脐血与成人外周血血浆对脂多糖诱导的血管内皮细胞TLR4/NF-кB表达的影响

目的:探讨脐血血浆与成人外周血血浆对脂多糖(LPS)诱导的血管内皮细胞TLR4/NF-кB表达的影响.方法:采集剖宫产分娩的足月健康孕妇脐血和健康成人外周血各20份,制备血浆.将体外培养的人脐静脉内皮细胞ECV304分为两组,(1)脐血组,加入1 μg/mL的LPS和10%的脐血血浆;(2)成人外周血组,加入1 μg/mL的LPS和10%的成人外周血血浆.逆转录-聚合酶链反应检测TLR4 mRNA的表达,免疫印迹法检测TLR4、IкBα蛋白的表达.结果:脐血组TLR4 mRNA及TLR4蛋白的表达量显著低于成人外周血组(P<0.01),脐血组IкBα的蛋白表达量显著高于成人外周血组(P<0.01).结论:脐血血浆抑制LPS诱导的内皮细胞TLR4/NF-кB活化,从而抑制其炎症反应.     

重度子痫前期并发急性肺水肿相关指标分析

目的分析重度子痫前期并发急性肺水肿相关指标的变化情况。方法回顾性分析温州市中西医结合医院及温州医科大学附属第一医院产科2006年1月-2016年6月收治的重度子痫前期患者152例。重度子痫前期并发急性肺水肿的22例患者为观察组,重度子痫前期未并发急性肺水肿的130例患者为对照组。对两组患者手术前后心率、呼吸、血氧饱和度、B型利钠肽(BNP)、肌钙蛋白Ⅰ等实验室指标及心脏超声指标如左室射血分数(LVEF)等进行比较分析。结果重度子痫前期的发生率为0.3%,重度子痫前期并发急性肺水肿的发生率为14.5%,占同期妊娠分娩总数的0.4‰;观察组术前心率、呼吸及BNP均高于对照组,血氧饱和度及LVEF均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);观察组术后血清肌酐、肌钙蛋白Ⅰ及D-二聚体与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组术后下肢静脉血栓的发生率为9.1%,对照组为0.8%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论重度子痫前期是发生急性肺水肿的重要原因。在重度子痫前期患者中,急性肺水肿的发生对心、肾功能的影响较大,可能增加血栓性疾病的发生风险。早识别、早治疗、积极终止妊娠可改善其围产结局。     

选择性动脉栓塞治疗在产科的临床应用价值

目的:观察选择性动脉栓塞治疗在产科的临床应用价值。方法:回顾性分析19例接受选择性动脉栓塞的产科患者,所有病例均采用Seldinger技术行右股动脉穿刺插管双侧髂内动脉造影,明确部位后,超选择双侧子宫动脉插管注入明胶海绵颗粒,阻断供血,行子宫动脉或髂内动脉栓塞。结果:栓塞术后,产后出血患者出血停止,前置胎盘患者成功引产,所有患者均无复发出血及严重并发症发生。结论:选择性动脉栓塞是治疗产科患者微创、有效的方法。     

晚期产后出血预防新策略

晚期产后出血指分娩24小时后,在产褥期内发生的子宫大量出血,出血量超过500ml。产后1～2周发病最常见,亦有迟至产后6周发病。和早期产后出血不同,晚期产后出血量没法确切估计,阴道流血可以从恶露增多到大量的产后出血不等,以致于诊断比较主观。晚期产后出血的病因各种各样,常见的病因主要是宫缩乏力及子宫复旧不全、生殖道下段的损伤、胎盘异常、子宫异常、剖宫产切口裂开或手术损伤、绒癌、出血性疾病、凝血功能障碍和抗凝剂的使用等。随着社会的发展,产妇晚期产后出血的死亡率也随之下降。现在,我们把注意力转移到如何降低和预     

地诺前列酮栓和催产素在足月胎膜早破中引产效果的临床观察

<正>足月胎膜早破是指妊娠37周后出现临产前的胎膜破裂,大约10%足月妊娠产妇可出现胎膜早破。胎膜早破后容易出现胎儿宫内感染、胎儿宫内窘迫、脐带脱垂、胎死宫内等并发症。根据产科临床治疗指南,在足月胎膜早破孕妇中,如果观察12h之后尚未临产,则积极引产[1]。本文就地诺前列酮栓(欣普贝生栓剂)在足月胎膜早破且宫颈评分较低孕妇中的引产效果进行观察,并与同期催产素引产的效果进行比较,现报告如下。     

重度子痫前期患者外周血和脐血中内皮祖细胞的变化及临床意义

子痫前期是常见而又严重威胁母婴安全的妊娠特发性疾病.对于子痫前期的病因学说众说纷纭,但比较公认的是,血管内皮细胞损伤是子痫前期发病的中心环节.内皮祖细胞是一群能增殖分化为成熟内皮细胞的祖细胞.最近研究表明,内皮祖细胞不仪参与人胚胎血管生成,同时也参与内皮损伤后的修复过程 [1-2].大量研究表明,多种血管性疾病均与内皮祖细胞相关.本研究通过检测重度子痫前期患者外周血和脐血中的内皮祖细胞数量和功能的变化,探讨内皮祖细胞在子痫前期发病中的作用.     

RECK基因在子痫前期患者胎盘的表达及其与MMP-2活化的关系

目的 通过检测RECK基因在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其与MMP-2活化的关系,探讨RECK基因在胎盘滋养细胞浸润机制中的作用.方法 分别采用RT-PCR、Western blot检测正常妊娠孕妇(正常妊娠组,22例)、子痫前期孕妇(其中轻度22例,重度20例)胎盘组织中RECK mRNA和蛋白的表达;采用明胶酶谱法检测3组孕妇胎盘组织中MMP-2的活化比例.结果 轻度、重度子痫前期组胎盘组织中RECK mRNA、蛋白的表达水平均明显高于正常妊娠组,且重度子痫前期组RECK mRNA、蛋白的表达水平均明显高于轻度子痫前期组,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.01);而轻度、重度子痫前期组MMP-2的活化比例均明显低于正常妊娠组,且重度子痫前期组MMP-2的活化比例明显低于轻度子痫前期组,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.01).正常妊娠组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组胎盘组织中RECK mRNA及其蛋白表达与MMP-2的活化比例均呈负相关关系(均P<0.01).结论 子痫前期孕妇胎盘组织中RECK表达异常升高,MMP-2活性受到抑制,可能参与了胎盘滋养细胞浅浸润过程.     

黄连素改善妊娠期糖尿病大鼠胰岛素抵抗及其机制研究

目的 观察黄连素对高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导的妊娠期糖尿病(GDM)大鼠的作用及其可能机制。 方法 采用高脂饲料喂养雌性SD大鼠5周,交配受孕后第1天腹腔注射STZ(25 mg/kg)建立GDM大鼠模型,妊娠第1~19天黄连素溶液[200 mg/(kg·d)]灌胃干预。监测各组大鼠孕期空腹血糖和胰岛素抵抗指数的变化。于妊娠第20天剖宫取胎,测量各组胎鼠和胎盘重量,通过实时荧光定量PCR法和ELISA法检测各组肝脏组织CRP、TNF-α基因和蛋白水平,通过Western blotting法检测肝脏细胞IKKβ和NF-κB蛋白的表达。 结果 与正常妊娠组相比,模型组孕鼠空腹血糖和胰岛素抵抗指数明显升高(均P＜0.05),胎鼠和胎盘的重量明显增加(均P＜0.05),肝脏组织CRP、TNF-α基因和蛋白表达增多(均P＜0.05),肝细胞IKKβ蛋白和核NF-κB蛋白的表达增多(均P＜0.05)。经黄连素干预后GDM孕鼠肝脏细胞浆IKKβ蛋白和核NF-κB蛋白表达减少(均P＜0.05),CRP、TNF-α基因和蛋白表达减少(均P＜0.05),胰岛素抵抗指数和空腹血糖降低(均P＜0.05)。 结论 黄连素可以通过IKK/NF-κB信号通路,抑制NF-κB核转位,降低GDM模型大鼠肝脏组织中的炎症反应,从而改善胰岛素抵抗,降低血糖水平。      

脂氧素对滋养细胞氧化损伤的保护作用及其机制

目的研究脂氧素(lipoxinA4,LXA4)在孕妇血清中的表达及其对滋养细胞氧化损伤的保护作用和作用机制.方法 细胞实验分为6组,对照组;脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)组:10 μg/ml LPS作用24 h;干预组:10 μg/ml LPS+100 nmol/L LXA4作用24 h;LXA4组:100 nmol/L LXA4作用24 h;拮抗组:10 μg/ml LPS+100 nmol/L LXA4+100 μmol/L N-叔丁氧羰基吡咯烷(N-tert-butoxycarbonyl-2-pyrrolidine,BOC-2)作用24 h;BOC-2组:10μg/ml LPS+100 μmol/L BOC-2 作用24 h.采用酶联免疫吸附试验检测正常孕妇与子痫前期患者血清LXA4含量;以2,7-二氢二氯荧光素二乙酸酯为荧光探针检测滋养细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;逆转录-聚合酶链反应检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD) mRNA的表达;Western印迹分析SOD、转录因子NF-E2相关因子2(NF-E2-related factor,Nrf2)的蛋白表达水平;黄嘌呤氧化酶法测定滋养细胞中SOD活性.结果 (1)子痫前期患者血清LXA4水平为(165.53±18.89) pg/L,与正常孕妇[(545.67±30.91) pg/L]相比明显下降(t=40.64,P<0.01).(2)LPS组与对照组相比,滋养细胞内二氯荧光素(dichlorofluorescein,DCF)密度值明显升高(P<0.01),DCF密度值从53.00±3.08 上升至77.00±5.83( t=8.14,P<0.01);胞核中Nrf2蛋白、SOD mRNA和蛋白表达均显著下降(t分别为34.11、25.61和17.93,P均<0.01);滋养细胞上清中的SOD含量明显下调(t=12.16,P<0.01).(3)干预组与LPS组相比,滋养细胞内DCF密度值明显下降,DCF密度值从77.00±5.83降至62.00±3.39(t=4.97,P<0.01),胞核中Nrf2蛋白、SOD mRNA表达显著上升(t分别为11.74和13.17,P均<0.01),SOD蛋白表达也有所升高(t=4.67,P<0.05),滋养细胞上清中的SOD含量明显增加,酶活力上升至(8.93±0.53) U/ml(t=14.76,P<0.01).(4)拮抗组与干预组相比,滋养细胞上清中SOD含量下降至(6.23±0.41) U/ml(t=9.03,P<0.01),但仍高于LPS组(t=6.10,P<0.01);BOC-2组SOD含量为(4.90±0.32) U/ml,与LPS组相比差异无统计学意义(t=0.79,P>0.05).结论 LXA4可明显减轻LPS引起的胎盘滋养细胞氧化损伤,且LXA4可通过脂氧素受体(lipoxinA4 receptor,ALX-R)激活Nrf2/抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)信号通路来发挥抗氧化损伤的作用.

Abstract：

Objective To explore lipoxinA4 (LXA4) expression in maternal serum of pregnant women and the protective effect and mechanism of LXA4 on trophoblastic cells from oxidative injury. Methods Trophoblastic cells were randomized into six groups: Control group; Lipopolysaccharides (LPS) group, cells were stimulated by 10 μg/ml LPS for 24 h; Intervention group, cells stimulated by LPS were treated with 100 nmol/L LXA4 for 24 h; LXA4 group, cells were treated with 100 nmol/L LXA4 for 24 h; Antagonistic group, cells stimulated by LPS were treated with 100 nmol/L LXA4 plus 100 μmol/L N-tert-butoxycarbonyl-2-pyrrolidine (BOC-2) for 24 h; BOC-2 group, trophoblastic cells stimulated by LPS were treated with 100 μmol/L BOC-2 for 24 h. The serum concentration of LXA4 in normal group and preeclampsia group was detected by ELISA. The intracellular formation of reactive oxygen species (ROS) was detected by 2,7-dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA) as a fluorescent probe. SOD mRNA was analyzed by RT-PCR. SOD and Nrf2 protein expressions were analyzed by Western blot. The levels of SOD in trophoblastic cells were detected by using detection kit. Results (1) The serum concentration of LXA4 was significantly lower in preeclampsia group (165.53±18.89) pg/L than in the control [(545.67±30.91) pg/L, P<0.01]. (2) Compared with control group, the levels of ROS in LPS group were significantly higher, DCF density of trophoblastic cells increased from 53.00±3.08 to 77.00±5.83 (P<0.01). The expression of nuclear Nrf2 protein, SOD mRNA and protein in LPS group were obviously decreased (P<0.01). The levels of SOD in LPS group were also significantly lower (P<0.01). (3) Compared with LPS group, the levels of ROS in intervention group were significantly lower, DCF density of trophoblastic cells decreased from 77.00±5.83 to 62.00±3.39 (P<0.01). The expression of nuclear Nrf2 protein, SOD mRNA in intervention group were obviously increased (P<0.01), so did the SOD protein expression (P<0.05). The levels of SOD were significantly increased from (4.77±0.34) U/ml to (8.93±0.53) U/ml (P<0.01). (4) The levels of SOD in antagonistic group were lower than in intervention group, but still higher than LPS group. [(6.23±0.41) U/ml vs (8.93±0.53) U/ml (P<0.01) or (4.77±0.34) U/ml (P<0.01)]. No significant difference was found in the levels of SOD between BOC-2 and LPS group (P>0.05). Conclusions LXA4 can significantly reduce the oxidative stress of placental trophoblastic cells stimulated by LPS. LXA4 can bind to lipoxin receptors and activate Nrf2-ARE signaling pathway playing a protective effect. So LXA4 in pregnant women can affect the oxidative stress of placenta.     

妊娠高血压综合征患者胎盘滋养层细胞中血红素氧合酶-1的表达

目的 观察正常晚孕妇女（NTP）及妊娠高血压综合征（PIH）患者胎盘滋养层细胞中血红素氧合酶-1（HO-1）的表达.方法 取15例NTP和PIH患者剖宫产术的胎盘绒毛小叶进行培养,应用免疫印迹法（Western Blot）检测胎盘组织中HO-1的蛋白含量.取正常早孕妇女胎盘绒毛小叶进行细胞培养,然后分别加入NTP血清（NTP组）及中重度PIH患者血清（PIH组）,进行分组培养.应用Western Blot检测HO-1的蛋白含量.结果 PIH组胎盘组织中HO-1的蛋白含量与NTP组比较差异有统计学意义（P＜0.01）;PIH患者血清培养的滋养细胞中HO-1的蛋白含量低于正常组.结论 PIH患者胎盘滋养细胞中HO-1的蛋白表达明显减少.