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实时荧光RT-PCR与普通RT-PCR检测噬菌体MS2的差异 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:通过比较实时荧光-步RT-PCR和普通的两步法RT-PCR在检测噬菌体MS2时灵敏度和特异性的差异,以期在消毒学、微生物等相关试验中选择灵敏度和特异性能满足所需的-种方法检测噬菌体或类似病毒.方法:采用实时荧光-步RT-PCR法和普通的两步法RT-PCR对噬菌体MS2复制酶基因和衣壳蛋白基因进行检测,比较两种方法对两个基因片段的检测灵敏度和特异性.结果:对于复制酶基因,实时荧光RT-PCR的灵敏度达0.25 pg/山,普通的两步法RT-PCR为2500 pg/μl;而对于衣壳蛋白基因,前者灵敏度达0.025 pg/μl,后者为250 pg/μl.在所用的10种菌(毒)株的特异性检测中,实时荧光-步RT-PCR法只检测到噬菌体f2和大肠杆菌ATCCl5597(MS2的宿主菌)有与噬菌体MS2复制酶基因和衣壳蛋白基因均相应的两种荧光信号,而其它菌(毒)株为阴性结果;两步法RT-PCR电泳图谱只显示出噬菌体f2有-条与噬菌体MS2衣壳蛋白基因相当的条带以及大肠杆菌ATCCl5597有-条与MS2复制酶基因大小相当的条带,其它菌(毒)株的电泳图谱无相关条带.结论:对于噬菌体MS2的检测,实时荧光-步RT-PCR法的灵敏度比普通的两步法RT-PCR高104倍,但特异性后者略强于前者. 相似文献
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[目的]通过有机干扰物牛血清白蛋白(BSA)的存在与否比较研究纳米Ag液对噬菌体MS2的不同灭活效果,为纳米Ag在生活及环境中的实际应用提供基础资料. [方法]采用悬液定量灭活试验测定纳米Ag液对噬菌体MS2的灭活对数值(LIV). [结果]在不加有机干扰物BSA时,100 mg/L纳米Ag液作用60 min,对噬菌体MS2的灭活对数值LIV为4.01log10,400 mg/L作用20 min,其LIV达4.12log10;而加入3%的BSA后,400 mg/L纳米Ag液作用1 440 min(24 h),对噬菌体MS2的LIV为3.61log10,800 mg/L作用90 min,其LIV为4.02log10. [结论]环境中有机干扰物的存在将会极大程度地降低纳米Ag液对噬菌体MS2的灭活效果. 相似文献
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目的比较血清降钙素原(PCT)水平与其他炎症指标对鉴别诊断细菌性感染的临床价值。方法采用回顾性队列研究,按临床病例终诊结果将患者分为细菌性感染和非细菌性感染两组,采用受试者工作特征曲线比较PCT、C反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)3项炎症指标对细菌性感染的诊断价值。结果预测细菌性感染的ROC曲线下面积PCT为0.89,CRP为0.70,WBC为0.60;以PCT>0.25 ng/mL为阳性界值诊断细菌性感染的灵敏度为46%,特异度为100%;以PCT≥0.1 ng/mL为临界值则灵敏度达75%,特异度96%;CRP>5 mg/L的诊断灵敏度为85%,特异度为38%;WBC>10.0×109/L的诊断灵敏度为39%,特异度为82%。结论在鉴别细菌性感染和其他炎症疾病上,血清PCT优于CRP和WBC,以PCT≥0.1 ng/mL为阳性界值,对诊断有最佳的灵敏度和特异度。 相似文献
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目的探讨血清孕酮联合β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)在鉴别诊断正常妊娠和各种异常妊娠中的临床意义。方法采用回顾性队列分析,对158例各类妊娠病例1周内孕酮和β-HCG的变化进行动态分析比较。结果妊娠中血清孕酮和β-HCG并无正相关关系。在妊娠第4、5、6周时,血清孕酮若分别低于5、10、20ng/mL则提示妊娠异常,而血清β-HCG在妊娠前8周若平均每3~4天增长低于50%也提示妊娠异常。结论单次血清孕酮和β-HCG联合检测以及β-HCG的动态监测可辅助鉴别各类妊娠,是临床早期诊断各种异常妊娠的重要指标。 相似文献
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目的观察纳米银消毒剂溶液对噬菌体MS2衣壳蛋白的作用,以了解金属离子类纳米消毒剂灭活噬菌体MS2的机理。方法采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)试验方法,检测纳米银消毒液作用后的噬菌体MS2衣壳蛋白的存在情况。结果用400 mg/L纳米银消毒液对噬菌体MS2作用10 min,其平均灭活率为99.9%。作用10 min后噬菌体MS2的衣壳蛋白条带趋近消失;作用40 min可使该噬菌体完全灭活,其衣壳蛋白条带完全消失。结论纳米银消毒液对噬菌体MS2的衣壳蛋白具有破坏作用,因此认为纳米银消毒液可有效杀灭噬菌体MS2。 相似文献
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摘要 目的 〖HT5"SS〗了解3M petrifilm纸片法是否适用于医务人员手卫生和医院现场环境消毒后监测。方法 采用3M纸片和平板计数2种方法分别对医务人员手卫生、医院物体表面以及自制医疗用水进行细菌菌落总数的检测。结果 2种方法对洗手前手卫生菌落检测结果的差异有统计学意义(P<0.05),而对洗手后的检测结果差异无统计学意义(P>0.05);2种方法对医院各种物体表面消毒效果的监测其差异无统计学意义(P>0.05),对3种医疗自制用水的菌落计数差异无统计学意义(P>0.05)。结论 3M纸片法对医院消毒灭菌后的效果监测与平板法等效,省时省力,可替代平板计数法在医院感染监测中推广使用。 相似文献