非基因整合建立人诱导多能性干细胞方法的优化研究

诱导多能性干细胞（iPSC）技术具有临床应用前景,但iPSC的遗传稳定性和成瘤性阻碍了其可能的临床应用。非整合质粒（Episomal）方法无外源基因整合到宿主基因组上并且方法简单,适宜推广,是目前保证iPSC遗传安全性的最佳方案之一,但其诱导效率偏低,严重阻碍了其应用。本研究旨在优化Episomal方法,将脐血单个核细胞（CBMNC）重编程为诱导多能性干细胞（iPSC）,建立无基因整合的iPSC的高效生成技术体系,为以后建立疾病iPSC奠定基础。利用CBMNC,通过比较不同氧含量,诱导质粒,MNC培养方法和预刺激时间等条件对Episo—mal方法进行优化。结果表明：CBMNC采用红系培养液,培养8d,使用启动子为sFFV（spleen focus forming virus）的Episomal载体,在低氧（3％）条件下诱导,CBMNC重编程效率最高,可达到0．12％。通过分析最佳条件下供体细胞成分发现,表型为CD36＋CD71＋CD235alow的有核红细胞是重编程最主要的供体细胞来源。结论：本研究成功建立并优化出一种可推广的高效安全的,可以用于临床应用研究的iPSC诱导技术。     

宫内缺氧对新生大鼠神经元的影响及当归的保护作用

目的 探讨宫内缺氧对新生大鼠海马神经元的影响及当归注射液的保护作用.方法 孕期14 d的SD大鼠21只,随机分为对照组、缺氧组和当归治疗组.缺氧组孕鼠自孕第14天开始经尾静脉注射生理盐水8 ml/kg,1次/d,连续7 d,后用低张性缺氧模型致胚鼠宫内缺氧2 h,连续3 d(孕期第14,15,16天);当归治疗组用250 g/L的当归注射液代替生理盐水,其余处理同缺氧组;对照组不缺氧,其余同缺氧组.孕鼠分娩后立即取新生鼠脑组织,常规石蜡切片,经神经元特异性烯醇化酶(Neuron specific enolase,NSE)免疫组织化学染色后行图像分析.结果 缺氧组新生鼠海马NSE免疫组化阳性细胞的积分光密度(Integrated Optical Density,IOD)值较对照组减少[IOD缺氧组:(4.9±1.1);IOD对照组:(6.2±1.6),P＜0.05];当归组新生鼠海马NSE免疫组化阳性细胞的IOD值较缺氧组增加[IOD治疗组:(6.9±2.6), P＜0.05].结论 一定程度的缺氧可刺激海马CA3区神经元变性;当归注射液对宫内缺氧新生大鼠海马CA3区神经元可能具有保护作用.     

劳氏颈椎Ⅱ号方治疗椎动脉型颈椎病痰湿阻滞证80例

劳氏颈椎Ⅱ号方是浙东著名中医骨伤科世家——劳氏伤科第十一代传人劳建民副主任中医师治疗椎动脉型颈椎病痰湿阻滞证的经验方,为了系统观察其在椎动脉型颈椎病痰湿阻滞证治疗中的临床疗效,我们以该药口服治疗椎动脉型颈椎病80例,并与盐酸氟桂利嗪口服治疗的80例对照,现报告如下。     

中国成人晕厥患者临床特征分析：一项多中心 研究

目的分析中国成人晕厥患者的临床特征。方法该研究为横断面调查。连续纳入2018年6月25日至2021年3月1日中国19个省市自治区、香港特别行政区37家三甲医院急诊、老年科、心内科门诊或晕厥单元就诊且初步诊断为晕厥的患者, 收集相关临床资料, 并对其临床特征进行分析。结果研究共纳入患者4 950例, 年龄(56.3±16.8)岁, 男性2 604例(52.6%)。最常见的晕厥类型为神经介导性晕厥[2 345(47.4%)], 其次为心原性晕厥[1 085(21.9%)], 而直立性低血压性晕厥则相对少见[311(6.3%)], 此外不明原因晕厥患者有1 155例(23.3%)。与≥65岁的患者比较, <65岁的患者中有诱因者更为多见[2 066(72.4%)比786(27.6%), χ2=136.5, P<0.001]。与其他类型晕厥患者比较, 神经介导性晕厥患者中有晕厥先兆者占比较高[1 972(79.0%)比1 908(73.9%), χ2=17.523, P<0.001]。女性患者中有先兆者占比高于男性[1 837(80.0%)比1 863(73.0%), χ2=...     

超声引导下置管溶栓治疗下肢深静脉血栓形成

下肢深静脉血栓形成(deep venous thrombosis，DVT)已成为临床多发病之一。DVT后期可发生深静脉功能不全等一系列病变，严重影响病人的生活质量。目前常用的治疗方法倾向于非手术疗法，主要包括溶栓、抗凝、祛聚等药物治疗。静脉取栓术因其创伤大、术后易复发效果欠佳。我院自2002年12月开始采用超声引导下置管溶栓术治疗下肢深静脉血栓形成。取得     

肺结核患者红细胞免疫功能及T淋巴细胞亚群测定的临床意义

肺结核患者红细胞免疫功能及Ｔ淋巴细胞亚群测定的临床意义青岛医学院第二附属医院（２６６０４２）王英年李惠娟张克佳李玉华岳立成刘瑞贞即墨市市南医院高中设我们检测了部分肺结核患者的红细胞免疫功能及Ｔ淋巴细胞亚群，并与健康人作对照，以探讨其临床意义。现报告如...     

结核分枝杆菌Rv1009基因蛋白的克隆和表达

目的克隆表达结核分枝杆菌促Rv1009基因,序列测定正确后进行融合、表达。方法采用热启动聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Rv1009编码基因,用限制性内切酶消化后插入pGEX 4T-2载体中,将重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE3),目的基因经IPTG诱导,表达Rv1009基因蛋白。结果经PCR扩增在1300bp处发现一条目的片段,获得了结核分枝杆菌H37Rv株Rv1009基因蛋白,经诱导后高效表达分子量为64KD的外源蛋白,与预期分子量大小一致,凝胶自动扫描分析,在A600值为0．6,IPTG终浓度为0．3 mmol／L,诱导表达3 h时融合蛋白表达量即达峰值,占菌体总蛋白的22．8％。结论构建了结核分枝杆菌Rv1009基因重组表达载体,获得了RPF样融合蛋白的高效表达,为今后深入研究奠定了基础。     

脓毒症患者心肌损伤早期血清FABP3和GPBB表达水平及其临床意义研究

目的:探讨血清心脏型脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein 3,FABP3)与糖原磷酸化酶同工酶脑型(glycogen phosphorylase isoenzyme BB,GPBB)在脓毒症患者心肌损伤中的表达水平及其临床意义.方法:对诊断为脓毒症的102例患者根据心肌损伤诊断标准分为非...     

基于中国医院科技量值分析某三甲妇产专科医院科研现状

目的 基于中国医院科技量值的指标和结果,分析医院科研现状,制定科研发展对策.方法 以某三甲妇产专科医院为例,通过科技量值结果和态势分析法,深入探讨医院科研面临的外部环境和内部环境.结果 医院外部机遇是国家和市政府引领科技发展方向,医院领导高度重视、导向明确;挑战是新一代信息技术对科研工作提出交叉融合的要求,高层次人才流...     

分析外固定架治疗骨创伤的临床特点及治疗效果

目的了解骨创伤患者用外固定架方案治疗的临床效果。方法取本院骨科2015年2月至2018年4月收治骨创伤患者36例进行分析,对患者数字编序后每组18例分为常规组与观察组,常规组接受内固定方案治疗,观察组接受外固定架方案治疗。比较骨创伤患者在两种治疗手段下的病情干预效果。结果治疗后观察组优良率显著高于常规组(P0.05);在手术指标方面观察组患者包括手术时间、切口长度、术中出血量、骨折愈合时间等均优于常规组(P0.05);随访期间提示观察组患者治疗方案相关不良反应出现例数显著低于常规组(P0.05)。结论对骨创伤患者用外固定架治疗,无论疗效、对患者创伤以及安全性等均令人满意,患者接受程度高,值得推广。