奥沙利铂促进过表达GSDME的结直肠癌Lovo细胞发生细胞焦亡

目的：观察过表达Gasdermin蛋白E（gasdermin E, GSDME）基因的结直肠癌Lovo细胞经奥沙利铂处理后发生细胞焦 亡的现象。方法：通过qPCR检测结直肠癌细胞株Lovo、正常结直肠上皮细胞HCOEPIC中GSDME基因的表达水平,构建过表 达野生型和突变型GSDME的GSDME-WT和GSDME-D270A重组质粒,包装为相应慢病毒后感染Lovo细胞构建GSDME稳定 高表达细胞株,Western blotting检测WT、 D270A和空载体组中GSDME表达水平。用不同浓度奥沙利铂（0、 4、 8、16、32、64 μg/ ml）作用于WT、 D270A组Lovo 细胞和 HCOEPIC 细胞,显微镜下观察细胞的形态变化。结果：GSDME在HCOEPIC 细胞中表 达显著高于Lovo细胞（P<0.01）。成功构建GSDME-WT和GSDME-D270A高表达重组质粒和相应的Lovo细胞株,与空载体组 相比,WT和D270A组Lovo细胞中GSDME表达水平明显升高（均P<0.05）。镜下观察发现, 64 μg/ml奥沙利铂处理各组细胞9和 12 h时,WT组的Lovo细胞和HCOEPIC细胞体积逐渐增大并向一侧“吹泡”,表现出明显的细胞焦亡现象,细胞焦亡率显著高于 无奥沙利铂处理的对照组[Lovo 细胞：（7.405±1.010） % vs（3.441±0.401）% , P<0.05;HCOEPIC 细胞： (7.203±1.020)% vs (4.201±0.302)%, P<0.05]。结论：奥沙利铂促进过表达GSDME基因的结直肠癌Lovo细胞发生细胞焦亡。     

Smad2/3与Smad7在大鼠化疗性卵巢早衰卵泡中的表达和意义

目的 探讨顺铂对大鼠卵巢结构和功能损伤的影响及其可能的分子机制。方法 3月龄SD 雌性大鼠随机分为对照组（C组,5只）和化疗组（H组,5只）。H组给予每只大鼠腹腔注射顺铂2 mg/（kg.d）,C组给予腹腔注射等体积生理盐水,连续注射7 d后检测大鼠卵巢指数（卵巢湿重/体重）;酶联免疫吸附法检测血清雌二醇（E₂）和促卵泡刺激素（FSH）水平;苏木素-伊红染色观察卵泡发育并计数各级卵泡;免疫组织化学和Real-time PCR法检测各组Smad2、磷酸化Smad2（p-Smad2）、Smad3、磷酸化Smad3（p-Smad3）、Smad4和Smad7的蛋白和mRNA表达。结果 与C组相比,H组大鼠卵巢体积减小,生长卵泡数明显减少（P<0.05）,大鼠卵巢指数下降（P<0.05）,血清中E2水平降低和FSH水平上升（P<0.05）。免疫组织化学和Real-time PCR结果显示,Smad2（p-Smad2）、Smad3（p-Smad3）、Smad4和Smad7蛋白在卵巢各级卵泡均有表达,H组Smad2蛋白和mRNA表达增加（P<0.05）,Smad2磷酸化水平（p-Smad2）表达增高（P<0.05）;Smad3、Smad4和Smad7蛋白和mRNA表达减少（P<0.05）,p-Smad3 表达降低（P<0.05）。结论 顺铂诱导大鼠卵泡损伤并促进卵巢早衰,引起卵泡细胞内Smad2表达增加,Smad3、Smad7表达降低,Smad细胞内信号通路参与了化疗性卵巢损伤的过程。     

大鼠胚胎成纤维细胞与胰岛共培养的实验研究

目的 探讨大鼠胚胎成纤维细胞(EFCs)与胰岛共培养对胰岛活性与功能的影响.方法 制备SD大鼠胚胎饲养层;分离SD大鼠胰岛.实验分为单纯胰岛培养组、EFCs与胰岛共培养组和EFCs单纯培养组.胰岛活性以AO/PI、DTZ染色、线粒体活性检测,以胰岛素释放试验评价其功能.结果 共培养组中,AO/PI双染显示胰岛活性高于95%,MTT显示共培养3、5、7、14d胰岛细胞吸光度明显高于单纯培养组(P＜0.05或P＜0.01),刺激指数SI也明显高于对照组.结论 新鲜分离的胰岛与EFCs饲养层共培养可明显改善胰岛功能.     

十二指肠溃疡患者胃窦粘膜β-内啡肽阳性细胞图象分析

研究应用免疫组织化学ＰＡＰ法显示胃窦幽门脉内啡肽（ＥＰ）阳性细胞,通过真彩色图象分析系统,检测非病变区胃窦幽门腺ＥＰ阳性细胞的阳性反应点灰度和面积,计算灰度密度Ｒ,以探讨与溃疡的关系,并为十二指肠溃疡幽门腺阳性反应细胞ＥＰ含量分析提供依据１材料和方法１．１材料成人男性胃窦粘膜标本１０例,其中十二指肠溃疡（ＤＵ）和浅表性胃炎（对照组Ｃｏｎ）各５例．所有病例均经内镜证实,标本取距幽门口２ｃｍ肉眼下非病变区胃窦前壁粘膜,４％多聚甲醛固定,石蜡包埋,连续切片厚６ｍ．１．２方法①免疫组织化学染色以Ｓｔｅｒ…     

人鼻息肉组织中MMP-9及TIMP-1表达的变化

鼻息肉临床常见,发病率高.它的发生是一个涉及多因素、多步骤的过程.本研究应用免疫组织化学方法对38例鼻息肉及10例正常鼻黏膜组织中MMP-9及TIMP-1的表达进行检测,探讨它们与鼻息肉的临床分期分型、患者的年龄及性别的相互关系,从而为鼻息肉的临床诊断及治疗提供帮助.     

人胰岛β-内啡肽免疫组织化学研究

β-内啡肽广泛存在于哺乳动物体内。Grube等先后于1978年和1980年报道在胰岛与垂体内发现β-内啡肽,Forssmann 等和Dockray 则分别在1977年和1987年发现它也存在于胃肠胰系统。本文对人胰岛β-内啡肽免疫组织化学反应进行了研究。所用材料为7例60～70岁人的尸检胰腺体部。Bouin 液