肾综合征出血热25例死亡病例分析

肾综合征出血热(HFRS)是一组以发热、出血、休克和肾损害为主要临床表现的急性传染性疾病.它的病原体属汉坦病毒.呈地区流行性发病,死亡率较高.为了降低病死率,现对25例死亡病例临床分析如下.     

慢性乙型肝炎抗病毒治疗近况

慢性乙型肝炎 (ＣＨＢ)目前仍以综合治疗为主。由于乙肝病毒的持续复制与肝损害密切相关 ,因此 ,抑制病毒复制是ＣＨＢ治疗的重点。现将ＣＨＢ抗病毒治疗的近况总结如下。1　干扰素[1 ]干扰素 (ＩＦＮ)有α ＩＦＮ、β ＩＦＮ和γ ＩＦＮ三种 ,分别由人体的白细胞、纤维母细胞和致敏淋巴细胞产生 ,以α ＩＦＮ作用最强 ,其作用机制在于阻断病毒繁殖和复制 ,但不能进入宿主细胞杀灭病毒 ,而是与细胞膜接触并在细胞内产生一种特殊的蛋白质 ,即抗病毒蛋白 ,后者可抑制病毒ｍＲＮＡ信息的传递 ,从而阻止病毒在细胞内繁殖。干扰素在病毒感染的细…     

融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对B细胞淋巴瘤BJAB细胞杀伤作用及其机制研究

摘 要：［目的］ 探讨融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对B细胞淋巴瘤细胞株BJAB细胞的杀伤作用及其机制研究。［方法］ 利用流式细胞分析技术（FACS）和激光共聚焦显微镜技术,检测融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM与BJAB细胞的结合活性。MTT法检测融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对BJAB细胞的体外杀伤活性。彗星电泳实验检测融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对BJAB细胞DNA的损伤。FACS检测不同浓度融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM处理BJAB细胞后细胞周期的变化。 ［结果］ FACS和激光共聚焦显微镜技术实验结果表明,融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM能与BJAB细胞结合。MTT法实验结果表明,融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对BJAB细胞杀伤活性较单用力达霉素或阿霉素强,IC50值分别为(0.15±0.02)nmol/L、(0.38±0.03)nmol/L 和(57.15±2.30)nmol/L。彗星电泳实验结果表明,用5pmol/L的融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM及力达霉素处理BJAB细胞后,可引起细胞不同程度的DNA损伤,由于融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM具有靶向性和细胞内化的特性,对DNA造成的损伤较力达霉素组明显。FACS结果显示,随着融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM浓度的增加,S期的比例从53.78%升高至77.29%,呈剂量依赖性。［结论］ 融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM可以靶向杀伤B细胞淋巴瘤细胞株BJAB,引起细胞周期阻滞,在B细胞淋巴瘤生物治疗中具有潜在的应用价值。     

表达BCRP的胚肾细胞系HEK293/BCRP的建立及生物学特征

目的:建立HEK293/BCRP多药耐药细胞系并研究其生物学功能。方法:构建有BCRP基因的表达载体,利用脂质体转染方法将载体转入HEK293细胞,并用RT-PCR、间接免疫荧光染色和流式细胞术分析检测转染细胞系BCRP的表达,体外细胞毒试验检测其对米托蒽醌等的耐药指数,流式细胞术和激光共聚焦分别检测其对罗丹明123和阿霉素的外排作用。结果:HEK293/BCRP细胞系在BCRP mRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.05),对米托蒽醌的耐药指数达112.07倍,经1.5 h和3 h外排,细胞内罗丹明123浓度分别降低了42.25%和69.01%,激光共聚焦显示细胞内阿霉素浓度降低。结论:成功构建了表达BCRP的胚肾细胞系HEK293/BCRP,并对多种抗肿瘤药物具有耐受性。     

研究生招生保密工作对策与思考

随着研究生招生报考人数的急剧增加,做好研究生招生的安全保密工作已经是摆在研究生招生管理者面前的一项紧迫的任务,本文论述了新形势下做好研究生招生保密工作的困难性和必要性,并就做好保密工作提出了相应的对策和措施,以构建良好的招生考试环境。     

靶向CD123的重组白细胞介素-3-力达霉素融合蛋白对白血病MO7e细胞的杀伤机制

 目的　研究白细胞介素-3-力达霉素（IL-3-LDM）融合蛋白靶向杀伤CD+123 肿瘤细胞的作用机制。方法　用CCK-8检测IL-3-LDM融合蛋白靶向杀伤人类原巨核细胞白血病MO7e细胞的作用,用IC20浓度的IL-3-LDM及LDM分别与MO7e靶细胞培养后,利用AnnexinV-FITC及碘化丙啶（PI）染色经流式细胞分选术检测分析细胞凋亡率和周期分布变化。结果　LDM、IL-3-LDM对MO7e细胞的IC50分别为116、50 pmol／L。经IC20浓度的IL-3-LDM（12 pmol／L）融合蛋白与LDM（30 pmol／L）分别处理MO7e细胞后,在24、48、72 h分别检测到细胞凋亡率呈逐渐上升趋势（IL-3-LDM组分别为26.1 %、59.3 %和62.1 %,LDM组分别为34.4 %、43.3 %和55.2 %）,且细胞在处理48和72 h后出现明显的G2／M期阻滞现象,与没有靶向的LDM药物作用机制一致。结论　IL-3-LDM融合蛋白作用机制与LDM一致,通过引起细胞G2／M期阻滞导致细胞凋亡进而死亡,证明IL-3靶向作用及其携带的高效药物LDM杀伤作用的有效性。     

CD20特异性启动子调控腺病毒分泌stTRAIL对淋巴瘤细胞的抑制作用

目的:研究腺病毒携带CD20启动子调控的TRAIL基因特异性杀伤B-NHL细胞的作用。方法:人工合成含有CD20启动子片段-分泌信号-异亮氨酸拉链-s TRAIL(aa114~aa281)-真核poly(A)序列的融合基因,装入腺病毒载体Ad Easy系统,包装出携带P20-st TRAIL序列的腺病毒感染细胞,采用荧光素酶报告基因法研究CD20启动子在CD20+细胞系中的特异性转录,Western blotting验证TRAIL蛋白在细胞内的特异性表达,体外MTT法检测TRAIL特异性抑制CD20+细胞生长的作用。结果:成功构建携带P20-st TRAIL序列的腺病毒载体并分别感染CD20阳性和阴性淋巴瘤细胞系后发现,CD20启动子仅在CD20+的BJAB淋巴瘤细胞中具有转录活性、启动s TRAIL表达并在体外形成具有生物学功能的同源三聚体结构;在细胞中和培养上清中均检测到st TRAIL在mRNA和蛋白水平的表达,但在CD20-细胞系中则无明显表达。体外功能实验显示,BJAB细胞在被Ad P20-st TRAIL感染后自身生长受到明显抑制,而Ad P20-st TRAIL感染的CD20阴性细胞以及空白载体感染的细胞未见生长抑制现象。结论:CD20启动子可以特异性调控腺病毒携带的治疗基因st TRAIL的表达,实现TRAIL对CD20+B-NHL细胞的靶向杀伤。     

二硫键稳定的抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体稳定性研究

目的:研究二硫键稳定的抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体(Diabody)在体外和体内的稳定性.方法:将抗CD3/抗Pgp Diabody置于37℃含0.2%人血清白蛋白(human serum albumin,HSB)的PBS中,孵育不同时间后,用流式细胞术(FACS)检测其结合活性.建立K562/A02裸鼠移植瘤模型,用Cy5荧光标记试剂盒标记抗CD3/抗Pgp Diabody,通过尾静脉注射给荷瘤裸鼠,在小动物活体成像系统上动态观察荧光信号.结果:二硫键稳定的抗CD3/抗Pgp Diabody (Ds-diabdoy)体外孵育72小时后活性无明显下降,而改造前Diabody孵育1小时后活性即开始下降,24小时后活性完全丧失.Ds-diabdoy注射后72小时仍能在肿瘤部位检测到荧光信号,而改造前Diabody在注射后24小时肿瘤部位荧光信号消失. 结论:Ds-diabdoy较改造前Diabody稳定性大大提高.     

可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体与5-Fu联用对肝癌细胞的抑制作用

摘 要：［目的］ 探讨肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)相关的凋亡诱导配体ILZ-sTRAIL与5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-Fu）联合应用,对HepG2肝癌细胞生长的抑制作用。［方法］采用聚合酶链反应（PCR）、酶切、连接等方法构建CMV启动子驱动TNF相关凋亡诱导配体（TRAIL）表达的载体pLentiR.ILZ-sTRAIL及其对照载体pLentiR.CopGFP,经测序验证其正确性。将pLentiR.ILZ-sTRAIL和pLentiR.CopGFP分别转染至293T细胞,48h后收集上清并利用ELISA检测目的蛋白含量。利用CCK8细胞增殖抑制实验、Western blot检测ILZ-sTRAIL与5-Fu联用对HepG2肝癌细胞生长的抑制作用及凋亡蛋白的表达变化。［结果］成功构建表达载体pLentiR.ILZ-sTRAIL及pLentiR.CopGFP,测序正确。ILZ-sTRAIL的表达量达（9.475±0.786）ng/ml。体外ILZ-sTRAIL与5-Fu联用,可协同抑制HepG2肝癌细胞的生长。其中凋亡相关蛋白Bcl-2表达降低,Bax表达增加,Caspase-8、9、3及PARP被剪切活化。［结论］ ILZ-sTRAIL蛋白与5-Fu联合应用对肝癌细胞HepG2具有抑制作用,为肝癌的治疗提供了一种新策略。     

2型糖尿病足截肢危险因素及血脂综合指数对下肢动脉钙化的预测效能

目的探讨2型糖尿病足患者截肢的危险因素及血脂综合指数(LCI)对2型糖尿病足患者并发下肢动脉钙化(LEAC)的预测效能。方法收集2018年3月至2021年4月于秦皇岛市第一医院诊治的80例2型糖尿病足患者的临床资料,所有患者入院后均行彩色多普勒超声检查,根据是否发生LEAC将患者分为钙化组(n=31)和非钙化组(n=49)。比较钙化组与非钙化组患者的血脂相关指标[甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)],并计算LCI。采用受试者操作特征(ROC)曲线分析血脂相关指标对2型糖尿病足患者并发LEAC的预测效能。采用多因素Logistic回归模型分析2型糖尿病足患者截肢的危险因素。结果钙化组患者的TG水平、TC水平、LDL-C水平、LCI均明显高于非钙化组患者,而HDL-C水平明显低于非钙化组患者,差异均有统计学意义(P<0.01)。ROC曲线分析结果显示,LCI对2型糖尿病足患者并发LEAC的预测效能最高。LCI预测2型糖尿病足患者并发LEAC的曲线下面积(AUC)为0.899,高于TG、TC、LDL-C、HDL-C单独预测的AUC(P<0.05)。单因素分析结果显示,截肢患者的年龄、TG水平、TC水平、LDL-C水平、LCI、多重耐药菌感染率、Wagner分级≥3级的患者比例均高于未截肢患者,溃疡面积大于未截肢患者,而HDL-C水平低于未截肢患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。截肢患者与未截肢患者的性别比较,差异无统计学意义(P>0.05)。多因素回归分析结果显示,年龄较高、LCI过高、Wagner分级≥3级均是2型糖尿病足患者发生截肢的危险因素(P<0.05)。结论LCI能够有效评估2型糖尿病足患者的LEAC情况,年龄较高、LCI过高、Wagner分级≥3级的2型糖尿病足患者存在较高的截肢风险。