高效液相色谱法测定藿香正气水中橙皮苷等4种成分的含量

目的建立以高效液相色谱法测定藿香正气水中橙皮苷、甘草苷、厚朴酚和和厚朴酚含量的方法。方法色谱柱为C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),梯度洗脱;检测波长285 nm;流速0.8 m l/m in。结果橙皮苷、甘草苷、厚朴酚和厚朴酚进样量0.091 1~2.277 5,1.44~36,0.594 6~14.865,1.086~27.15μg之间呈良好的线性关系;它们的平均回收率为99.48%(RSD=0.979 7%),99.505%(RSD=1.22%),98.89%(RSD=1.201 1%)和98.89%(RSD=1.07%)。结论该方法稳定可靠,重现性好,提供了藿香正气水的质量控制方法。     

HPLC法测定救必应药材中冬青素A的含量

目的 建立救必应药材中冬青素A的含量测定方法.方法 采用反相高效液相色谱法.色谱柱:Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)与0.4％磷酸(B),梯度洗脱;体积流量:1mL·min-1;检测波长:210 nm;柱温:25℃;进样量:20 μL.结果 冬青素A在12.5～500 μg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率为99.22％,RSD=1.85％(n=6).结论 该方法简便、准确、可靠且分离度好,可用于救必应药材中冬青素A的含量测定.     

新清开灵注射液对大鼠脑出血后脑组织TNF-α、SOD的影响

目的：观察新清开灵注射液对胶原酶诱导大鼠脑出血后脑组织肿瘤坏死因子（TNF-α）、超氧化物歧化酶（DOS）的影响。方法：Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血，造模成功的大鼠尾静脉注射新清开灵注射液，48h后采用双抗体夹心ELISA法测脑组织匀浆TNF-α活性，黄嘌呤氧化酶法测脑组织SOD的含量。结果：新清开灵注射液能明显降低胶原酶诱导大鼠脑出血后脑组织TNF-α含量、显著升高脑组织SOD含量。结论：新清开灵注射液对脑出血后神经细胞损伤具有保护作用，其机制可能与抗自由基损伤、抑制TNF-α毒性作用有关。     

鸟巢蕨水提取液对兔成骨细胞的影响

目的研究鸟巢蕨水提取液对体外培养成骨细胞增殖及分化作用的影响,探讨其促进骨折愈合、防治骨质疏松的机制。方法将不同浓度的鸟巢蕨提取液（分别为0g/L、1.0g/L、1.2g/L、1.4g/L、1.5g/L、1.6g/L、2.0g/L,共7组）与成骨细胞共同体外培养,进行相应的干预。观察细胞形态,检测成骨细胞增殖与分化指标（包括Ⅰ型胶原蛋白、碱性磷酸酶、骨钙素量、钙盐沉积量和矿化结节）。结果与同一时间点的空白组比较,除第1天的1.0g/L组外,其余各组的成骨细胞增殖差异均具有统计学意义（P〈0.01）。与空白组比较,其余组别平均光密度值、碱性磷酸酶含量、骨钙素含量、钙沉积量差异均具有统计学意义（P〈0.01）。与空白组比较,除1.0g/L组外,其余组别矿化结节数差异均具有统计学意义（P〈0.01）。同一时间点1.6g/L组与2.0g/L组比较,成骨细胞增殖差异均无统计学意义（P〉0.05）;1.6g/L组与2.0g/L组比较,平均光密度值、碱性磷酸酶含量、骨钙素含量、矿化结节数差异无统计学意义（P〉0.05）,钙沉积量差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论鸟巢蕨水提取液对成骨细胞的增殖分化具有促进作用,适宜浓度下具有促进成骨细胞增殖分化作用,过高浓度后作用达到饱和。     

小檗碱对肝细胞核因子4α表达及葡萄糖激酶活性的影响

目的：观察小檗碱对小鼠原代肝细胞核因子4α(HNF4α)表达及葡萄糖代谢关键酶葡萄糖激酶(GK)活性的影响，探讨小檗碱治疗2型糖尿病的分子机制。方法：采用改良两步灌流法培养小鼠原代肝细胞，用不同浓度的小檗碱(0, 1，3，10，30，100 μmol·L^-1)和1 mmol·L^-1二甲双胍干预24 h后，采用RT-PCR方法检测HNF4α mRNA表达；采用Western-blot方法检测HNF4α蛋白的表达，同时检测GK的活性。结果：与阴性对照组相比，小檗碱在10，30，100 μmol·L^-1时能够明显促进HNF4α mRNA及蛋白的表达，二者同时在30 μmol·L^-1时达到最大值(HNF4α mRNA相对吸光度为0.48±0.20,蛋白相对吸光度为3.47±0.86，P<0.01)；在10，30 μmol·L^-1时明显上调GK活性，同时在30 μmol·L^-1时达到最大值(0.080±0.073， P<0.05)；而二甲双胍对HNF4α mRNA、蛋白的表达及对GK活性的影响则与阴性对照组无明显差异。结论：小檗碱改善糖代谢的作用可能与其调节肝细胞核因子4α的表达进而调节GK活性有关。     

沙海参中的三个海参皂苷

目的：研究沙海参体内的化学成分，寻找结构新颖的三萜皂苷类化合物。方法：应用多种色谱技术对沙海参体内的化学成分进行分离纯化，根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果：分离得到三个三萜皂苷化合物，分别为arenicolaside　A（1），fuscocineroside C（2）和holothurin A（3）。结论：化合物1为一个新的三萜皂苷化合物，化合物2、3均为首次从沙海参中分离得到.     

功能锻炼配合青鹏膏外用治疗轻度肩关节周围炎随机对照研究

目的：观察功能锻炼配合青鹏膏外用治疗轻度肩关节周围炎的疗效。方法：将200例轻度肩周炎患者,随机分为功能锻炼配合青鹏膏外用治疗组和单纯功能锻炼对照组各100例。治疗组在局部外用青鹏膏后,进行双手爬墙、挽背健手拉患手及前屈患手摸对侧耳朵锻炼,2次/d,每次以上3个锻炼动作各作10次,30d为1个疗程。对照组单纯进行锻炼,疗程同治疗组。采用肩关节周围炎疗效评定量表观察治疗前后2组患者的肩关节疼痛评分、肩关节日常活动评分及日常生活能力评分。结果：2组患者肩关节疼痛评分、肩关节活功能评分及日常生活能力评分治疗后均较治疗前提高,差异均有统计学意义（治疗组P〈0.01,对照组P〈0.05）,治疗后组间比较,治疗组较对照组提高更明显,差异亦具有统计学意义（肩关节疼痛评分P〈0.01,肩关节活动功能及日常生活能力评分P〈0.05）。结论：功能锻炼配合青鹏膏外用治疗轻度肩关节周围炎疗效显著。     

加热处理对白芷中欧前胡素、异欧前胡素稳定性及酪氨酸酶活性的影响

研究中药白芷中香豆素类成分的稳定性,及不同加热白芷对酪氨酸酶活性的影响。白芷用不同加热处理后,应用HPLC测定欧前胡素和异欧前胡素的含量;采用体外酪氨酸酶多巴速率氧化微量法测定热处理白芷后对酪氨酸酶活性的影响。加热后欧前胡素含量升高;除90℃加热2 h外,异欧前胡素含量亦高于生品。白芷加热前后均对酪氨酸酶具有激活作用,同一温度和处理时间下,对酪氨酸酶的激活作用随白芷提取物浓度升高而增强。热处理使白芷2种香豆素类成分含量发生变化,并影响其对酪氨酸酶的激活率,均以升高为主。     

中药青天葵组培球茎栽培的研究

目的：通过栽培试验,弄清青天葵组培球茎生育特性,为大面积栽培组培球茎提供科学依据。方法：采用常规栽培管理方式,分组种植对比。结果与结论：青天葵组培球茎周年皆可栽培;大小球茎均能发芽成苗;组培球茎优于野生球茎。     

黄连解毒汤联合氟康唑对耐药白念珠菌麦角甾醇的影响

目的:探讨黄连解毒汤乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract of Huanglian Jiedu decoction,EAHD)联合氟康唑(fluconazole,FLZ)对耐药白念珠菌生物膜麦角甾醇的影响。方法:采用CLSI M27-A3的微量稀释法测定EAHD与FLZ对白念珠菌FLZ耐药株的MIC与SMIC80;棋盘稀释法测定EAHD与FLZ联用对白念珠菌的协同效应;稀释涂布平板法考察EAHD与FLZ联用不同时间对菌体的杀伤作用;分别用HPLC和qRT-PCR法检测耐药白念珠菌生物膜麦角甾醇含量及相关基因的变化。结果:对于9株白念珠菌FLZ耐药株,EAHD对其MIC介于156~1 250 mg·L-1,FLZ对其MIC介于256~2 048 mg·L-1以上,二者联用后MIC显著降低,FICI(部分抑菌浓度指数)最低达0.066;EAHD单用对其SMIC80均高于1 250 mg·L-1,FLZ单用对其SMIC80均高于512 mg·L-1,最高可达2 048 mg·L-1以上,联用组除个别组具有相加作用外也均有协同效应。时间杀菌(time kill,TK)实验显示当作用12 h,二者联用杀菌效应最强。HPLC结果显示联用组、EAHD组与空白组麦角甾醇量相比,分别降低了近85%,50%。qRT-PCR检测FLZ组ERG1,ERG2,ERG6,ERG7,ERG11均上调,ACS1,ACS2,MET6均下调;EAHD组所有基因均下调;联用组ERG2,ERG6,ERG11均显著上调,ERG1,ERG7,ACS1,ACS2,MET6均显著下调。结论:EAHD协同FLZ抗白念珠菌耐药株,可能与抑制麦角甾醇合成相关基因的表达来降低麦角甾醇的合成有关,造成细胞膜损伤,抑制菌体生长。