鲍曼不动杆菌16S rRNA甲基化酶基因及氨基糖苷类修饰酶基因研究

鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)是条件致病菌,但近年来已出现多重耐药株,被称为MDR-A6.MDR-Ab已是医院感染病原菌中最常见菌种之一,并且对包括β-内酰胺类和氨基糖苷类在内的常用抗菌药物呈现多重耐药性.     

一种新β-内酰胺酶亚型SHV-56的发现及其临床意义

目的 分析产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鲍曼不动杆菌SHV型β-内酰胺酶(BLA)的编码基因并确定其亚型。方法 采用聚合酶链反应(PCR)扩增BLA编码基因片段，双脱氧链终止法测定核苷酸序列、确定亚型。结果 临床分离的鲍曼不动杆菌HZ29株产生SHV型BLA，其扩增片段含825个核苷酸，核苷酸及相应的氨基酸序列经GenBank查询无相同序列，为新发现的一种BLA亚型，其序列已以SHV-56名称在美国核酸数据库GenBank成功登录(GenBank注册号：AY352599)。结论 临床分离的鲍曼不动杆菌HZ29株所产SHV型BLA为一种新发现的BLA亚型。     

亚胺培南耐药铜绿假单胞菌消毒剂及β内酰胺类抗生素耐药相关基因研究

目的 了解临床分离的对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌消毒剂及G内酰胺类抗生素耐药相关基因存在状况。方法 自临床分离28株对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法检测耐药基因。结果28株中,qacE△1、TEM、OXA基因阳性株数(％)分别为24株(85．7％)、20株(71．4％)、1株(3．6％),此株0XA基因经序列分析确认为OXA-10型超广谱β内酰胺酶(GenBank注册号：AY841859)。25株(89．3％)oprD基因缺失,IMP、V1M、SHV、PER、VEB、GES、MIR、DHA基因均阴性。结论临床分离的对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌耐消毒剂基因qacEA1及TEM基因携带率均很高,至少存在TEM、OXA-10两种β内酰胺酶基因,oprD基因缺失突变是对亚胺培南耐药的重要原因。     

肠球菌抗生素耐药基因检测

目的 明确解放军第98医院临床分离的肠球菌中，抗生素耐药相关基因存在状况。方法采用聚合酶链反应（PCR）及序列分析的方法，分析15株粪肠球菌和9株屎肠球菌中，β-内酰胺类抗生素耐药相关基因（TEM）、氨基糖苷类抗生素耐药相关基因（氨基糖苷类修饰酶基因）[aac（6’）／aph（2”）、aph（3’）-Ⅲ、ant（2”）-Ⅰ、ant（4’，4”）、ant（6）-Ⅰ]、四环素耐药相关基因（tetM）、红霉素耐药相关基因（ermB、mefA）和万古霉素耐药相关基因（vanA、vanB）。结果24株肠球菌中TEM、aac（6’）／aph（2”）、aph（3’）-Ⅲ、ant（2”）-Ⅰ、ant（4’，4”）、ant（6）-Ⅰ、ermB、mefA、tetM、vanA和vanB4基因的阳性分别为9株（37．5％）、17株（70．8％）、6株（25．0％）、0、0、10株（41．7％）、18株（75．0％）、0、10株（41．7％）、1株（4．2％）和1株（4．2％）。结论临床分离的肠球菌多重耐药严重；携带抗生素相关耐药基因是导致菌株对抗生素产生耐药的重要原因。     

耐甲氧西林表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌常见耐药基因及红霉素对克林霉素的诱导耐药性研究

目的了解临床分离的耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)和耐甲氧西林溶血葡萄球菌(MRSH)中,常见耐药基因存在状况及红霉素对克林霉素的诱导耐药率。方法用PCR技术检测耐药基因,采用CLSI(NCCLS)推荐的D试验方法测定红霉素对克林霉素的诱导耐药表型。结果7株MRSE中,mecA、aac(6′)/aph(2″)、aph(3′)-Ⅲ、ant(4′,4″)、ermA/B/Ct、etM、vanA、vanB和qacA/B基因的阳性株数分别为7、3、1、2、3、0、0、0和2;5株MRSH中此9种基因的阳性株数分别为5、4、2、1、4、0、0、0和1;对红霉素耐药而对克林霉素敏感的5株MRSE和5株MRSH中D试验阳性株数分别为3株和1株。结论临床分离的MRSE和MRSH中存在mecA、aac(6′)/aph(2″)、aph(3′)-Ⅲ、ant(4′,4″)、ermA/B/C和qacA/B基因;D试验检测红霉素对克林霉素的诱导耐药性有助于临床医生正确选用MLSB类抗菌药物。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌和嗜麦芽寡养单胞菌抗菌药物耐药基因研究

目的分析浙江省湖州解放军第98医院自临床分离的耐亚胺培南铜绿假单胞菌（IRPa）和嗜麦芽寡养单胞菌（Sm）中抗菌药物相关耐药基因存在状况。方法2003年9月至2004年10月间从临床分离28株IRPa和19株Sm，采用聚合酶链反应及序列分析的方法分析8种B一内酰胺酶基因（blaIMP、blaVIM、blaTEM、blaSHV、blaOXA、blaPER、blaVEB和blaGES）、9种氨基糖苷类修饰酶基因（AMEs基因）Eaac（3）-Ⅰ、aac（3）-Ⅱ、aac（3）-Ⅲ、aac（3）-Ⅳ、aac（6’）-Ⅰ、aac（6’）-Ⅱ、ant（3″）-Ⅰ、ant（2″）-Ⅰ和aph（3’）-Ⅵ]、外膜孔蛋白D2基因（oprD）、消毒剂-磺胺耐药相关基因（qacE△1-sul1）、氯霉素乙酰转移酶基因（catB）、氯霉素外排蛋白基因（cml1）。结果28株IRPa中bLatEM、blaOXA、aac（3）-Ⅱ、aac（6’）-Ⅱ、ant（3″）-Ⅰ、ant（2″）-Ⅰ和qacE△1-sul1基因的阳性株数（％）分别为20株（71．4％）、1株（3．6％）、23株（82．1％）、10株（35．7％）、15株（53．6％）、8株（28．6％）和24株（85．7％），AMEs基因总阳性率为89．3％，blaOXA基因经序列分析确认为blaOXA-10型超广谱β-内酰胺酶，25株（89．3％）发生oprD基因缺失突变。19株Sm中aac（6’）-Ⅱ、ant（2″）-Ⅰ及qacE△1-sul1基因的阳性株数（％）均为2株（10．5％）；其余基因均阴性。结论临床分离的IRPa中存在blaTEM、blaOXA-10、aac（3）-Ⅱ、aac（6’）-Ⅱ、ant（3″）-Ⅰ、ant（2″）-Ⅰ和qacE△1-sul1基因，oprD基因缺失突变率很高。Sm中存在aac（6’）-Ⅱ、ant（2″）-Ⅰ及qacE△1-sul1基因。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌Ⅰ类整合子遗传标记及β-内酰胺类抗生素耐药相关基因研究

目的 了解临床分离的耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IRPa)中Ⅰ类整合子及β-内酰胺类抗生素耐药相关基因存在状况.方法 自临床分离28株IRPa,采用聚合酶链反应及序列分析的方法检测Ⅰ类整合子遗传标记(intI1和qacE△1-sul1基因)及18种β-内酰胺类抗生素耐药相关基因.结果 28株中,intI1、qacE△1-sul1、blaTEM、blaOXA-10群和blaCARB基因阳性株数(%)分别为21株(75.0%)、24株(85.7%)、20株(71.4%)、1株(3.6%)和1株(3.6%),经序列分析分别确认为blaOXA-10(GenBank注册号:AY841859)和blaCARB-3.25株(89.3%)oprD基因缺失,blaIMP、blaVIM、blaSHV、blaPER、blaVEB、blaGES、blaMIR、blaDHA、blaSPM、blaGIM、blaOXA-1群、blaOXA-2群、blaBEL-1、blaCTX-M-1群基因均阴性.结论 临床分离的IRPa中Ⅰ类整合子携带率很高,至少存在blaTEM、blaOXA-10和blaCARB-3种β-内酰胺酶基因,oprD基因缺失突变是其对亚胺培南耐药的主要原因.