Agilent 2100 Bioanalyzer在人乳头瘤病毒检测中的应用

目的：探讨Agilent2100Bioanalyzer芯片分析系统（简称Bioanalyzer)在人乳头瘤病毒（HPV）的PCR检测和分组中的应用。方法：先分别进行通用引物介导PCR（GP－PCR）和型特异性引物介导PCR，扩增HPV高保守区（L1区）的共同序列和各型（包括HPV6，11，16和18型）的特型性序列，然后分别用常规的琼脂糖凝胶电泳技术和Bioanalyzer对PCR产物进行检测，并比较两种检测方法的准确度，重复性和灵敏度。结果：Bioanalyzer在确定片段长度时的准确度和重复性比琼脂糖凝胶电泳高，前者的准确度在95％以上，后者仅为85％，Bioanalyzer的检测灵敏度比琼脂糖凝胶电泳高100倍，结论：Bioanalyzer芯片分析系统结合PCR方法可对HPV进行特异，准确，稳定，灵敏的检测和型别鉴定，具有重要的推广价值。     

数字减影子宫输卵管造影术

目的:介绍和评价数字减影与自动高压注射器联合应用于子宫输卵管造影(HSG)。方法:自行设计造影用硅胶管使之能与自动高压注射器相联接,用40%泛影葡胺和数字减影方法作造影;随机抽取常规透视点片碘油造影片44份,数字减影泛影葡胺造影片50份进行对照分析。结果:两组比较:清晰度宫腔无显著性差异(P>0.05),输卵管有显著性差异(P<0.05);输卵管通畅率、血管或(和)淋巴管回流率有显著性差异(P<0.05)。盆腔涂布无显著性差异(P>0.05)。结论:采用数字减影与高压注射器行子宫输卵管造影能提高造影质量。     

红景天对高原去势大鼠骨质疏松症的血清IL-6、TNF-α和尿DPD影响

目的:探讨高原高寒地区低氧环境去势大鼠骨质疏松症与血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和尿脱氧吡啶酚(DPD)的关系及红景天预防骨质疏松的作用。方法:选用Wistar雌性大白鼠75只,分别摘除卵巢或假性去卵巢。分为A组(假手术组),B组(切除卵巢组),C组(切除卵巢 尼尔雌醇组),D组(切除卵巢 红景天混合饲料组),E组(切除卵巢 红景天浸液组)。每组15只,术后在海拔3100m青海海北州地区饲养,术后3个月处死,应用放免方法测定血清IL-6、TNF-α和化学发光法测定尿中DPD含量。结果:B组血清IL-6、TNF-α和尿DPD含量显著高于A、C、D、E组。C、D、E组血清IL-6、TNF-α和尿DPD含量与A组比较差异无显著性统计学意义。结论:红景天的抗高原骨质疏松症的作用可能与降低血清IL-6、TNF-α含量和尿中DPD浓度有关。     

载氧血红蛋白纯化工艺研究

目的改善心脑血管缺氧载氧药物是一种创新药物。由于它半径比红细胞小400~1 000倍,易于通过毛细血管,给缺血组织及时供氧,迅速缓解或纠正缺氧状态,达到治疗抢救目的。血红蛋白的纯化工艺是载氧药物研制的重要工艺步骤。方法本研究建立了一套通过热敏法分离纯化人脐带血血红蛋白的工艺以及较为完善的纯化血红蛋白质量检测指标。结果与现有的纯化方式相比,热敏法操作简便,仪器设备造价低廉,纯化与病毒灭活同时进行,得到的纯化产品损失少,纯度高,各项理化指标达到国际水平。结论本工艺适用于规模制备纯化血红蛋白,为进一步研制治疗心脑血管缺氧载氧药物创造了有利条件。     

手术结及打结方法的规范与进展

打结是手术的最基本技术之一，主要包括结扎打结（结扎血管、胆管、淋巴管等）、固定打结（固定引流管、引流条等）及缝合打结。手术不论大小都不能不做许多重复的打结动作，学习手术技术正是从学打结、练打结开始的。由于打结的操作太习以为常，许多手术医生对打结不够重视，对各种手术结并没有一个全面的了解和认识，甚至每日都在重复着不规范的打结操作。手术打结操作是否正确、熟练程度如何等不仅体现了手术医生的基本素质，而且直接关系到手术的效果，甚至关系到病人的安危。     

HIV抗体快速检测试剂的临床评估

目的:通过对HIV抗体快速检测试剂的临床评估,为HIV检测试剂的临床应用提供参考.方法:对快速试剂的使用性能进行比较,并采用美国输血协会(AABB)血清盘、临床样品血清盘、特性血清盘(阳性样品盘)、稀释系列血清盘评估快速试剂的敏感性和特异性.结果:三种快速试剂在检测AABB血清盘时,敏感性分别是86.4%、86.4%、100%,特异性皆为100%;三种快速试剂在检测临床样品血清盘时,敏感性分别是88.6%、91.4%、97.1%,特异性皆为100%.快速试剂具有很高的阳性预期值,对于低危人群(感染率很低人群)也具有很高的阴性预期值.快速试剂检测弱阳性的样品(酶联试剂s/co比值小于6～8的样品)存在漏检.快速试剂与ELISA参考试剂在分析灵敏度方面相差3个以上倍比稀释度.结论:快速试剂具有较好的使用特性,非常适用于样本量较少的实验室及对低危人群的HIV筛查,在对高危人群筛查时,可能有弱阳性样品漏检,同时快速试剂在分析灵敏度方面有待提高.     

Expression of CⅡTA Gene in Five Human Malignant Hematological Cell Lines and Its Significance

The role of MHC class Ⅱ transactivator (CⅡTA) in constitutive or IFN-γ inducib|e expression of HLA molecules in human malignant hematological cell lines was investigated. The expression of HLA molecules and CⅡTA protein was detected by Western blot, immunohistochemistry and flow cytometry. The expression of CⅡTA gene was determined by RT-PCR. The capability of peripheral blood T cell reaction stimulated by tumor cells was monitored by mixed lymphocyte reaction. It was found that the HLA Ⅱ-positive tumor cells expressed the CⅡTA quite well, andthe expression of HLA Ⅰ＋Ⅱ was increased in the tumor cells with constitutive or inducible expression of CⅡTA after induced by IFN-γ. The tumor cells which did not express CⅡTA after in-duced by IFN-γ were not response to the expression of HLA Ⅱ promoted by IFN-γ. It suggests a correlation between the inability of some malignant hematological cell lines in response to IFN-γ for HLA expression and the deficiency in the inducible expression of CⅡTA, indicating CⅡTA might take part in the regu|ation of HLA Ⅰ＋Ⅱ expression in the tumor cells, which might p|ay an important role in tumor immunologic escape.     

Poly-L-Lysine玻片在寡核苷酸芯片制备中的改进

目的 为了制得适合固定未修饰寡核苷酸的芯片，提高检测灵敏性，对Patrick Brown实验室的多聚左旋赖氨酸包被玻片的方法进行改进。方法 玻片经清洗后用缩水甘油-丙氧基三甲氧基硅烷进行硅烷化，然后应用Poly-L-Lysine在玻片表面形成聚合物涂层，经次亚苯基二异硫氰酸盐表面活化后可使寡核苷酸共价连接在芯片表面。设计了各种实验考察方法改进前后芯片表面的性能，并将改进后的玻片初步应用于SARS冠状病毒寡核苷酸芯片检测中。结果 方法改进后芯片表面性能优良：固定效率高、点的同一性好、杂交效率和热稳定性好、寡核苷酸结合牢固、芯片可以重复利用。结论 利用共价连接，方法改进后的芯片表面适合固定未修饰的寡核苷酸，解决了寡核苷酸与玻片之间物理结合不稳定、易剥离的缺陷，提高了芯片检测的灵敏性。     

中药安迪对HL-60细胞分化的诱导作用

目的　探讨安迪粉针剂 (Andi)对 HL- 60细胞分化的诱导作用 .方法　采用人早幼粒白血病细胞株 (HL - 60 )为靶细胞 ,分为不加任何药物的对照组 (C组 )、安迪粉针剂 (Andi)组、阳性对照药维甲酸 (RA)组和苦参 (KS)组 ,进行体外培养和诱导分化 ,观测细胞生长曲线、细胞形态、硝基蓝四氮唑(NBT)还原和吞噬能力等指标 .结果　 2 mg· L-1 Andi可显著地抑制 HL - 60细胞增殖 ,使原始细胞分化为中幼以下的成熟细胞 ,分化后的细胞具有 NBT还原能力和吞噬功能 ;Andi为 68.0 % ,RA为 61 .5% ,KS为 59.0 % ,C组还原能力仅6.0 % (P<0 .0 1 vs C) .其形态的改变和吞噬能力与阳性对照药维甲酸 (RA)和苦参 (KS)相似 ,分别为 52 .0 % ,45.5%和56.5% (P>0 .0 5) ;均明显高于空白对照组 .C组吞噬功能仅7.5% (P <0 .0 1 vs C)其 NBT还原能力与 KS相当 (P >0 .0 5) .结论　 Andi对 HL - 60细胞具有显著的诱导分化作用     

臭氧水对SARS病毒的灭活效果观察

为了观察电解法产生的臭氧水对SARS病毒的灭活效果,采用悬液灭活试验法进行了试验。结果,以臭氧含量为27.73mg/L,作用4min可完全灭活SARS病毒;以臭氧含量为17.82mg/L,作用4min和4.86mg/L作用10min,均可使SARS病毒的灭活率达100％。结论,电解法产生的臭氧水含臭氧量达到4.86mg/L以上,对悬液内SARS病毒具有很强的灭活效果。