槲皮素对结肠癌的抑癌机制研究

目的 探讨槲皮素对结肠癌细胞系RKO中P53蛋白以及其下游基因Gadd45a表达的影响.方法 采用免疫细胞化学的方法 检测不同浓度槲皮素作用于RKO细胞后的P53蛋白表达的变化,采用RT-PCR与Western Blot技术检测不同浓度槲皮素作用于RKO细胞后的Gadd45a mRNA和蛋白表达的变化.此外,采用Western Blot技术检测不同浓度槲皮素作用于EC109细胞后的Gadd45a蛋白表达的变化.结果 槲皮素作用于RKO细胞后,细胞的P53表达增高,Gadd45a mRNA和蛋白表达水平逐渐增高,并且呈现出一定浓度依赖性.另外,槲皮素作用于EC109细胞后,Gadd45a蛋白表达水平逐渐增高,也呈现出一定浓度依赖性.结论 槲皮素可能通过上调P53依赖途径中p53基因表达使Gadd45a表达增高,由此介入了对肿瘤发生发展的抑制.     

miR-143在卵泡刺激素介导的卵巢颗粒细胞孕酮生成中的作用

目的探讨miR-143在卵泡刺激素(FSH)介导的卵巢颗粒细胞孕酮生成中的作用。方法实时定量RT-PCR检测FSH诱导原代颗粒细胞后miR-143的表达;重组腺病毒感染颗粒细胞进行miR-143的过表达;放射免疫法(RIA)测定孕酮的水平。结果 50ng/ml的FSH处理原代颗粒细胞24h后颗粒细胞分泌孕酮显著增加(P0.001),建立了FSH刺激原代颗粒细胞分泌孕酮模型。miR-143在FSH处理颗粒细胞6、12h后表达没有显著变化,在24h后表达显著增加(P0.01),在48h时表达量最高(P0.001)。与感染对照病毒Ad-miRNC组相比,感染Ad-miR143组的细胞miR-143表达水平显著增加(P0.01)。感染Ad-miR143后颗粒细胞与空白对照组和感染对照病毒组相比,孕酮分泌水平显著升高(P0.01)。结论 miR-143可以促进FSH介导的卵巢颗粒细胞孕酮生成。     

锰与神经细胞凋亡

锰是人体必需的微量元素,而长期慢性接触高浓度锰可引起麻痹震颤,肌肉张力失常为特征的锥体外系损伤的帕金森病(Parkinson's disease,PD)症状.PD及慢性锰中毒有许多相似之处,如锥体外系变性,多巴胺耗竭,能量代谢,自由基与兴奋性氨基酸及钙离子紊乱有关.近年来老年特发性PD发病率增高及三羰基甲基环戊二烯合锰(MMT)作为汽油添加剂的广泛使用,引起了人们对锰与帕金森病关系的关注.     

miR-132在卵泡刺激素介导的颗粒细胞孕酮合成中的作用

目的:探讨miR-132在卵泡刺激素(FSH)介导的颗粒细胞孕酮合成中的作用。方法:FSH暴露处理原代颗粒细胞,利用实时定量RT-PCR检测miR-132的表达,放射免疫法测定P水平,用重组腺病毒感染颗粒细胞进行miR-132的过表达,Western Blot法检测Foxo3a的表达变化。结果:原代颗粒细胞经50ng/ml FSH暴露处理后,miR-132的表达水平显著上调,48h时表达量最高;感染Ad-miR132组的miR-132表达水平高于空白对照组和感染对照重组腺病毒组(P0.001);感染Ad-miR132后颗粒细胞合成P水平高于空白对照组和感染对照重组腺病毒组(P0.001);在FSH暴露处理后,Foxo3a表达呈现逐渐下降的趋势,提示miR-132对Foxo3a的表达有负调控作用。结论:miR-132促进FSH介导的颗粒细胞合成孕酮。     

持续加压冷疗控制踝关节损伤早期肿痛的效果评价

[目的]评价持续加压冷疗控制踝关节损伤早期肿痛的效果。[方法]计算机检索PubMed、中国医院数字图书馆数据库中关于持续加压冷疗的临床对照试验。采用Cochrane Handbook(5.1.0.2011)评价标准对文献质量进行评价。[结果]共纳入6篇文献。6篇文献均报道持续加压冷疗控制踝关节肿胀的效果好,5篇文献报道病人疼痛值低,消肿时间短(1篇文献)、满意程度高(1篇文献);未发生不良反应(1篇文献)。[结论]踝关节损伤早期应用持续加压冷疗控制踝关节肿痛的效果确切;目前尚无充足的证据证实持续加压冷疗增加冷疗不良反应的发生。     

吉西他滨对人口腔鳞癌细胞增殖及c-myc蛋白表达的影响

【目的】探讨吉西他滨体外对人口腔鳞癌细胞株KB增殖情况的影响。【方法】体外培养人口腔鳞癌细胞株KB,MTT法测定不同浓度吉西他滨对KB的抑制率,Western—blotting检测吉西他滨对c—myc蛋白表达影响。【结果】吉西他滨体外可抑制KB的生长,随着药物浓度的增加,对KB的抑制作用增强。与0μg／ml吉西他滨组比较,8、16、32μg/ml吉西他滨均可下调c—myc相对表达量（P〈O．05）。【结论】吉西他滨体外能抑制口腔鳞癌细胞增殖,可能与下调c—myc蛋白表达有关。     

叶酸对阿霉素诱导心脏毒性的拮抗作用研究

目的:探究叶酸对阿霉素(DOX)诱导心脏毒性的拮抗作用。方法:利用DOX(40μmol/L)与叶酸(75μmol/L)处理6hpf斑马鱼胚胎,72hpf时观察胚胎心包水肿情况,计录胚胎15s内心率,荧光显微镜下观察心脏结构,固兰染色观察心脏血细胞分布和量。利用DOX(5μmol/L)与叶酸(75μmol/L)共处理心肌细胞,免疫印迹试验检测切割后的半胱氨酸蛋白酶3(Caspase3)的水平。结果:DOX处理后胚胎表现出心包水肿、心率降低、心脏结构异常。叶酸与DOX共处理后胚胎心包水肿率降低至17%,低于DOX单处理组(P=0.0097)(n=25);心率恢复至37±1.6次/15s,高于DOX单处理组(P0.001)(n=10);叶酸抑制DOX引起的心脏结构异常,并且使固兰染色异常率降低至22.4%,低于DOX单处理组(P=0.0098)(n=35)。叶酸抑制DOX诱导的心肌细胞切割后的Caspase3水平升高。结论:叶酸对DOX诱导的心脏毒性具有一定的拮抗作用,其作用机制可能与抑制心肌细胞凋亡相关。     

氢醌刺激脐血单个核细胞适应性反应基因表达

目的 探讨氢醌刺激对脐血单个细胞活性的影响及醌氧化还原酶(NQO1)、热休克蛋白10(HSP10)及巯氧还蛋白过氧化物酶(Prxs)的表达。方法 取新鲜脐血分离单个核细胞,10μmol/L氢醌预刺激12 h后,再给予250μmol/L氢醌刺激5 h,磷脂蛋白/溴化丙啶(Anexin V/PI)染色检测细胞活力。荧光定量PCR检测NQO1、HSP10及Prxs的表达。结果 脐血单个核细胞受到10μmol/L氢醌预刺激后,可耐受后续250μmol/L氢醌攻击,活细胞数从高剂量组的(44.92±25.10)%提高到(39.37±20.98)%,出现适应性反应。荧光定量PCR结果显示,与空白对照组比较,高剂量组HSP10、Prx3、Prx4表达分别增高(2.22±1.03),(3.44±1.07),(2.97±0.79)倍,适应组Prx1增高(1.08±0.29)倍。NQO1在高剂量组和适应组表达均较空白对照组增高(3.44±1.07)和(3.57±1.31)倍,Prx4在高剂量组表达增高(2.41±0.31)倍,且与适应组比较有明显差别。结论 Prx1、Prx3、prx4、HSP10可能参与氢醌诱导的脐血单个核细胞适应性反应。     

体外牛磺酸抑制糖酵解调控M1型巨噬细胞极化

目的研究牛磺酸调控M1型巨噬细胞极化的分子机制。方法人急性单核细胞白血病细胞系THP-1细胞经100 nmol/L佛波酯处理24h后诱导分化为M0型巨噬细胞;M1型极化组—M0型巨噬细胞经10 ng/ml脂多糖和20ng/ml干扰素γ刺激48h诱导极化为M1型巨噬细胞;牛磺酸处理组—在M1型极化组的基础上,分别加入的牛磺酸与脂多糖、干扰素γ共培养48h。实时荧光定量PCR检测M1型巨噬细胞极化相关标志物:肿瘤坏死因子α(TNF-α)、环加氧酶2(COX-2)、CXC趋化因子配体-10(CXCL-10)和白细胞介素6(IL-6)的mRNA表达水平;微量法试剂盒分别检测糖酵解相关酶—己糖激酶(HK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性;用刃天青检测细胞内线粒体呼吸链代谢酶活性。结果 M1型极化组:M1型极化相关标志物COX-2、TNF-α、IL-6和CXCL-10的mRNA水平明显升高,己糖激酶(HK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性均增加,线粒体呼吸链代谢酶活性降低;牛磺酸处理组:M1型巨噬细胞极化相关标志物COX-2、TNF-α、IL-6和CXCL-10的mRNA水平明显降低,己糖激酶(HK)、乳酸脱...