠埃希菌BJ5183/p感受态细胞,并转化含绿色荧光蛋白的穿梭载体,通过同源重组获得重组腺病毒质粒。以限制性内切酶PacⅠ酶切,得到重组腺病毒DNA分子,转染293细胞。结果293细胞出现细胞病变,荧光显微镜观察有绿色荧光。结论成功获得一种以AdEasy系统为基础的简便、高效构建重组腺病毒的新方法。 相似文献
24.
轮状病毒组特异性抗原VP6在重组腺病毒中的表达及其免疫学效果的研究 总被引:9,自引:0,他引:9
目的 构建可表达A组轮状病毒组特异性抗原VP6的非复制型重组腺病毒载体,并对其生物学和免疫学性质进行研究。方法 将人轮状病毒VP6基因插入腺病毒载体pShuttle-CMV中,通过细胞内同源重组方法获得重组腺病毒DNA,将其转染293细胞获得重组腺病毒。用聚合酶链反应(PCR)及Southern blot方法,检测目的基因在重组腺病毒中的整合,用Western blot检测VP6的表达。通过灌胃和滴鼻两种途径对小鼠进行免疫,并对免疫后小鼠体液和粘膜免疫进行分析。结果 得到了重组腺病毒rvAd-VP6,VP6基因整合于腺病毒基因且中,在293细胞中可稳定表达。2次免疫后灌胃和滴鼻两组小鼠均产生明显免疫应答,血清IgG抗体滴度分别为1:1000和1:10000-1:100000。除了血清IgG外,小鼠还产生了较强的针对轮状病毒的血清IgA,滴度为1:10-1:100。滴鼻组在肺灌洗液和肠匀浆液中均可检测到分泌型IgA(sIgA),灌胃组仅在肠道检测到sIgA。滴鼻组的免疫学效果明显优于灌胃组。结论 人轮状病毒VP6基因重组腺病毒载体的成功构建及所取得的良好免疫学效果,为我国具有自主知识产权的新型轮状病毒基因工程疫苗的研制奠定了基础。 相似文献
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189例0~6岁健康儿童血红蛋白浓度与血铅水平相关性的调查 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :了解 0~ 6岁健康儿童血红蛋白浓度与血铅水平的相关性。方法 :选择散居及集体 0~ 6岁儿童 ,其体检合格且血红蛋白浓度≥ 110 g/L ,同时检测血铅 ,进行相关性检验。结果 :①本组儿童血铅 <0 4 83μmol/L者 10 2例 ,占 5 4 % ,≥ 0 .4 83μmol/L者 87例 ,占 4 6 %。 94 2 %的儿童血红蛋白浓度波动在 110~ 14 0g/L。②本组儿童随血红蛋白升高 ,其血铅水平逐渐下降 ,呈明显负相关。结论 :血红蛋白与血铅呈明显负相关 ,保持良好的铁营养状态 ,是减少或预防儿童铅中毒的有效措施之一 相似文献
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钙是人体内最重要的元素之一,参与一切生命活动过程。由于食物来源、饮食习惯及膳食结构等原因,我国不同年龄人群膳食钙摄入量普遍低于中国营养学会推荐的每日膳食中营养素供给量(RDA)标准。除以乳类为主食的小婴儿外,钙缺乏在我国人群中是个普遍而常见的有损于健康的问题。我国目前市场上强化钙食品还很少,而钙剂种类繁多。故此,在人群广泛缺钙的情况下,如何正确选择口服钙剂是个实际问题,应从以下三方面予以考虑。1选择高质量的回服钙剂1.1钙剂所含元素钙的多少目前市售各种钙剂,元素钙的含量不一,绝大多数钙剂含钙量偏低,… 相似文献
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目的 于1996年9月北京东城区64所小学6044名6~7岁学生的发育指数进行评价及分析.方法 按3:1随机抽样,将男女各1022名学生检测指标上机作四项发育指标数的统计分析.结果 本组儿童身高、体重均值高于WHO标准及1985年我国九市城市区标准,与后者比较差异显著.Kaup及Quetelet指数高于可获得的国内外资料,其中Quetelet指数增高明显;Ververck及身高胸围指数多数偏低.结论 北京东城区6~7岁儿童的体重、身高发育良好,胸廓发育相对缓慢.发育指数评价可做为体格发育的重要参考. 相似文献
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29.
利用镧系元素荧光衰变时间长和特定的波长范围,以铕等作标记发展的免疫分析技术,称时间分辨免疫分析。它可以避免背景干扰,有特异、敏感、线性范围宽、样品用量少、分析速度快等优点。其敏感性已相当于放射免疫测定,而无同位素污染之虞。现已被广泛地用于生物学和医学研究及应用的各个领域,为一种新型很有前途的超微量分析方法。 相似文献
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