小檗碱抗小鼠脂多糖性肺损伤的作用机制

目的：探讨小檗碱(Ber)对抗脂多糖(LPS)性急性肺损伤(ALI)的作用机制。方法：雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、ALI组和Ber防治组，分别予以双蒸水、Ber(50 mg/kg)灌胃，1次/d，连续3 d，于实验第3 d灌胃后1 h，腹腔注射生理盐水或LPS (20 mg/kg)。测定各组12 h肺湿/干重比值(W/D)，肺泡灌洗液(BALF)中微量总蛋白含量、白细胞(WBC)和中性粒细胞(PMN)总数；观察肺组织病理改变及磷酸化胞浆型磷脂酶A₂(cPLA₂)在肺组织中的表达。进一步用酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF中血栓素B₂(TXB₂)的含量，并测定肺组织丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果：ALI组，LPS 攻击后12 h肺W/D、BALF中蛋白含量、WBC 及PMN总数显著高于对照组(P<0.05)；病理检查发现肺间质充血、水肿，大量炎性细胞浸润。免疫组织化学观察显示肺组织中磷酸化cPLA₂的表达明显增加；同时，BALF中TXB₂含量、肺组织MDA的含量显著高于对照组(P<0.05)。Ber防治组，肺W/D、BALF中蛋白含量、WBC及PMN总数均明显低于ALI组；与ALI组比较，Ber防治组肺组织病理损伤明显减轻(P<0.05)；而且，肺组织中磷酸化cPLA₂的表达明显减少 (P<0.05)； BALF中TXB₂含量和肺组织MDA的含量显著低于ALI组。结论：抑制肺组织cPLA₂的磷酸化并对抗脂质过氧化损伤可能是Ber防治小鼠脂多糖性肺损伤的重要机制。     

甘氨酸对脂多糖诱导LBPmRNA表达的影响

目的:了解甘氨酸(GLY)对脂多糖(LPS)诱导脂多糖结合蛋白(LBP)mRNA表达的影响。方法:用RT-PCR方法检测LPS作用下大鼠肝组织LBPmRNA的表达水平,并在此基础上观察甘氨酸对LPS诱导大鼠肝组织LBPmRNA表达的影响。结果:LPS组大鼠肝组织LBPmRNA表达高于control组(P＜0.01),GLY+LPS组大鼠肝组织LBPmRNA表达低于LPS组(P＜0.01)。结论:LPS可诱导大鼠肝组织LBPmRNA的表达,甘氨酸能抑制LPS诱导大鼠肝组织LBPmRNA的表达。     

损害性因素对乳鼠心肌细胞甘氨酸受体α1亚基表达的影响

目的：研究脂多糖（LPS）、缺氧/复氧（H/R）、异丙肾上腺素(ISO)以及高糖（HG）对乳鼠心肌细胞甘氨酸受体α₁亚基（GlyRα₁）表达的影响。方法：体外培养乳鼠心肌细胞，分别用LPS、H/R、ISO以及HG处理，采用CCK-8试剂检测细胞活力，RT-PCR方法检测心肌细胞上GlyRα₁亚基mRNA的表达。结果：LPS（5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L、80mg/L）、ISO（20 μmol/L、100 μmol/L、500 μmol/L）以及HG（25 mmol/L、50 mmol/L）处理心肌细胞24 h与心肌细胞缺氧3 h/复氧3 h、单纯缺氧3 h对心肌细胞存活率无明显影响（P＞0.05）；LPS（5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L、80 mg/L）、缺氧（3 h）/复氧（3 h）、单纯缺氧（3 h）以及ISO（20 μmol/L、100 μmol/L、500 μmol/L）组心肌细胞上GlyRα1亚基mRNA表达均高于对照组（P<0.01），而HG（25 mmol/L、50 mmol/L）组心肌细胞上GlyRα₁亚基mRNA表达均低于对照组（P<0.01）。结论：一定浓度的LPS、ISO与一定时间的H/R、单纯缺氧均可上调乳鼠心肌细胞GlyRα₁亚基mRNA的表达，而HG可下调乳鼠心肌细胞GlyRα₁亚基mRNA的表达。     

中性粒细胞抑制人单个核细胞释放TNF-α及其机理的研究

目的:探讨人中性粒细胞(PMNs)对人外周血单个核细胞(PBMCs)释放TNF-α的影响及其作用机理。方法:采集健康供血者的新鲜外周静脉血,以葡聚糖沉淀和密度梯度离心法分离其PMNs和PBMCs,将PMNs细胞与PBMCs细胞按2:1的数量比与脂多糖共同培育后,分别采用酶联免疫吸附法测定培养上清的TNF-α浓度,并用流式细胞术测定结合荧光标记脂多糖的单核细胞的百分率及单核细胞表面平均荧光强度。结果:PMNs在细菌脂多糖刺激下不释放TNF-α,PMNs可以抑制PBMCs释放TNF-α,其抑制作用具有细胞特异性;经多聚甲醛固定的PMNs仍具有上述的抑制作用。流式细胞术结果显示PMNs并不影响单核细胞与脂多糖结合。结论:PMNs可抑制人PBMCs释放TNF-α,其机理可能是PMNs干扰脂多糖激活PBMCs的信号转导过程,抑制细菌脂多糖对其的活化,从而下调TNF-α的释放。     

电刺激VSA对IL-1_β作用下兔POAH温敏神经元放电的影响

目的和方法：本实验采用微电极细胞外记录,在３２只新西兰兔下丘脑视前区（ＰＯＡＨ）记录温敏神经元单位放电,观察电刺激腹中膈区（ＶＳＡ）对致热原ＩＬ－１β作用下兔ＰＯＡＨ温敏神经元放电的影响。结果：（ｌ）侧脑室注射白介素－１β（ＩＬ－１β）能使ＰＯＡＨ热敏神经元放电减少,冷敏神经元放电增加;而侧脑室注射人工脑脊液（ＡＣＳＦ）对热敏神经元和冷敏神经元的放电均无明显影响。（２）电刺激ＶＳＡ可反转ＩＬ－１β对ＰＯＡＨ热敏神经元和冷敏神经元的上述作用。结论：ＶＳＡ可能作为负调节中枢参与致热原作用下的体温调节。     

Lavendustin A对gp120抑制大鼠海马CA1区LTP的翻转作用

目的：为了探讨酪氨酸蛋白激酶抑制剂Lavendustin A（Lav A）对人类免疫缺陷病毒Ⅰ型（HIV-1）的包膜糖蛋白gp120引起大鼠海马脑片CA1区的长时程增强效应（Iong-term potentiation，LTP）的影响。方法：应用离体脑片记录技术，记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位EPSP，研究了Lav A对gp120引起的大鼠海马脑片CA1区突触传递和可塑性变化的影响。     

中性粒细胞抑制人单个核细胞释放TNF-α及其机制的研究

目的探讨人中性粒细胞(PMNs)对人外周血单个核细胞(PBMCs)释放TNF-α的影响及其作用的初步机理.方法采集健康供血者的新鲜外周静脉血,以葡聚糖沉淀和密度梯度离心法分离其PMNs和PBMCs,将PMNs与PBMCs按2∶1的数量比与脂多糖共同培育后,分别采用酶联免疫吸附法测定培养上清的TNF-α浓度,并用流式细胞测定结合荧光标记脂多糖的单核细胞的百分率及单核细胞表面平均荧光强度.结果PMNs在细菌脂多糖刺激下不释放TNF-α,PMNs可以抑制PBMCs释放TNF-α,其抑制作用具有细胞特异性;经多聚甲醛固定的PMNs仍具有上述的抑制作用.流式细胞仪结果显示PMNs并不影响单核细胞与脂多糖结合.结论PMNs可抑制人PBMCs释放TNF-α,其机理可能是PMNs干扰了脂多糖激活PBMCs的信号转导过程,抑制细菌脂多糖对其的活化,从而下调TNF-α的释放.     

α-MSH对脂多糖部分生物学活性的影响

目的旨在观察α-黑色素细胞刺激素(α-melanocytestimulatinghormone,α-MSH)对LPS部分生物学活性的影响,进一步探讨α-MSH的抗炎作用及免疫调节功能.方法应用比色法、倒置生物显微镜及流式细胞仪,测定在LPS作用下α-MSH对小鼠腹腔巨噬细胞释放H2O2量、中性粒细胞凋亡率及FITC-LPS与单核细胞的结合率及单核细胞表面平均荧光强度的影响.结果LPS可刺激小鼠腹腔巨噬细胞释放H2O2,而α-MSH与LPS共同培养,则能明显抑制巨噬细胞释放H2O2(P＜0.01);α-MSH及LPS本身均不影响中性粒细胞凋亡(P＞0.05),但在LPS作用下,α-MSH可显著促进中性粒细胞凋亡(P＜0.01);并且,α-MSH可降低FITC-LPS与单核细胞的结合率及单核细胞表面的平均荧光强度(P＜0.05,P＜0.01).结论以上结果表明,α-MSH不仅能有效抑制LPS刺激巨噬细胞释放H2O2、促进LPS作用下的中性粒细胞发生凋亡;而且可干扰LPS与单核细胞的结合,发挥其有效的免疫调控作用,对控制局部和全身炎症反应具有重要意义.     

甘氨酸对缺氧/复氧离体大鼠心脏功能的作用水

目的:观察甘氨酸(glycine,GLY)对缺氧/复氧离体心脏功能的影响,探讨甘氨酸对心肌缺血-再灌注(ischemia/repeffusion,I/R)损伤的防治作用及其机制.方法:利用Langendorff灌流装置复制心肌缺K/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)模型,观察不同浓度GLY处理后心脏左室收缩压(left ventrieular systolic pressure,LVSP)、左室舒张末压(1eft ventricular end diastolic pressure,LVEDP)、左室发展压(1eft ventricular developed pres-Sure.LVDP=LVSP-LVEDP)、左室收缩压最大上升/下降速率(the maximum rising and dropping rates of left ventrieu-lar pressure,dp/dtmax and dp/dtmin),并在相应的时点分别测定冠脉流出液中的超氧化物歧化酶(superoxide dis-mutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平.结果:H/R后各时点大鼠心功能各指标均低于缺氧前;GLY处理组复氧后心功能各指标均高于H/R组,并拮抗损伤导致的SOD减少和MDA升高.结论:一定浓度的GLY能显著改善缺氧/复氧心肌的舒缩功能,其机制可能与其提高SOD活性抑制脂质过氧化反应有关.     

四毒清减轻内毒素性肝损伤的机制研究

目的 :观察四毒清对内毒素性肝损伤的影响及作用机制。方法 :配制中药复方四毒清 ( SDQ)为 1 g/ m L生药 ,小鼠随机分 4组 :对照组、内毒素组、SDQ组、SDQ防治组。用 H2 O或 SDQ灌胃 ,3d后腹腔注射 LPS或生理盐水。腹腔内注射不同时间后 ,观察小鼠血清 ALT的活性、肝组织匀浆中 TNF-α的含量、MDA的含量及 SOD的活性 ,且观察各组小鼠肝脏组织病理变化。结果 :腹腔LPS注射后小鼠血清 AL T活性及肝组织中 TNF-α、MDA的含量明显高于对照组 ;SDQ防治组小鼠血清 ALT活性及肝组织中 TNF-α、MDA的含量明显低于内毒素组 ,肝组织中 SOD活性明显高于内毒素组。组织学发现 SDQ防治组小鼠肝脏的病理明显减轻。结论 :中药复方 SDQ对肝脏具有一定的保护作用 ,其机制与其抑制 TNF-α和氧自由基生成有关