重组人生长激素基因转染细胞移植Ⅳ:转染细胞对重组生长激素基因的表达

重组人生长激素基因转染细胞移植Ⅳ：转染细胞对重组生长激素基因的表达胡志强于康震戴锁舜杨富明李呼伦辛晓敏高自强于康震陈忠斌王秀丽我们利用磷酸钙介导的方法将重组人生长激素（ｈＧＨ）基因导入培养的人胚皮肤成纤维细胞内，之后用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交证实转染的细...     

重组牛白细胞介素—2的高效表达及其生物学活性的测定

以ＰＣＲ方法扩增重组牛白细胞介素２基因，获得带有ＡＴＧ的完整牛白细胞介素２基因片段。以ｐＢＶ２２０为表达质粒，成功地构建了重组牛白细胞介素２的高效表达载体ｐＢＶｍＢｏＩＬ２，并转入Ｅ．ｃｏｌｉ。诱导表达结果表明，表达的重组牛白细胞介素２占总菌体蛋白的２２％以上，比原来提高２倍。活性测定结果表明，表达的重组牛白细胞介素２具有极显著的体外增殖活化淋巴细胞的活性，重组牛白细胞介素２的分子量约为１５４８８。     

重组人生长激素基因的转染和基因表达产物的定量分析

目的：定量分析基因表达产物人生长激素（ｈＧＨ），并确定基因表达期限。方法：我们利用磷酸钙介导的方法将重组ｈＧＨ基因导入培养的人胚皮肤成纤维细胞内，之后用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交证实转染细胞能够表达ｈＧＨ基因。在此基础上又采用放免法对ｈＧＨ进行了定量测定。结果：从细胞转染的第１２天算起，ｈＧＨ水平逐渐提高，到２３天进入一稳定表达阶段，到９０天仍在进行稳定表达。此时每毫升培养液中的细胞数为１．３×１０６个，ｈＧＨ含量为７９．３２±３．２６６３ｎｇ。结论：转染细胞至少能持续表达ｈＧＨ９０天。