体外阻断CD_(40)-CD_(40)L共刺激途径减轻小鼠异基因骨髓移植中移植物抗宿主病的研究

目的　在异基因骨髓移植移植物抗宿主病 (GVHD)小鼠模型中 ,观察抗CD4 0 L单克隆抗体 (单抗 )体外预处理供鼠T细胞输注 ,观察其减轻GVHD的作用并探讨其作用机制。方法　供鼠(C5 7BL 6 H 2b)脾T细胞作为反应细胞 ,受鼠 (BALB cH 2d)脾细胞作为刺激细胞 ,分别加抗CD4 0 L单抗或不加单抗进行混合培养 ,培养第 5天的细胞作为经体外诱导后的脾T淋巴细胞 ,分别混合供鼠骨髓细胞后移植给接受 8.0Gy全身照射预处理的受鼠。比较受鼠GVHD发生和造血重建。在移植后不同时间点采用流式细胞仪检测受鼠脾细胞中T细胞表型的改变 ,用ELISA法检测外周血血清中Th1和Th2类细胞因子的水平。结果　移植后对照组受鼠均于 2 5d内死于GVHD ,实验组GVHD的发生率为2 0 % ,与对照组小鼠相比 ,存活率和存活时间明显增高和延长 (P <0 0 1) ;存活的实验组小鼠 (8只 )第4 0天时骨髓细胞中H 2Db 阳性细胞为 (93.5 4± 2 .32 ) %。实验组小鼠CD3+ CD4+ 、CD3+ CD8+ 、CD4+CD2 5+ 、CD4+ CD6 9+ 、CD8+ CD2 5+ 、CD4+ CD4 0 L+ 和CD8+ CD6 9+ T细胞比例明显低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,CD8+ CD4 0 L+ 和CD4+ CD4 5RA+ T细胞比例在两组中变化差异无显著性 (P >0 .0 5 )。实验组受鼠血清中细胞因子水平明显低于对照组 (P <0 .0 5 )。结论　应     

儿童造血干细胞移植后出血性膀胱炎:临床特征与危险因素

背景:出血性膀胱炎是造血干细胞移植后常见并发症之一,探讨其临床特征及发病的危险因素对改善造血干细胞移植效果有重要应用意义. 目的:观察小儿造血干细胞移植后出血性膀胱炎发病情况,并分析其临床特点以及发病危险因素.设计:病例分析.单位:中山大学附属第二医院儿科造血干细胞移植中心.对象:选择1998-10/2004-06在中山大学附属第二医院儿科HSCT中心88例接受脐血移植与外周血造血干细胞移植患儿,男49例,女39例,年龄2～18岁,平均8.0岁. 所有患儿家属对治疗知情同意.实验经过医院伦理委员会批准许可.方法:①患儿预处理方案主要有环磷酰胺(120～200 mg/kg)和马利兰(Bu,14～20 mg/kg)组成为主的化疗方案,以及环磷酰胺联合全淋巴照射(2-8Gy)或全身照射(2-8Gy)组成的放疗方案.②按文献[7]及[8]标准诊断及对出血性膀胱炎分类;观察患者出血性膀胱炎发生率、临床特征、实验室检查及治疗与转归;分析年龄、性别、供受者人类白细胞抗原配型、移植病种、移植类型、移植方式、急性移植物抗宿主病的发生、巨细胞病毒感染对出血性膀胱炎发生的影响.主要观察指标:①患儿出血性膀胱炎发生率.②临床特征与实验室检查.③治疗与转归.④出血性膀胱炎发生的危险因素. 结果:纳入患儿88例均进入结果分析.①出血性膀胱炎发生率:16例(18.2%,16/88)患儿发生出血性膀胱炎,其中轻度11例(68.7%),重度5例.②临床特征与实验室检查:患儿均有血尿,其中典型尿频、尿急、尿痛及肉眼血尿8例(50.0%);肉眼血尿10例(62.5%);11例蛋白尿( ～ ),7例白细胞增高.③治疗与转归:所有出血性膀胱炎患儿均痊愈,病程2～53 d.④出血性膀胱炎发生危险因素:受者移植年龄≥6岁、急性移植物抗宿主病阳性及巨细胞病毒感染出血性膀胱炎发生率分别高于年龄＜6岁、GVHD阴性及巨细胞病毒未感染患儿,差异有统计学意义(P < 0.05～0.01).结论:①儿童造血干细胞移植后出血性膀胱炎有其自身的临床特征,预后多良好.②受者移植年龄≥6岁、急性移植物抗宿主病阳性、巨细胞病毒感染可能为其发生的危险因素.     

亚致死量~(60)Coγ射线照射后小鼠骨髓造血细胞程序性死亡特性研究

照射可引起免疫器官萎缩和免疫功能抑制,研究发现其机制为照射后胸腺细胞发生了程序性死亡(programmed cell death,PCD)。骨髓组织对射线也很敏感,造血细胞辐射损伤机制目前尚不清楚。本实验研究从超微结构、DNA裂解、PI染色FACS分析等方面,动态地观察了~(60)Coγ射线照射后小鼠骨髓细胞的变化。实验采用成年SPFBALB/c小鼠。2.0,4.0,6.0Gy照射后6小时透射电镜显示细胞出现空泡,有不同程度的固缩;第3,6,9,12,24,36小时测得DNA裂解百分率较对照组增高;27000×g上清DNA琼脂糖凝胶电泳有大量小分子片段,分子量约为180bp的整倍数,呈典型梯状图谱;FACS分析也表明PCD细胞百分率于第3小时增高,渐增强,24小时达高峰。实验表明,亚致死量照射可引起骨髓有核细胞PCD。由于造血干细胞在形态上难以辨认,故射线有无引起造血干细胞PCD尚不能肯定,有待进一步研究。     

儿童造血干细胞移植的现状与问题──儿科疾病(11)

1 引言 造血干细胞移植(hematopoietic stem cells transplantation,HSCT)已成为治疗小儿血液系统肿瘤、骨髓衰竭性疾病、遗传性血液病、遗传性代谢病及免疫缺陷病等疾病的一种有效手段.HSCT根据造血干细胞来源的不同分为:自体HSCT和异基因HSCT.     

非血缘供者脐血移植治疗14例儿童白血病的临床研究

为探讨HLA不全相合非血缘供者脐血移植(UD—UCBT)治疗儿童白血病的疗效，我们于2000年11月至2003年12月对14例白血病患儿进行了UD—UCBT治疗，取得了较好的效果。     

肾病综合征鼠模型生长障碍的特点及机制

目的探讨肾病综合征(NS)鼠生长障碍的特点及机制.方法制备大鼠阿霉素NS模型,测NS鼠和正常鼠的身长、体重、尿蛋白、血清生化指标,用放免法和免疫放射法分别测定血、尿IGF-I、IGFBP-3水平,用RT-PCR法测定肝组织IGF-I mRNA、IGFBP-3 mRNA表达水平.结果第4周末,NS组进食量、体重增长和身长增长均低于正常组,P＜0.05;NS组24hr尿蛋白定量高于正常组,P＜0.05;NS组血Alb、Chol、TG水平低于正常组,P＜0.05;NS组血IGF-I、IGFBP-3水平低于正常组,而尿IGF-I、IGFBP-3高于正常组,P＜0.05;两组肝IGF-I mRNA表达量之间的差别无统计学意义(P＞0.05);NS组肝IGFBP-3 mRNA表达量低于正常组,P＜0.01.相关分析NS组的血IGF-I与尿IGF-I负相关,血IGFBP水平与身长正相关,肝IGFBP-3 mRNA表达量与血IGFBP水平正相关.结论NS鼠存在生长障碍和IGF-I、IGFBP-3代谢紊乱;血IGF-I、IGFBP-3浓度降低是NS鼠生长障碍的主要原因之一.     

体外定向诱导人胚胎干细胞分化为表皮样干细胞的研究

目的 探索体外定向诱导人胚胎干细胞（hES细胞）分化为表皮样干细胞的条件，为研究其定向分化机理及寻找新的皮肤组织工程种子细胞奠定基础。方法 将人胚胎干细胞单独（对照组）或与人羊膜上皮面向上全铺或半铺布半孔底共培养4－5d，观察其形态变化并分别用β1整合素，CK15及CK19免疫组化检测人胚胎干细胞向表皮样干细胞的分化。结果 人胚胎干细胞与人羊膜共培养4－5d后，在人羊膜上皮面形成表皮样干细胞集落，表达高水平的表皮干细胞异标记物β1整合素，CK15和CK19。在无羊膜覆盖处，细胞贴壁生长，形成单层表皮样细胞，细胞呈多边形，排列紧密，大部细胞表达β1整合素。对照组大理细胞死亡，未见β1整合素阳性细胞。结论 在体外人羊膜可定向诱导人胚胎干细胞分化为表皮样干细胞，并提示在羊膜上皮面的细胞克隆可能是表皮样干细胞，而贴壁生长的细胞可能大部分是表皮样瞬间放大细胞。     

胚胎干细胞诱导分化为造血细胞的研究进展

干细胞研究是生命科学中最受重视的领域之一,而胚胎干细胞分离、培养的成功和体外诱导分化为各类型组织细胞潜能的发现,使该领域的研究实现了一次革命性的突破。本文就胚胎干细胞的来源和特性,在造血细胞分化发育、基因调控研究中的应用,以及诱导分化为造血细胞的方法和重建造血功能的情况进行综述。     

儿童原发性醛固酮增多症一例报告

原发性醛固酮增多症是因肾上腺球状带或束状带的病变(腺瘤、增殖或癌)致醛固酮分泌增多而引起电解质代谢紊乱的综合征。本病在小儿时期甚为少见。现将本院经手术证实的一例儿童患者报告如下。患者,男性,12岁,住院号149114。因左大腿疼痛3个多月,跛行10余天,于1973年2月28日入院。3个多月前左大腿持续性隐痛,活动时加剧,无抽搐、麻木,10天前左下     

红细胞生成素不足在早产儿贫血中的作用的初步研究(摘要)

红细胞生成素不足在早产儿贫血中的作用的初步研究（摘要）李文益，黄绍良，庄思齐，侯玲玉，郑念时中山医科大学孙逸仙纪念医院本文采用甲基纤维素为支持物的体外红系祖细胞培养方法，对１５例早产儿（其中９例贫血，６例未发生贫血）的外周血在不同重组人红细胞生成素（...