蛔虫粗抗原对人肺腺癌细胞凋亡中白细胞介素6和转化生长因子β分泌的影响

目的探讨蛔虫粗抗原对人肺腺癌细胞株(A549)凋亡,以及白细胞介素(IL-6)和转化生长因子β(TGF-β)分泌的影响。方法收集新鲜蛔虫虫体,制备蛔虫粗抗原。将A549细胞分别与低、中、高浓度的蛔虫粗抗原(蛋白浓度分别为25、125和500μg/ml)共培养,即低浓度组、中浓度组和高浓度组,同时设A549细胞+培养液的阴性对照组和阿霉素阳性对照组。用流式细胞术、ELISA和实时定量PCR(q PCR)分别检测作用1、18和24 h后A549细胞凋亡率和细胞周期,以及IL-6和TGF-β细胞因子水平和m RNA水平。结果 3个浓度的蛔虫粗抗原作用于细胞1、18和24 h后,细胞凋亡率均显著高于同时间点的阴性对照组(P0.01)。其中,中浓度组作用18 h后细胞凋亡率最高,为(47.10±3.68)%。细胞周期检测结果显示,中浓度组作用18 h后,G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例下降,与阴性对照组间差异有统计学意义(P0.01)。ELISA检测结果显示,相同作用时间下,A549细胞IL-6水平大多随蛔虫粗抗原作用浓度的增加而升高,TGF-β水平随着蛔虫粗抗原浓度和作用时间的不同,无明显的变化趋势。q PCR结果显示,中浓度组A549细胞的IL-6和TGF-βm RNA水平在作用18 h后达到最高,分别为5.95±0.31和3.43±0.35,且显著高于阴性对照组(P0.01)。结论蛔虫粗抗原可诱导A549细胞凋亡,并将细胞阻滞在G0/G1期,其调节过程可能有IL-6和TGF-β的参与。     

骨髓基质细胞移植对大鼠局灶性脑缺血区血运重建的作用

作为较理想的细胞移植治疗的种子细胞来源,骨髓基质细胞(BMSC)日益受到重视。有研究证实给大鼠心肌缺血区进行自体骨髓细胞移植能促进新生血管的形成。本研究初步观察了经颈动脉移植的BMSC在脑缺血区中的分布及对缺血区新生血管形成的影响。 一、材料与方法 1.复制局灶性脑缺血模型:雄性SD大鼠,体重250～300 g,参照文献[2]以线栓法复制局灶性脑缺血模型。 2.5-溴脱氧尿嘧陡(BrdU)标记的骨     

胰蛋白酶在原代细胞制备中的灵活应用

目的：探讨胰蛋白酶消化组织块制备原代细胞的最佳浓度。方法：在37℃下，相同时间里不同浓度的胰蛋白酶消化等量的组织块，制备原代细胞，对获得的原代细胞细胞数、细胞成活率及细胞粘附性进行观察。结果：在同等条件下，0.125％胰蛋白酶为制备大多数种类原代细胞的较为理想的浓度。结论：在一定的温度及时间条件下，用0.25%的胰蛋白酶消化原代细胞得率较低，而0.125％胰蛋白酶消化的细胞得率较高。     

兔正常膀胱移行上皮细胞的体外培养和鉴定

目的：摸索膀胱移行上皮细胞的合适培养条件，为建立满足组织工程需要的尿路上皮细胞体培养体系提供实验基础。方法：采用无血清培养系统，以组织块法原代培养兔正常膀胱移行上皮细胞并传代。动态观察细胞形态变化和生长增殖状况，进行免疫细胞化学染色鉴定细胞来源。结果：原代第4开始有上皮样细胞自组织块边缘长出，第10-14天汇合，呈典型铺路石样外观。2代超细胞生长4-7d后汇合，未发现成纤维样细胞混杂生长。细胞可传至6代以上。细胞角蛋白AE1/AE3单抗染色各代细胞均呈阳性反应。结论：分离培养的是单一的膀胱移行上皮细胞，细胞具有一定的增殖传代能力。     

氯化镧对内毒素攻击后小鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的 探讨氯化镧对内毒素(LPS)攻击后小鼠胸腺细胞凋亡的影响。方法 通过观察氯化镧对LPS(12．5mg／kg)攻击后小鼠胸腺细胞DNA片段百分率、胸腺细胞凋亡百分率和胸腺细胞DNA片段琼脂糖凝胶电泳结果的影响，探讨其对小鼠胸腺细胞凋亡状况可能作用。结果 10mg／kg氯化镧能显降低内毒素血症小鼠胸腺细胞DNA片段百分率、胸腺细胞凋亡百分率．抑制胸腺细胞的凋亡。结论 LPS攻击后，可导致小鼠胸腺细胞发生凋亡．而氯化镧对LPS诱导的小鼠胸腺细胞凋亡具有一定的抑制作用。     

HBsAg负载慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞表型分子的变化

慢性乙型肝炎(CHB)病毒感染后，树突状细胞(DCs)抗原提呈功能下降，表现为成熟障碍，主要组织相容性复合体(MHC)分子和共刺激分子的表达不同程度下调，刺激混合淋巴细胞反应(MLR)能力减弱。由于DCs不能有效地提呈抗原，无法激活正免疫应答，这可能与乙型肝炎病毒(HBV)持续感染免疫耐受形成的机制有关。     

口服转移因子对化疗损伤小鼠免疫功能的恢复

目的 :研究猪脾转移因子 (TF)口服途径给药对化疗损伤小鼠免疫功能恢复的作用。方法 :用环磷酰胺 (CP) 75mg/kg连续 8d给予小鼠皮下注射 ,造成免疫功能低下模型 ,同时配以口服TF 1mg/d进行治疗 (设立CP对照组 ,TF注射对照组及正常对照组 ) ,在治疗后第 8d ,分别称各组小鼠体重及脾脏 ,计算脾重指数 ,并进行外周血中性白细胞计数和用MTT法测定鼠脾淋巴细胞转化刺激指数。结果 :TF口服组体重、脾重指数 ,中性白细胞和淋巴细胞转化刺激指数多项观察指标均明显高于CP对照组 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ,与TF注射对照组比较 ,作用效果相近 (P >0 .0 5 )。结论 :口服TF能促进化疗引起的小鼠免疫功能低下的恢复 ,为其应用于临床治疗免疫功能降低性疾病提供实验依据。     

头颈部肿瘤多瘤抑制基因p16表达研究

目的探讨多瘤抑癌基因蛋白p16表达与原发性和继发性头颈部肿瘤生物学行为之间的关系。方法通过细针吸取及术中印片细胞学诊断病例获取标本,进行免疫细胞化学技术分析,检测220例头颈部良、恶性肿瘤及其他病变中p16蛋白表达水平,并对头颈部肿瘤组织学类型、分化程度的关系进行分析研究。结果 p16蛋白在头颈部良性病变的阳性表达率为84.63%,明显高于恶性肿瘤的表达率53.90%,差异有显著性（P〈0.05）。p16蛋白表达与恶性肿瘤的细胞分化程度有关,高分化肿瘤其表达水平明显高于低分化肿瘤,同时显示p16蛋白表达程度与头颈部肿瘤大小及有无转移均无明显关联。结论多瘤抑癌基因蛋白p16参与了肿瘤的发生及分化,检测p16蛋白表达水平,可能成为肿瘤诊断和预测预后的一项新指标。     

雷公藤内酯醇联合紫杉醇对人卵巢癌耐顺铂细胞株体外活性的影响及机制

目的探讨雷公藤内酯醇（TP）联合紫杉醇对人卵巢癌耐顺铂细胞株（CoC1/DDP）体外活性的影响及其可能机制。方法将对数生长期CoC1/DDP细胞随机分为4组,TP组采用10 ng/ml TP作用于细胞,紫杉醇组采用3.13μg/ml紫杉醇,联合组采用10 ng/ml TP和3.13μg/ml紫杉醇,空白对照组不作任何处理（调零组）,采用MTT法检测各组细胞生长抑制率,透射电子显微镜下观察细胞超微结构变化,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡情况。结果联合组生长抑制率明显高于单药组,且呈时间依赖性（P〈0.05）;透射电子显微镜示TP组、紫杉醇组、联合组细胞均呈凋亡改变,联合组细胞凋亡率明显高于单药组,紫杉醇组与联合组细胞周期中G2/M期的比例明显增高（P均〈0.05）。结论 TP联合紫杉醇可协同抑制CoC1/DDP细胞生长,促进其凋亡,其机制可能为使细胞阻滞于G2/M期。     

蛔虫体腔液对肿瘤细胞的细胞毒作用

目的观察蛔虫体腔液（ascaris body fluid，ABF）对小鼠黑色素瘤细胞（B16）、小鼠宫颈癌细胞（U14）和小鼠腹水瘤细胞（S180）的细胞毒作用及其与浓度的关系。方法用6种不同浓度的ABF对B16细胞、U14细胞和S180细胞进行作用，采用四氮唑盐酶还原法（Microculture tetrazolium test，MTT）观察其细胞毒性。结果在一定浓度范围内蛔虫体腔液对上述三种肿瘤细胞均产生细胞毒作用。当浓度为1600mg／ml时，对S180细胞的细胞毒性为57.4％；对B16细胞的细胞毒性达59．6％；对U14细胞的细胞毒性达63．2％．表现出极显著的细胞毒作用。结论在一定浓度范围内蛔虫体腔液对肿瘤细胞有明显的细胞毒作用．且与浓度有依赖关系。