密蒙花方防护糖尿病大鼠早期视网膜神经细胞损伤机制探讨

目的　探讨密蒙花方防治糖尿病视网膜病变大鼠早期视网膜神经细胞损伤的作用机制,为临床实践提供实验依据。方法　采用清洁级雄性Sprague-Dawley（SD） 大鼠120只,其中正常组30只,其余大鼠采用链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠动物模型,造模成功后随机分为模型组及密蒙花方组,密蒙花方组采用密蒙花方灌胃3个月,模型组用与密蒙花方组等容的蒸馏水灌胃。给药1个月后,采用TUNEL法检测大鼠视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGCs）凋亡情况;分别在给药1个月、2个月、3个月后采用高效液相色谱法检测各组大鼠视网膜中谷氨酸含量;PCR以及Western blot法检测视网膜中Sigma-1R mRNA和蛋白表达情况。结果　给药1个月后,TUNEL法检测结果示,密蒙花方组RGCs凋亡数少于模型组。高效液相色谱法检测结果示,给药1个月、2个月、3个月后,模型组较正常组谷氨酸含量均增加（均为P＜0.01）,密蒙花方组谷氨酸含量较模型组均降低（均为P＜0.01）。给药3个月后,正常组、模型组和密蒙花方组视网膜Sigma-1R mRNA相对表达量分别为1.71±0.11、0.67±0.09和1.50±0.14,Sigma-1R蛋白相对表达量分别为0.39±0.02、0.16±0.02和0.30±0.01;与正常组相比,模型组Sigma-1R mRNA及蛋白水平均降低（均为P＜0.01）;与模型组相比,密蒙花方组Sigma-1R mRNA及蛋白水平均升高（均为P＜0.01）;密蒙花方组与正常组之间差异均无统计学意义（均为P>0.05）。结论　糖尿病视网膜病变早期即出现视网膜神经细胞的凋亡及损伤,密蒙花方可通过谷氨酸和Sigma-1R介导机制干预糖尿病大鼠早期视网膜神经细胞损伤,从而起到阻止糖尿病视网膜病变进一步发展的作用。     

糖尿病性干眼患者血清炎症细胞因子的变化及意义

目的探索糖尿病性干眼患者血清炎症细胞因子的变化特点。方法糖尿病性干眼、糖尿病无干眼、非糖尿病性干眼、正常人各20人(40只眼),检测血清白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度,使用双通道视觉质量分析系统(OQAS)测定客观散射指数(OSI),分析糖尿病性干眼患者OSI与血清IL-1β及TNF-α的相关性。结果糖尿病性干眼者的血清IL-1β、TNF-α及OSI分别为(69.63±12.02)pg/ml,(57.67±11.98)pg/ml,1.53±0.35;糖尿病无干眼者为(53.45±9.21)pg/ml,(52.20±6.39)pg/ml,0.93±0.30;非糖尿病性干眼为(58.41±7.77)pg/ml,(53.98±7.20)pg/ml,1.12±0.22;正常人为(48.69±7.49)pg/ml,(44.94±3.9)pg/ml,0.64±0.18。正常人的血清IL-1β、TNF-α以及OSI均低于其他三组(P0.05)。糖尿病性干眼者的OSI值与血清IL-1β呈正相关(r=0.771,R~2=0.594,P0.001),与血清TNF-α亦呈正相关(r=0.762,R2=0.581,P0.001),得到的回归方程分别为:OSI=0.541+0.032×IL-1β(F=70.330,P0.001);OSI=-1.994+0.083×TNF-α(F=23.878,P=0.001)。正常人组的血清IL-1β、TNF-α浓度与OSI均无明显相关性。结论体内持续微炎症状态在糖尿病性干眼的发生、发展过程中起重要的作用。     

莪术抑制晶状体上皮细胞增殖的信号转导机制

目的 探讨天然药物莪术（rhizoma curcumae，RC）对体外培养的晶状体上皮细胞（1ensepithelial cell，LEC）增殖的抑制作用，并从信号转导方面研究其抑制LEC增殖的作用机制，为寻求防治后发性白内障（after cataract）的确切有效药物提供实验依据。方法 用牛LEC进行原代和传代培养，取第三代细胞。用10ng／ml重组人碱性成纤维细胞生长因子（recombinant human basic fibroblast growth factor，rhbFGF）诱导LEC增殖。同时分别将5mg／ml、10mg／ml、20mg／ml的莪术作用于增殖状态下的LEC72小时。（1）通过四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）比色测定法检测莪术对LEC增殖的抑制程度；（2）用钙荧光指示剂Fura-2／AM测定莪术抑制LEC增殖时细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）变化;（3）用放射免疫分析法测定莪术抑制LEC增殖时细胞内环化腺苷酸（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）和环化鸟苷酸（cyclicguanosine monophosphate，cGMP）浓度变化。结果 莪术可明显抑制LEC增殖。抑制LEC增殖时细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）升高，细胞内cAMP浓度显著升高，细胞内cGMP浓度显著降低，cAMP／cGMP比值升高，并具有剂量依赖关系。结论 诱导[Ca^2＋]i升高，激活细胞内Ca^2＋信号转导途径；上调细胞内cAMP水平，下调细胞内cGMP水平，使cAMP／cGMP比值升高，激活细胞内cAMP-PKA、cGMP-PKG信号转导途径可能是莪术抑制LEC增殖的作用机制之一。莪术能够明显抑制LEC增殖的作用，有望成为防治后发性白内障的有效药物。     

清开灵液对家兔内毒素性发热和脑脊液cAMP含量的影响

清开灵液对家兔内毒素性发热和脑脊液ｃＡＭＰ含量的影响蒋玉凤，黄启福，严京，贾旭，李伯光（北京中医药大学病理教研室北京１０００２９）关键词内毒素；发热；ｃＡＭＰ；清开灵注射液我校研制的清开灵注射液（ｓｏｌｕｔｉｏｎｏｆＱｉｎｇＫａｉＬｉｎｇ，ＱＫＬ）是...     

益肾活血泄浊汤治疗大鼠系膜增生性肾小球肾炎的实验研究

采用小鼠抗大鼠Thy1.1单克隆抗体复制大鼠系膜增生性肾炎模型 ,分为益肾活血泄浊汤治疗组、模型组和正常组。每周测定大鼠 2 4h尿蛋白及尿潜血 ,于第 2、5、8周时测定血清白蛋白、肌酐及尿素氮 ,结束时测定血液流变学 ,并进行免疫荧光、光镜及电镜观察。结果表明 :与病理组结果相比 ,治疗组各项指标均有显著性差异 (P <0 .0 5～P <0 .0 1) ,形态学观察也显示治疗组较病理组损害减轻。提示益肾活血泄浊汤能够明显保护病鼠肾功能 ,有效防止血液粘度升高 ,并延缓肾硬化发展的进程     

清开灵注射液对脑血肿家兔血气变化的影响

目的　观察清开灵注射液对脑血肿家兔血气值变化的影响。方法　利用自体血凝块颅内埋藏法复制家兔脑血肿模型 ,在脑血肿形成后不同时间测定血气值变化。结果　脑血肿形成后 ,动物有过度通气 ,表现为代谢性酸中毒合并呼吸性碱中毒的混合型酸碱平衡紊乱 ,清开灵治疗组对上述异常皆有不同程度的改善。结论　清开灵有不同程度的改善通气异常 ,纠正酸碱平衡紊乱的作用     

解热醒神注射液对内毒素性发热家兔下丘脑cAMP、IL-1β含量的影响

目的:观察解热醒神(JRXS)注射液对内毒素(ET)性发热1h家兔体温、下丘脑cAMP、IL-1_β含量的影响。方法:复制家兔ET性发热模型,用放免法检测下丘脑及脑脊液cAMP、下丘脑IL-1_β的含量。结果:ET组的ΔT[(0.40±0.11)℃]、TRI₁(1.78±0.79)、下丘脑cAMP含量[(2.90±0.40)nmol/g]、脑脊液cAMP含量[(32.10±4.51)nmol/L]、下丘脑IL-1_β含量[(6.08±0.79)ng/g]显著高于生理盐水(NS)组及JRXS+ET组(P＜0.01)。JRXS+ET组ΔT[(0.10±0.10)℃]、TRI₁(0.36±0.64)、下丘脑cAMP含量[(1.37±0.27)nmol/g]、脑脊液cAMP含量[(14.40±3.69)nmol/L)]、下丘脑IL-1_β含量[(2.90±0.37)ng/g]接近NS组,但与ET组比较有非常显著差异(P＜0.01);4组下丘脑及脑脊液cAMP含量、下丘脑IL-1_β含量变化与体温变化呈正相关。结论:JRXS能明显抑制ET引起的发热反应,其抑制效应的机制与降低ET引起的下丘脑cAMP、IL-1_β含量增多有关。     

解热醒神注射液对内毒素性发热家兔下丘脑cAMP及IL-1β含量的影响

目的观察解热醒神(JRXS)注射液对内毒素(endotoxin,ET)性发热1h家兔体温、下丘脑(hypothalamus,HP)环一磷酸腺苷(cyclicadenosinemonophosphate,cAMP)及白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量的影响.方法20只新西兰家兔随机分为4组.NS组NS1.5mL/kgiv;JRXS组JRXS1.5mL/kgiv;ET组ET0.5μg/kgiv;JRXS+ET组JRXS1.5mL/kgiv,30min后,ETiv(剂量同ET组),观察1h后,穿刺小脑延髓池抽取脑脊液,然后取下丘脑组织,并分别按cAMP(上海中医药大学同位素室)及IL-1β放免试剂盒(中国人民解放军总医院科技开发中心产品)说明书进行含量测定.观察指标平均体温变化曲线;最大体温上升高度(△T℃);体温反应指数(thermalresponseindex,TRI);下丘脑、脑脊液的cAMP含量;下丘脑的IL-1β含量.所有实验数据用均数±标准差(眘)trtJRXS(P0.05)JRXSETJRXS+ETT(0.10.13)TRI10.36.62cAMP(1.36.27)nmol/gcAMP(14.40.69)nmol/LIL-1(2.90.37)ng/gETT(0.40.11)TRI11.78.79cAMP(2.90.40)nmol/gcAMP(32.10.51)nmol/LIL-1(6.08.79)ng/g(P0.01)cAMPcAMPIL-1(r1=0.918P0.05r20.926P0.05r3=0.868P0.01)JRXScAMP\,IL-1     

大鼠系膜增生性肾小球肾炎模型的病理形态学观察

目的 :观察大鼠系膜增生性肾小球肾炎 (MsPGN)模型的病理形态学变化。方法 :采用一次性鼠尾静脉注射小鼠抗大鼠Thy1 1单克隆抗体法复制大鼠MsPGN模型 ,应用光镜、荧光显微镜、偏振光显微镜及透射电镜观察模型大鼠肾小球系膜细胞及系膜基质的变化 ;结果 :系膜细胞明显增生 ,细胞外基质 ,包括Ⅰ、Ⅲ胶原、纤维粘连蛋白 (FN)及层粘连蛋白 (LN)增多 ,个别大鼠肾小球出现硬化及纤维化。结论 :复制出具有典型病变的大鼠MsPGN模型。     

解毒通络方对脑缺血损伤海马区突触可塑性的影响

目的　观察解毒通络方对大鼠脑缺血损伤后海马神经毯的突触形态与突触素P38的表达的影响。方法 :本文应用超微结构分析与免疫组化方法。结果　缺血损伤引起海马CA1区突触前成分溃变、突触数密度下降、突触素P38低水平表达 ;术后 8周 ,模型组与治疗组出现数量较多的新生突触和突触素P38表达水平的提高 ,治疗组突触数密度恢复最为显著 ,已达假手术组的 87 4% ,并明显高于模型组 ;与假手术组比较 ,模型组突触素P38表达COD值提高到 80 % ,而治疗组提高到 114 7% ,治疗组COD值显著高于模型组 (P<0 0 1)。结论　解毒通络方具有促进突触再建和增强、完善再建突触效能的作用