小鼠原始生精细胞裸鼠皮下移植动物模型的制作

目的制作睾丸组织异体异位移植动物模型,并观察原始生精细胞在异体异位继续生长、发育情况。方法将鼠龄为1～2d昆明小鼠睾丸组织移植至去势裸鼠背部(n=29),于移植后30～110d取出移植物,观察移植物的生长情况、表观形状以及各级生精细胞、生精上皮发育的期相情况。结果术后29只受鼠全部存活,在其背部均观察到移植物的生长,移植物直径由移植前的(0.73±0.05)mm增加到(6.75±0.73)mm,湿重由移植前(5.67±0.72)mg增加到(113.12±78.23)mg,受鼠皮肤血管已广泛深入到移植物内;光镜下可见移植物中生精小管结构清晰,移植物与受鼠皮肤之间建立了紧密连接,移植物中含有各级生精细胞及精子,在过碘酸Schiff(PAS)染色的移植物标本可见整个精子发生周期(从StageⅠ到StageⅫ)各阶段的生精细胞。结论新生小鼠睾丸组织移植到去势裸鼠背部能够继续生长、发育,可作为研究生精细胞增殖发育规律和精子发生调控机制的动物模型。     

T-2毒素对大鼠心肌损伤的形态学观察

实验用低剂量T-2毒素灌喂Wis-tar大鼠6个月,成功地复制出了T-2毒素对大鼠心肌慢性损伤模型,以其观察T-2毒素对心肌的损伤作用、易被损伤的部位、特点及损伤的机制.     

硒蛋亚硒酸钠对云南克山病病区儿童全血谷胱甘肽过氧化物酶活性影响的动态观察

选择云南楚雄克山病病区６～１０岁儿童作为观察对象，分为四组；服硒蛋组，服普通鸡蛋组．服亚硒酸钠药片组及对照组，连续３年动态观察将胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）的活性，结果表明：服硒蛋组全血ＧＳＨ－ＰＸ活性显著增高，显著高于其它各组，服硒片组ＧＳＨ－ＰＸ的活性也增高，与服普通鸡蛋组、对照组比有差异，但不如服硒蛋组明显。结果提示：病区长期服硒蛋和硒片都能提高全血ＧＳＨ－Ｐｘ的活性，但服硒蛋比单纯服硒片效果更好。     

复方甘草甜素脂质体干预大鼠非酒精性脂肪性肝炎的疗效观察

目的 观察复方甘草甜素脂质体对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的干预作用.方法 SD雄性大鼠35只随机分为4组,模型组、复方甘草甜素对照组和复方甘草甜素脂质体治疗组各10只,给予高脂饲料喂养,另设5只普通饲料喂养大鼠作为正常组.8周后开始腹腔内注射药物干预,16周后处死全部实验大鼠.全自动生化分析仪检测血清ALT、AST及GGT水平,参照2006年2月份的NAFLD诊疗指南中脂肪肝分度和炎症分级(NASH-F(0-4)G(0-3))的组织病理学标准进行量化计分.结果 与模型组相比,治疗组血清AST水平明显下降(P<0.05),血清GGT水平与肝组织炎症计分均显著下降(P<0.01);与对照组比较,治疗组肝组织炎症计分及血清GGT水平均显著降低(P0.01).结论 复方甘草甜素脂质体对高脂饮食诱发的大鼠脂肪性肝炎有一定的防治作用.     

脑缺血再灌注糖尿病大鼠海马CA1区凋亡基因的表达

目的 观察凋亡基因Bcl-2、Bax在糖尿病大鼠脑缺血再灌注海马CA1区神经元损伤中的表达。方法 采用链脲佐菌素（STZ）诱导和线栓法制备糖尿病大脑中动脉闭塞模型（MCAO）,应用HE染色和免疫组化方法比较糖尿病脑缺血再灌注组与缺血再灌注组海马CA1区神经元缺失、凋亡基因Bcl-2、Bax的表达。结果 糖尿病脑缺血再灌注组海马CA1区神经元缺失,明显高于缺血再灌注组（P〈0.05）;缺血再灌注组及糖尿病脑缺血再灌注组大鼠海马CA1区Bcl-2、Bax阳性染色阳性细胞与正常对照组及假手术组比增多,差异显著（P〈0.05）,而糖尿病脑缺血再灌注组比缺血再灌注组增加得更明显,差异有显著性（P〈0.05）,其中Bax上调幅度大。结论 糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤后海马CA1区细胞发生凋亡,Bcl-2、Bax介导的细胞凋亡机制可能是糖尿病加重脑缺血再灌注海马神经元损伤机制之一。     

小鼠精原细胞体外分化为精子细胞的研究

目的探讨在辅以外源生殖激素混合培养的小鼠睾丸细胞中,精原细胞向精子细胞的转化。方法采用7~8 d龄小鼠睾丸组织,以组合酶消化法制备睾丸细胞,在含重组卵泡刺激素(r-FSH)和睾酮的培养基中进行体外培养;定期观察细胞的生长和形态变化;用分子生物学和流式细胞技术对生长各阶段细胞进行分析。结果培养5 d即可观察到形态与大小类似于圆形精子细胞,7 d后可见带有鞭毛与变形的精子细胞;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)结果显示,培养前细胞的睾丸特异蛋白激酶(TESK1)与鱼精蛋白2(Prm2)mRNA表达阴性,培养9与17 d细胞TESK1与Prm2 mRNA表达均阳性;DNA倍体分析显示,培养5 d细胞有单倍体峰出现,并随培养天数增加而增加。结论在体外混合培养的小鼠睾丸细胞中加入外源生殖激素可以使精原细胞转化为精子细胞。     

冷冻保存未成熟睾丸组织移植后生精细胞的生长发育木

目的采用睾丸组织移植模型,探讨通过简单易行的冷冻保存程序保存未成熟睾丸组织,并使冷冻后的组织恢复生精过程的可能性,为该动物模型应用在保存雄性生殖细胞、帮助癌症患者保存生殖能力以及保存濒危物种等方面提供进一步的实验依据。方法用DMEM培养基加入二甲基亚砜配制冷冻保存液,将新生1～2d昆明小鼠睾丸组织按分步冷冻的方法进行冷冻,最终放入-80℃超低温冰箱中保存起来。2周后取出冻存的睾丸组织,移植到雄性去势免疫缺陷小鼠背部皮下,分别于移植后4周、5周和8周取材,制作HE染色切片,观察移植物中生精小管结构和生精细胞的组成,并与新鲜移植的睾丸组织进行对比分析。结果采用实验中的冷冻程序保存的新生小鼠睾丸组织,在冷冻保存一段时间后再移植,其表现与新鲜睾丸组织移植相同,其中末成熟的生精细胞可以在受体中继续生长发育,并完成整个生精过程,发育成为精子。结论本实验中所采用的睾丸组织冷冻保存方法具有不需特殊设备、简便易行、适用范围广泛等优点,适用于多种场合中生精细胞的冷冻保存。     

5氮杂脱氧胞苷对乳腺癌MCF-7细胞中抑癌基因p16mRNA表达的影响

目的 探讨5氮杂脱氧胞苷(5-aza-cdr)对乳腺癌细胞中p16基因mRNA表达的影响.方法 分别用5-aza-cdr 5、10和20 μmol/L处理乳腺癌细胞MCF-7,未处理的MCF-7细胞作为对照.采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)对药物处理前后的细胞进行p16基因甲基化检测;绿色荧光染料实时反转录聚合酶链反应(SYBR Green qRT-PCR)检测p16 mRNA表达.结果 在未处理的MCF-7细胞中(对照)p16基因呈完全甲基化状态,随着5-aza-cdr浓度增加,甲基化水平逐渐减弱,至5-aza-cdr 20 μmol/L时p16基因甲基化状态完全被逆转;p16 mRNA表达水平也随着药物剂量的递增逐渐增加,5-aza-cdr 20 μmol/L处理组与5、10 μmol/L处理组以及未处理组比较差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 乳腺癌细胞MCF-7中p16基因的甲基化能被5-aza-cdr逆转,去甲基化后可以促进p16 mRNA表达.     

硒、维生素E、锌与低硒、富锰引起大鼠心肌损伤的关系

目的探讨硒、维生素E(VE)、锌单因素及复合因素对低硒、富锰心肌损伤的影响。方法用低硒、富锰人工半合成饲料喂饲大白鼠8周。补充硒(0．3mg／kg)或VE(250mg／kg)或锌(200mg／kg)。结果单因素硒、VE、锌及复合因素均可使血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)活性提高，使心肌组织脂质过氧化物(LPO)值明显降低，心肌坏死检出率有降低的趋势。结论复合因素好于单因素，3因素明显好于双因素。     

低硒环境下锰与蛋白质对大鼠体内谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响

本实验观察在低硒（Ｓｅ）饮食环境下锰（Ｍｎ）与蛋白质对大鼠体内谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性的影响。实验结果表明，在低硒环境下低蛋白可降低大鼠全血、肝脏、心脏的ＧＳＨ－Ｐｘ活性；而低蛋白高锰的协同作用则更进一步降低大鼠体内ＧＳＨ－Ｐｘ的活性。