T_2毒素对大鼠心肌能量代谢的影响

目的　探讨 T2 毒素致大鼠心肌损伤的机制。方法　通过慢性毒理学实验 ,运用电镜酶学、生理酶学及高效液相色谱技术 ,观察 T2 毒素对大鼠心肌能量代谢的影响。结果　 T2 毒素可使大鼠心肌组织中 ATP含量、线粒体呼吸链呼吸酶、细胞色素氧化酶活力以及 ATP酶活力下降。结论　 T2 毒素可能通过损害大鼠心肌能量代谢而导致心肌不可逆损伤 ,加硒或加维生素 E可部分对抗这种损伤作用     

复方甘草甜素脂质体防治大鼠脂肪肝性肝纤维化

近年来,非酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的发病率增高,由其引起的肝纤维化和肝硬化发病率也有上升趋势.但因其发病机制复杂,迄今为止未找到有效的治疗药物~[1-2].     

受体激素水平对未成熟睾丸移植物中生精细胞的生长发育影响

目的 采用已建立的未成熟睾丸组织异体异位移植模型,研究受体小鼠激素水平变化对未成熟睾丸组织移植物生长发育的影响.方法 以免疫缺陷小鼠为受体,将新生1～2d龄昆明小鼠睾丸移植到受体小鼠背部皮下.在移植后不同阶段取出移植物,进行组织形态学观察,分析移植物中生精细胞的发育情况,同时采用放射免疫分析法检测受体动物血清中睾酮(T)、促卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)水平,并以同龄正常昆明小鼠作对照.结果 受体小鼠血清中LH水平没有明显波动,而T和FSH浓度在移植的前8周呈逐渐上升趋势,从9周以后开始下降,且显著低于正常受体内睾酮和FSH浓度,与组织学中所观察到的生精上皮受损程度的增加是同步的.结论 以上结果提示,应注意获取移植物中精子的最佳时间.对于小鼠来说,从新生小鼠睾丸移植物中获取精子的最佳时间是术后5-8周.     

5氮杂脱氧胞苷对鼻咽癌细胞RASSF1A基因甲基化和mRNA表达的影响

目的:研究5氮杂脱氧胞苷对鼻咽癌CNE2细胞中RASSF1A基因甲基化和mRNA表达的影响。方法:用不同浓度(0、5、10、20μmol/L)5氮杂脱氧胞苷处理CNE2细胞,采用甲基化特异性PCR(MSP)法对处理后细胞中RASSF1A基因甲基化状态进行检测;并用SYBR Green qReal Time-PCR法检测RASSF1A mRNA的表达。结果:阴性对照组CNE2细胞中,RASSF1A基因呈完全甲基化状态,当用5μmol/L 5氮杂脱氧胞苷处理后,CNE2细胞出现非甲基化产物,20μmol/L 5氮杂脱氧胞苷处理后,CNE2细胞甲基化状态完全被逆转,均为非甲基化产物。阴性对照组CNE2细胞RASSF1A基因呈低表达,经5～20μmol/L 5氮杂脱氧胞苷处理后,RASSF1A mRNA的相对表达量逐渐增加,10和20μmol/L 5氮杂脱氧胞苷处理组,RASSF1A mRNA表达水平均明显高于阴性对照组(P0.01);且20μmol/L处理组明显高于5μmol/L处理组(P0.01)。结论:CNE2细胞RASSF1A基因甲基化可以被5氮杂脱氧胞苷逆转,且5氮杂脱氧胞苷可促进RASSF1A mRNA的表达。     

人脐血干细胞分化为肝细胞的研究

目的探讨人脐血干细胞是否可以在体外模拟的肝损伤微环境中转化为肝细胞。方法将脐血单个核细胞(MNC)与受损伤小鼠肝脏共培养，采用RT—PCR方法对培养72h细胞的白蛋白(ALB)和GATA4 mRNA水平进行检测；同时用免疫细胞化学染色方法于不同培养时间检测培养细胞中ALB、甲胎蛋白(AFP)的表达。结果RT—PCR显示共培养72h时ALB、GATA4 mRNA表达为阳性。对照组人肝组织两者表达呈阳性，而同期培养的脐血MNC、正常小鼠肝脏组织及小鼠受损肝脏组织两者mRNA表达均呈阴性。免疫细胞化学染色进一步发现：共培养组于培养72h时ALB表达为阳性、AFP表达为阴性；培养48h时AFP染色呈阳性反应。同期培养的MNC细胞ALB、AFP免疫染色均为阴性。结论在脐血MNC与受损伤肝脏共培养的条件下，脐血干细胞有向肝细胞分化的趋向。     

小鼠睾丸移植物中3种生精阶段特异性基因的表达

目的 采用逆转录-聚合酶链反应，探讨新生小鼠睾丸组织移植到裸鼠体内后，3种阶段特异性基因，缺失型无精子基因（Daz1）、磷酸甘油激酶2（Pgk2）和鱼精蛋白-2（Prm2）在不同发育阶段移植物中的表达情况。方法 将180只出生1-2d昆明小鼠睾丸移植到60只7-12周去势雄性免疫缺陷小鼠背部；在移植后不同时间段（分为3d、1周-8周和12周10个组）取出移植物，对在发育不同阶段表达的3种基因出现的时间及表达情况进行分析测定，并与相应各年龄段正常小鼠睾丸中的基因表达相比较。同时进行组织形态学观察，对比各种基因出现的时间与小鼠睾丸发育周期的吻合性。结果 在10个时间段取出的移植物中，所测定的3种基因表达趋势与在正常昆明小鼠睾丸中所见基本相同，并与小鼠发育周期基本吻合。结论 新生小鼠睾丸组织移植到免疫缺陷小鼠体内后，生精细胞的发育在形态学和几种受试基因出现的时间上与在正常小鼠中表现均相似。从而对该睾丸组织移植模型用于生精细胞异体异位生长发育研究及基因调控机制研究的可行性提供了进一步的理论依据。     

氧自由基致大鼠心肌线粒体损伤及维生素C对其保护作用的实验研究

目的：在大鼠心肌线粒体自由基损伤的体外实验中,观察维生素C的保护作用,为治疗心肌缺血再灌注损伤提供实验依据。方法：采用黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统产生氧自由基,对分离的心肌线粒体进行体外损伤实验,通过电镜形态学和生物化学及同位素方法检测大鼠心肌线粒体病理变化、脂质过氧化物含量及摄钙能力。结果：黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统产生的氧自由基对心肌线粒体有损伤作用,电镜可见形态学改变,线粒体悬液中脂质过氧化物含量明显升高,线粒体摄钙能力明显降低。维生素C可减少大鼠心肌线粒体的形态学损伤,改善线粒体的摄钙能力。结论：氧自由基可在体外条件下对大鼠心肌线粒体产生损伤,这种损伤表现在电镜形态学改变,线粒体摄钙能力的减弱;维生素C能保护氧自由基损伤的大鼠心肌线粒体,保护机制是能直接减少氧自由基的生成。     

丹参对大鼠非酒精性脂肪性肝炎和脂质代谢的作用

目的观察丹参注射液对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)脂质代谢和糖代谢的干预作用。方法高脂饲料建立大鼠NASH模型,设正常组,模型组,复方甘草甜素对照组,低剂量丹参组和高剂量丹参组,检测大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、血糖(GLU)水平,参照2006年2月NAFLD诊疗指南中脂肪肝分度和炎症分级的组织病理学标准进行量化计分。结果高、低剂量丹参组比模型组及对照组血清GGT、AST水平显著下降;与对照组及低剂量丹参组比较,高剂量丹参组血清TC、GLU及肝组织炎症计分水平均显著下降。结论高剂量丹参注射液对高脂饮食诱发的大鼠脂肪性肝炎和脂肪代谢紊乱有一定的防治作用。